目的探讨藏雪莲水提取物能否减轻中波红斑效应紫外线(UVB)辐射后人角质形成细胞(Ha Ca T细胞)的氧化损伤。方法体外培养Ha Ca T细胞,分为低剂量辐射组(30 m J/cm2,辐射1 h)、高剂量辐射组(60 m J/cm2,辐射1 h),低剂量辐射组进一步分为对照组、L-UVB组、L-UVB+低剂量臧雪莲组(臧雪莲1 g/L)、L-UVB+高剂量臧雪莲组(臧雪莲5 g/L),高剂量辐射组进一步分为对照组、H-UVB组、H-UVB+低剂量臧雪莲组(臧雪莲1 g/L)、H-UVB+高剂量臧雪莲组(臧雪莲5 g/L)。藏雪莲水提取物于UVB辐射前1 h加入细胞培养基中,照射后18 h,收集细胞。通过台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况,MTS比色法检测细胞增殖情况,选出氧化损伤较轻组行酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活力。结果 L-UVB组吸光度(A)值较对照组降低(P<0.05),L-UVB+低剂量臧雪莲组、L-UVB+高剂量臧雪莲组A值较L-UVB组升高(P<0.05);H-UVB组A值较对照组降低(P<0.05),H-UVB+低剂量臧雪莲组、H-UVB+高剂量臧雪莲组A值较H-UVB组升高(P<0.05)。L-UVB组SOD活力、GSH含量、CAT活力较对照组降低,MDA含量较对照组升高(P<0.05);L-UVB+低剂量臧雪莲组GSH含量较L-UVB组降低、MDA含量较L-UVB组升高(P<0.05);L-UVB+高剂量臧雪莲组SOD活力、GSH含量、CAT活力较L-UVB组和L-UVB+低剂量臧雪莲组升高,MDA含量较L-UVB组和L-UVB+低剂量臧雪莲组降低(P<0.05)。结论低剂量藏雪莲水提取物对UVB辐射后Ha Ca T细胞无抗氧化损伤作用,高剂量藏雪莲水提取物对UVB辐射后Ha Ca T细胞有抗氧化损伤作用。
目的:研究藏雪莲水提取物减轻中波紫外线(UVB)照射人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)后细胞凋亡的机制。方法:MTS法检测细胞增殖活性,台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况,酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力、细胞丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)含量,Western Blot及免疫荧光法检测细胞凋亡相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内钙离子(Ca2+)含量。结果:藏雪莲水提取物可以促进Ha Ca T增殖,降低细胞蓝染数量,降低SOD、CAT活性及GSH含量,增加MDA含量(P<0.05),升高B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)蛋白,降低Bcl-2相关x(Bax)蛋白及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达(P<0.05),降低UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度,升高线粒体膜电位。结论:藏雪莲水提取物能够降低Ha Ca T细胞凋亡来减轻UVB辐射后Ha Ca T细胞的凋亡。
目的探讨藏雪莲(SSB)多糖是否通过P38丝裂原激活蛋白激酶(P38MAPK)通路减轻中波紫外线(UVB)辐射后皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)凋亡引起炎性损伤。方法 2014年10月—2015年3月,提取SSB多糖,体外培养Ha Ca T细胞,将Ha Ca T细胞分为低剂量辐射组(30 m J/cm2,辐射1 h,A组)和高剂量辐射组(60 m J/cm2,辐射1 h,B组);将A组和B组又分别分为对照组(1组)、辐射组(UVB,2组)、低剂量SSB多糖组(UVB+SSB 10 mg/ml,3组)和高剂量SSB多糖组(UVB+SSB 40 mg/ml,4组)。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测并比较白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、P38MAPK、P53、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平。结果 A2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于A1组,Bcl-2水平低于A1组(P<0.05);A3组IL-6、TNF-α、P38MAPK、Caspase-3水平高于A1组(P<0.05);A4组TNF-α、Bcl-2水平高于A1组(P<0.05);A3组、A4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于A2组,Bcl-2水平高于A2组(P<0.05);A4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于A3组,Bcl-2水平高于A3组(P<0.05)。B2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B3组IL-6、TNF-α水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B4组IL-6、Bcl-2水平高于B1组,TNF-α、Caspase-3水平低于B1组(P<0.05);B3组、B4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于B2组,Bcl-2水平高于B2组(P<0.05);B4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于B3组,Bcl-2水平高于B3组(P<0.05)。结论 SSB多糖通过P38MAPK通路减少UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡,进而减轻Ha Ca T细胞的炎性损伤。
目的探讨藏雪莲水提取物对中波红斑效应紫外线(UVB)辐射后人角质形成细胞(Ha Ca T细胞)中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、p53、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达水平。方法体外培养Ha Ca T细胞,采用随机数字表法分为3组,对照组、UVB辐射组(UVB 30 m J/cm2,辐射1 h)、藏雪莲水提取物组(UVB30 m J/cm2,辐射1 h+藏雪莲5 g/L),藏雪莲水提取物于UVB辐射前1 h加入细胞培养基中,辐射后18 h,收集细胞,采用台盼蓝染色观察细胞形态,检测Ha Ca T细胞IL-6、TNF-α、p38MAPK、p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平。结果台盼蓝染色显示,UVB辐射组与对照组比较,Ha Ca T细胞蓝染数量增加,并出现肿胀、细胞漂浮,但仍可看出细胞形态;藏雪莲水提取物组与UVB辐射组比较,Ha Ca T细胞蓝染数量下降,细胞水肿程度减轻,并且细胞形态接近对照组。UVB辐射组与对照组比较,Ha Ca T细胞IL-6、TNF-α、p38MAPK、p53、Bax、Caspase-3表达水平升高,Bcl-2表达水平降低(P<0.05);藏雪莲水提取物组与UVB辐射组比较,Ha Ca T细胞IL-6、TNF-α、p38MAPK、p53、Bax、Caspase-3表达水平降低,Bcl-2表达水平升高(P<0.05)。结论藏雪莲水提取物能够降低UVB辐射后Ha Ca T细胞IL-6、TNF-α、p38MAPK、p53、Bax、Caspase-3表达水平,升高Bcl-2表达水平。
