孙巧玲
- 作品数：7 被引量：35H指数：3
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- μ型阿片受体的克隆及序列分析
- 2005年
- 目的 为实现人μ型阿片受体在哺乳动物细胞中的表达以及研究其生物学特性、下游基因表达及功能研究,克隆了人全长μ型受体cDNA。方法 从人脑组织中提取总RNA ,通过逆转录巢式PCR ,扩增μ受体全长cDNA。克隆至pMD1 8 -T载体中,并进行了酶切、PCR鉴定及测序分析。结果 获得大小1 2 2 9bp大小的μ受体全长cDNA基因,并构建到载体中,为研究受体信号转导下游基因的表达奠定理论基础。结论 利用巢式RT PCR法成功克隆了的μ受体全长cDNA序列,构建了pT -MD/hμR质粒。
- 孙巧玲陈京白波
- 关键词：巢式PCR
- 大鼠淋巴滞留性脑病bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化被引量：9
- 2006年
- 目的:研究大鼠淋巴滞留性脑病模型中大脑皮层bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化。方法:用阻断颈部淋巴引流的方法复制大鼠淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,HE染色观察脑组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡,RT-PCR检测大脑皮层凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:显微镜下见脑组织有水肿的结构变化,第5d最明显。大脑皮层TUNEL阳性细胞数和bax表达从术后2d开始增多,5d达最高峰,14d降至对照组水平。bcl-2表达于术后1d开始增高,5d达最高值,第7d下降至对照组水平。bax表达增高的程度大于bcl-2。结论:阻断颈部淋巴引流可导致淋巴滞留性脑病,大脑皮层神经细胞死亡以凋亡为主并与bcl-2和bax的表达增加有关。
- 李育娴夏作理陈连璧叶文静杨明峰孙巧玲
- 关键词：脑病细胞凋亡基因表达
- 白细胞介素1对骨关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶阻滞剂1基因表达的影响被引量：6
- 2004年
- 目的:观察不同浓度白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养人的关节透明软骨细胞基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法:将体外培养的人透明软骨细胞随机分为1,10,100μg/L浓度IL-1β作用组(分别加相应剂量作用12h)及空白对照组。采用反转录PCR(RT-PCR)方法及实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法,观察透明软骨细胞TIMP-1mRNA的表达状况,比较不同剂量IL-1β作用下传代培养的人透明软骨细胞TIMP-1基因表达与正常软骨细胞相应基因表达的关系。结果:正常人的软骨细胞均有TIMP-1的表达,但表达量极低。相同的作用条件,随着IL-1β浓度的增高,1,10,100μg/L组与空白对照组相比,TIMP-1的含量分别为正常组的12%,33%,40%,且各组之间差异有显著性意义(P<0.05)。结论:IL-1β对人的软骨细胞TIMP-1表达的调控作用随其浓度的变化而不同。
- 赵庆华亓建洪孙巧玲燕好军
- 关键词：软骨金属蛋白酶类白细胞介素-1Β软骨细胞
- P53 mRNA在骨关节炎软骨组织中的表达及其意义被引量：3
- 2004年
- 目的 检测骨关节炎 (OA)软骨组织中P5 3基因的表达及其与骨关节炎临床分期的关系。方法 应用逆转录PCR(RT PCR)方法 ,检测 6例正常对照、15例早期骨关节炎患者和 2 2例晚期骨关节炎患者软骨组织野生型P5 3mRNA的含量 ;应用定量图像分析比较相对含量。结果 野生型P5 3基因在中期骨关节炎患者的软骨组织中表达阳性率为 33% (5 / 15 ) ;明显低于重度骨关节炎患者 6 8% (15 / 2 2 ) ,P <0 0 1,且基因表达量与骨关节炎病变程度存在程度一致性。结论 野生型P5 3mRNA的表达与骨关节炎的病变程度相关 ,并通过对细胞凋亡的调控参与骨关节炎的发生、发展。
- 赵庆华亓建洪王川孙巧玲
- 关键词：骨关节炎P53逆转录聚合酶链反应
- 白细胞介素-1β对人软骨细胞BaxmRNA表达的作用被引量：3
- 2004年
- 目的探讨人透明软骨细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)对凋亡基因BaxmRNA表达的作用。方法应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量PCR的方法检测IL-1β作用下传代培养的人透明软骨细胞BaxmRNA的含量。结果对于传代培养人的软骨细胞,IL-1β浓度为1、10、100ng/ml作用12h,对BaxmRNA的调节作用存在剂量依赖关系,各组之间差异有显著性。结论IL-1β可以按照剂量依赖方式正向调节软骨细胞BaxmRNA基因的表达,并通过对细胞凋亡的调控参与骨关节炎的发生、发展。
- 赵庆华亓建洪孙巧玲
- 关键词：白细胞介素-1ΒBAXMRNA骨关节炎
- 大鼠颈部淋巴引流阻断后海马bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化被引量：14
- 2005年
- 为了研究淋巴滞留性脑病中海马bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化,本实验用阻断大鼠颈部淋巴引流的方法制备淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,H&E染色观察海马组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡,RT-PCR检测海马bcl-2和bax的mRNA表达。结果显示脑组织有水肿的结构变化,第5天最明显。海马TUNEL阳性细胞数从术后2d开始增多,5d达最高值。bax表达于术后1d开始增高,第2天即达最高值。bcl-2表达于术后1d开始降低,5d达最低值。第14天上述指标均恢复到对照组水平。研究表明,阻断颈部淋巴引流所导致的淋巴滞留性脑病中海马bcl-2和bax的表达发生变化,而且海马神经细胞的死亡以凋亡为主。
- 李育娴夏作理陈连璧叶文静杨明峰孙巧玲
- 关键词：WISTAR淋巴结切除脑损伤细胞凋亡BCL-2
- IL-1β对人的软骨细胞Bax mRNA表达的作用及意义被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨白介素 - 1 β (IL - 1 )对人的透明软骨细胞BaxmRNA基因表达的作用及相关意义。方法 应用逆转录PCR(RT -PCR)方法检测IL - 1 β作用下传代培养的人的透明软骨细胞BaxmRNA的含量 ;并且应用实时荧光定量方法 ,进行BaxmRNA的相对含量。结果 对于传代培养的人的软骨细胞 ,IL - 1 β浓度为 1ng/ml,1 0ng/ml,1 0 0ng/ml作用 1 2h ,其对BaxmRNA调节作用存在剂量依赖关系 ,各组之间存在显著性差异。结论 IL - 1 β可以按照剂量依赖方式正向调节软骨细胞BaxmRNA基因的表达 ,并通过对细胞凋亡的调控参与骨关节炎的发生。
- 赵庆华亓建洪孙巧玲魏然
- 关键词：白细胞介素-1Β软骨细胞逆转录聚合酶链反应骨关节炎
