孙梅珍
- 作品数：52 被引量：315H指数：11
- 供职机构：首都医科大学基础医学院神经外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技计划项目北京市科委248重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 停通气缺氧预处理对脑出血模型大鼠缺氧诱导因子-1α的影响被引量：7
- 2006年
- 目的观察停通气缺氧预处理（HPC）对脑出血（ICH）模型大鼠神经行为学评分、血肿周围组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达和一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性的影响。方法180只雄性SD大鼠，体质量260～290g，用数字表法随机分为假手术组（S组，60只）、脑出血组（I组，60只）和缺氧预处理组（P组，60只）。所有大鼠麻醉后行气管插管并给予维库溴胺机械控制通气。P组进行停通气1min、复通气5min的缺氧预处理（反复4次），其他2组未做处理，仅进行机械通气。所有大鼠机械通气1h后，拔出气管导管。采用立体定向技术，将50μL自体不凝血注入P组和Ⅰ组动物的尾状核中，S组注入同样剂量的生理盐水。在ICH后6h、24h、48h和72h各时间点，从存活鼠中随机抽取10只大鼠记录神经行为学（NDS）评分和Rosenberg评分，其中5只连续切片进行HIF-1α免疫组化染色；另5只大鼠活杀后取脑，用分光光度法测定血肿周围组织中NO质量摩尔浓度和NOS酶活性。结果P组神经行为学评分在ICH后6h、24h和48h均优于Ⅰ组（P〈0．05）。Rosenberg评分P组在6h为3．9±1．5，优于I组的5．4±1．5（P〈0．01）。P组和Ⅰ组的HIF-1α阳性细胞明显增多，与S组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。P组在24hHIF-1α阳性细胞数为（6．0±0．8）个，明显低于Ⅰ组[（11．4±1．8）个，P〈0．01]。NO质量摩尔浓度和NOS酶活力在ICH后也显著增加，其中P组NO质量摩尔浓度在24h的变化明显轻于Ⅰ组（P〈0．01）。结论停通气缺氧预处理能够改善脑出血模型大鼠的神经功能预后，具有一定的脑保护作用。其机制可能与降低HIF-1α的表达，抑制脑组织中NO质量摩尔浓度和NOS酶活性增加有关。
- 安立新王保国彭宇明袁芳孙梅珍
- 关键词：缺氧预处理脑出血HIF-1ΑNOS
- 人永生化骨髓基质干细胞单克隆细胞系分化差异性的研究
- 2009年
- 目的研究单克隆永生化骨髓基质干细胞在体内和体外多向分化的差异性。方法对挑取的单克隆细胞系和亲代细胞系分别在体外进行脂肪、骨、神经样细胞诱导分化；接种联合免疫缺陷性鼠，对移植物进行免疫组化染色；比较体内分化的不同。结果在体外诱导分化中，单克隆细胞系丢失成骨分化的能力；体内分化中，人永生化骨髓基质细胞（HMSC-TERT）-2较其他细胞系在人白细胞共同抗原，神经胶质酸性蛋白，波形蛋白表达上明显增强；HMSC—TERT-C19较HMSC-TERT-2，HMSC-TERT-20以及MSC-H在角蛋白表达上明显增强；HMSC—TERT—C2比HMSC-TERT-2在肌动蛋白表达上明显增强。结论人永生化骨髓基质细胞单克隆细胞系在体内和体外的分化存在差异性。提示标准化体外培养的条件和体内接种的程序，对早日将干细胞应用于临床有重要的意义。
- 孙泽林张亚卓桂松柏王红云孙梅珍李丹
- 关键词：骨髓基质干细胞端粒酶诱导分化单克隆
- 两种方法制作大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型比较被引量：12
- 2008年
- 目的制作短暂性大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型，比较颈总动脉进线法和颈外动脉进线法（改良LONGA法）优劣。方法颈总动脉进线法和改良LONGA法栓塞大鼠大脑中动脉，栓塞2h后再灌注24h，以LONGA法标准对模型评分，并对梗死体积进行测定，7d时流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果改良LONGA法和颈总动脉进线法神经行为学评分分别为2．30±0．82和1．00±0．63，两种方法比较差异有显著性（t=6.886，P〈0.05）；两法脑梗死体积相比差异有显著性（t=3.96-4.45，P〈0.05）；两法细胞凋亡率比较差异有显著性（F=348.46，q=22.89，P〈0.05）。结论与颈总动脉进线法相比，改良LONGA法大鼠神经行为学评分高、脑梗死体积大、凋亡细胞数多，模型稳定性好。
- 厉建元张亚卓姚维成桂松柏孙梅珍
- 关键词：大脑中动脉再灌注损伤细胞凋亡
- 体外合成MDR1 siRNA及siPORT脂质体转染siRNA至神经胶质瘤细胞系BT325实验性研究
- ＜正＞RNA干扰（RNAi）是自然产生的保护基因组的机制。在过去的5年中,这一领域的研究发生了惊人的进步。基因沉默的潜在的分子机制为我们提供了小干扰RNAs（siRNAs）,它可以高特异性和高效率的以任何基因为靶基因。神...
- 赵澎孙梅珍杨冬朴名学张亚卓
- 文献传递
- 氧化损伤星形胶质细胞与骨髓基质细胞共培养的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察氧化损伤星形胶质细胞与骨髓基质细胞（BMSCs）共培养时细胞损伤恢复及存活能力的改变，以进一步探讨BMSCs修复脑损伤的机制。方法过氧化氢（H2P2）损伤体外培养的星形胶质细胞，与BMSCs共培养后光镜下观察细胞生存情况。分别在培养后第1、3天取细胞培养液应用ELISA试剂盒测定碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、神经生长因子（NGF）以及表皮生长因子（EGF）的分泌水平，并与氧化损伤星形胶质细胞单独培养组和BMSCs单独培养组进行比较。结果培养后3d和7d，共培养组星形胶质细胞的恢复及两种细胞的存活情况明显优于单独培养组。培养后1d和3d，共培养组细胞培养液中NGF、BDNF以及bFGF的浓度明显高于两个单独培养组之和，但是共培养组培养液中EGF的浓度明显低于两个单独培养组之和。结论氧化损伤星形胶质细胞和BMSCs共培养能够提高星形胶质细胞的存活能力，增加NGF、BDNF以及bFGF的分泌水平。BMSCs移植修复脑损伤的功能可能部分是通过促进损伤星形胶质细胞恢复、减少星形胶质细胞死亡、增加神经营养和生长因子分泌完成。
- 桂松柏张亚卓孙梅珍王红云何乐李丹
- 关键词：骨髓基质细胞星形胶质细胞共同培养技术神经生长因子类
- 人脑星形细胞肿瘤中FHIT、PCNA蛋白表达关系的研究被引量：10
- 2006年
- 目的研究人脑星形细胞肿瘤中FHIT、PCNA蛋白的差异表达,探讨它们与病理分级之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测了50例星形细胞肿瘤中不同级别的FHIT、PCNA蛋白的表达水平,以10例非肿瘤脑组织作对照。结果非肿瘤脑组织FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为100％,0％,星形细胞肿瘤中FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为40％,86％;尽管在星形细胞肿瘤中FHIT、PCNA蛋白表达总体差异有统计学意义(P<0．05),但Ⅲ级与Ⅳ级比较差异无统计学意义(P>0．05);经统计学分析FHIT、PCNA蛋白呈显著负相关(P<0．01)。结论FHIT、PCNA蛋白的表达可能与星形细胞肿瘤的恶性程序有关,星形细胞肿瘤中FHIT、PCNA蛋白表达之间的显著负相关,提示FHIT蛋白可能对细胞增殖具有负性调控作用。
- 席峥高志安孔庆如孙梅珍王红云
- 关键词：星形细胞瘤FHIT蛋白PCNA蛋白
- 体内预变性坐骨神经体外培养雪旺细胞被引量：1
- 2001年
- 目的 介绍一种快速、简便获取大量Schwann细胞培养方法。方法 体内切断一侧坐骨神经，1、2、3、4d及1、2周后取坐骨神经进行体外Schwann细胞培养。对侧不做任何处理的坐骨神经作为对照组。同时在培养液中加入刺激因子forskolin和BTI。结果 体内预变性后Schwann细胞产量高于对照组3倍；加刺激因子forskolin和BTI后高于对照组5倍。预变性的最佳时间为1周。结论 这种体内预变性坐骨神经后再进行体外Schwann细胞培养不失为一种较好的实验方法。
- 孙梅珍万虹等
- 关键词：SCHWANN细胞坐骨神经预变性细胞培养
- 脑胶质瘤中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨脑胶质瘤中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态,及其在肿瘤发生中的作用。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,检测42例脑胶质瘤hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结果hMLH1启动子区甲基化2例(4.8%),hMSH2启动子区甲基化13例(31.0%),启动子区甲基化与性别、年龄、病理类型和病理分级无明显的相关性。结论hMSH2基因启动子的CpG岛在脑胶质瘤中有高甲基化现象,可能与胶质瘤的发生有关,而hMLH1基因启动子区甲基化少见。
- 裴傲张亚卓万伟庆孙梅珍王红云何乐
- 关键词：神经胶质瘤碱基错配DNA修复甲基化
- shRNA表达载体特异性抑制人脑胶质瘤细胞BT325绿色荧光蛋白基因的表达被引量：1
- 2005年
- 目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)特异性发夹结构RNA (shRNA)对人类胶质瘤BT325细胞系GFP基因表达的抑制作用。方法设计并合成针对GFP基因的shRNA序列,与报告基因质粒pEGFP-N1共转染,选择最佳转染比例,荧光显微镜下观察GFP表达的效率和对GFP的抑制效应。结果质粒pSIREN-RetroQ-RNAi经双酶切得到6 kb和100 bp条带,结合测序验证,与实验设计的shRNA长度相符。质粒DNA与XP-1转染比例为1∶2.5时GFP表达最强。BT325细胞干扰48 h时GFP表达显著减少。结论BT325细胞系中存在RNA干扰现象,且干扰效果特异、稳定;本实验为研究基因功能提供了新的策略。
- 赵澎张亚卓孙梅珍
- 关键词：绿色荧光蛋白基因表达调控
- 体内外不同环境对大鼠胚胎神经干细胞分化的影响被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨体内外不同环境条件对大鼠胚胎神经干细胞分化的影响。方法 孕龄 16天的大鼠胚胎神经干细胞体外扩增后移植至大鼠脑内尾状核出血部位 ;同时体外将其与新生大鼠Schwann细胞共培养 ,应用免疫组织化学和免疫荧光方法分别检测神经细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性标志蛋白tubulin β、MAP2 ,GFAP和GalC的表达。结果 移植到脑内的BrdU阳性细胞环绕脑出血区域分布 ,大部分细胞GFAP阳性 ,少部分细胞tubulin β或GalC阳性 ;而与Schwann细胞共培养后 ,神经干细胞大部分呈tubulin β和MAP2免疫荧光阳性 ,少部分呈GFAP或GalC免疫荧光阳性。结论 脑内尾状核出血环境诱导神经干细胞主要分化成神经胶质细胞 ;而体外与Schwann细胞共培养主要诱导其分化成神经细胞。
- 万虹安沂华王红云孙梅珍张亚卓王忠诚
- 关键词：胚胎细胞分化神经干细胞雪旺氏细胞免疫荧光法
