孔小卫
- 作品数：40 被引量：242H指数：10
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 红色糖多孢菌C-12羟基化酶基因eryK的克隆及原核表达
- 2008年
- 目的:探讨红色糖多孢菌C-12羟基化酶基因eryK在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法:将eryK基因克隆到表达质粒pET-22b(+),使其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,并对装液量、接种量、诱导时间、IPTG浓度和FeC l3浓度等表达条件进行优化。结果与结论:SDS-PAGE电泳显示,在相对分子质量44×103处有EryK蛋白条带,其含量占菌体总蛋白的58%以上。证明高GC含量的红色糖多孢菌C-12羟基化酶基因EryK可以在大肠杆菌BL21(DE3)中高效地表达,为体外研究EryK酶学相关性质以及大规模发酵奠定了基础。
- 赵皓黄训端张部昌孔小卫张书祥查向东
- 关键词：红色糖多孢菌
- 巢湖蓝藻酸性多糖的理化性质及其体外抗氧化作用被引量：21
- 2015年
- 目的:以从巢湖蓝藻中分离纯化的一种多糖(acidic polysaccharide from Cyanobacteria of Chaohu,CHAP)为研究对象,对其纯度、分子质量、光谱特征、单糖组成、抗氧化作用进行研究,旨在为水华蓝藻资源进行综合开发利用提供有价值的参考。方法:采用60℃的热水抽提蓝藻,采用硫酸铵去除其中蛋白质,粗多糖经DEAE-52阴离子交换层析柱分离并用Sephadex G-150进行纯化得到纯化多糖CHAP。结果:CHAP中多糖和蛋白质含量分别为91.49%和0.18%,紫外-可见光谱表明CHAP不含核酸,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定CHAP的分子质量为2.209×105 D,离子色谱(ion chromatography,IC)表明CHAP由6.36%的阿拉伯糖、35.47%的葡萄糖、5.03%的木糖、17.09%的半乳糖、27.36%的甘露糖及一种未知单糖构成。红外光谱表明CHAP是具有α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰的吡喃糖,CHAP的抗氧化作用表明:CHAP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和超氧阴离子自由基(O2-·)有较强的清除能力,其IC50分别为276μg/m L和186.05μg/m L。CHAP对羟自由基(·OH)的清除能力较弱,清除率不到10%。
- 李志平张弛周维清纪启芳孔小卫李玉成
- 关键词：酸性多糖理化性质抗氧化作用
- 一种G418在少孢节丛孢菌中遗传转化筛选体系的建立方法
- 本发明公开了在少孢节丛孢菌中建立了一种新的遗传转化筛选体系，将有利于该真菌遗传转化体系的多层次应用。该方法包括如下步骤：首先将G418编码的对应氨基酸序列根据少孢节丛孢菌密码子偏好性进行密码子优化；将优化后的DNA序列在...
- 王永中彭慧盛康亮汪静敏孔小卫
- 文献传递
- 烟草原生质体的分离纯化被引量：18
- 2006年
- 研究从烟草叶片分离原生质体的若干影响因素.通过酶解法降解细胞壁释放出原生质体,利用离心和蔗糖漂浮法从粗提取液中纯化出原生质体,并通过血球计数板计数来比较制备的效果.结果表明:酶的种类、质膜稳定剂、渗透压稳定剂、pH及酶解时间是影响原生质体制备的重要因素.纤维素酶含量2%,果胶酶含量1%,2-N-吗啉乙烷磺酸(MES)浓度50mmol/L,Ca2+与甘露醇作为渗透压稳定剂,pH6左右,温度28℃,酶解时间4h时原生质体的分离效果最佳.
- 江力孔小卫吴晓杰李少松
- 关键词：烟草原生质体分离纯化影响因素
- 芝麻脂肪酸成分的GC-MS分析被引量：5
- 2009年
- 采用索氏提取法和直接溶剂萃取法提取新品系芝麻的脂肪酸成分,用气相色谱质谱联用仪分析化学成分.结果显示:新品系芝麻中主要含有12种脂肪酸,且大多数为不饱和脂肪酸,其中含量最高的为亚油酸.
- 刘晓颖丁毅孔小卫
- 关键词：芝麻脂肪酸GC-MS
- 一种真菌来源β螺旋桨型重组植酸酶r-AoPhytase及其表达菌株和应用
- 本发明公开了一种真菌来源β螺旋桨型重组植酸酶r‑AoPhytase及其表达菌株和应用，所述β螺旋桨型重组植酸酶r‑AoPhytase的原始来源为捕食线虫性真菌Arthrobotry oligosopra，其氨基酸序列为如...
- 王永中侯贤娟沈振孔小卫盛康亮汪静敏
- 文献传递
- 红色糖多孢菌A226-SP突变体构建及代谢产物分析被引量：1
- 2009年
- 目的:构建红色糖多孢菌突变菌株,生物合成酮内酯类抗生素。方法:利用反向PCR技术,扩增红色糖多孢菌KR6酮还原酶基因突变DNA片段SP(KR6酶中Gly1141Ala1142替换成SerPro),克隆于pWHM3上构建染色体同源重组质粒pWHM3-SP。通过PEG介导原生质体转化,将pWHM3-SP导入红色糖多孢菌中。经染色体二次重组后,筛选出1株红色糖多孢菌KR6酶突变菌株A226-SP。结果:DNA序列分析表明,A226-SP染色体上编码KR6酶中Gly1141Ala1142序列GGTGCG突变成SerPro编码序列AGCCCT。HPLC-HRMS分析证实A226-SP菌株合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B(DOEB),同时检测到其中间产物C18H34O6,但没有发现红霉素产物。结论:Gly1141Ala1142位于KR6酮还原酶的重要功能位点,红色糖多孢菌A226-SP突变体可以合成酮内酯类化合物。
- 刘道琴黄训端孔小卫马树梅刘惠张部昌
- 关键词：红色糖多孢菌同源重组
- 一种丝状真菌外泌体提取方法及其应用
- 本发明属于生物技术领域，本发明公开了一种丝状真菌外泌体的提取方法；该方法包括如下步骤：用LNAAM培养基发酵丝状真菌，得到含有此丝状真菌外泌体的发酵液；将此发酵液去除菌丝，然后进行高速离心去除不溶性杂质，保留上清；接着使...
- 王永中彭慧盛康亮汪静敏孔小卫
- 文献传递
- 芝麻隐性核不育系0176A不育株与可育株酯酶同工酶研究被引量：1
- 2008年
- 以芝麻隐性核不育系0176A为材料,采用超薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳法研究分析0176A酯酶同工酶(EST)谱带数量和活性强弱与其育性的关系。结果表明:在蕾期的叶片和花药中,0176A不育株与可育株EST的谱带数量和活性强弱均有一定的差异,即不育株叶片、幼蕾和开放花花药中EST条带数多于相应的可育株,在PI 5.18时可育株比不育株酶活性强。利用EST这种表达上的差异性,可为快速鉴别出芝麻不育株和伪杂种提供参考依据。
- 孔小卫汪强王洪江徐桂珍曹文昕鲍勇张路飞
- 关键词：芝麻酯酶同工酶不育株与可育株
- 中草药复方祛痘凝胶的研制及功效评价被引量：3
- 2021年
- 采用正交试验设计,通过对DPPH·自由基清除率、透明质酸酶抑制率、睾酮转化率以及对金黄色葡萄球菌抑菌作用的测试,优选出黄连、黄檗、黄芩、大黄水提液的最佳复配比,制备一款祛痘凝胶,并对该凝胶的感官和理化指标及功效进行测试,对试用者的祛痘效果进行跟踪研究和问卷调查,结果表明:该祛痘凝胶质地清爽、肤感舒适、无刺激,具有较好的祛痘功效.
- 李奥丽肖伟莉王雪梅陈紫薇孔小卫
- 关键词：正交试验
