周庆伟
- 作品数：28 被引量：41H指数：3
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- 重组人uPA_(17)-KPI大规模发酵及纯化工艺的建立
- 2010年
- 目的建立重组人uPA17-KPI(rhuPA17-KPI)毕赤酵母工程菌在80L发酵罐中的大规模发酵及纯化工艺。方法对工程菌表达rhuPA17-KPI的pH值进行优化。在摇瓶中制备rhuPA17-KPI工程菌种子2L,接种至80L发酵罐中,采用优化的pH值,补料分批培养方式对工程菌进行高密度发酵,控制和优化各种发酵条件,经甲醇诱导48h后结束发酵。将发酵液离心,经SP Sepharose XL阳离子交换层析和SourceTM 30 RPC反相疏水柱层析纯化。结果建立的发酵工艺为:控制发酵温度为28℃,pH值为5.5,溶氧值为25%～30%之间,在酵母细胞湿重达到190g/L时开始甲醇诱导表达,诱导30h,rhuPA17-KPI的分泌达高峰,为300mg/L发酵液。发酵上清经阳离子交换层析和反相疏水层析纯化后,获得纯度为95%以上的rhuPA17-KPI,产量为180mg/L,回收率为60%。结论已建立了rhuPA17-KPI毕赤酵母工程菌在80L发酵罐中的大规模发酵及纯化工艺,为其产业化及临床应用奠定了基础。
- 赵磊孔宁颜炜群周庆伟
- 关键词：毕赤酵母发酵纯化
- 新型肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞抑制作用的影响被引量：12
- 2016年
- 目的探讨新型肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖及Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度的新的肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖并用Western印迹检测对Caspase-3蛋白的表达。结果新的肿瘤抑素作用C6胶质瘤24 h空白对照组与卡莫司汀组比较差异有显著性(P<0.05),与其他实验组比较差异均无统计学意义(P>0.05);48 h空白组与卡莫斯汀组、1 500、2 000μg/ml组比较有统计学差异(P<0.05);72 h时空白对照组与卡莫斯汀组、1 500、2 000μg/ml组比较有统计学差异(P<0.05)。空白对照组与卡莫司汀组、1 500、2 000μg/ml组比较Caspase-3蛋白表达有统计学差异(P<0.05)。结论新型肿瘤抑素可能通过调控Caspase-3蛋白表达抑制C6肿瘤细胞增殖。
- 任吉祥刘爽孙洋周庆伟
- 关键词：C6神经胶质细胞瘤
- Lipofectamine2000转染pSiRNA-STAT3质粒对脑神经胶质瘤C6细胞的作用被引量：3
- 2016年
- 目的研究Lipofectamine2000下转染p SiRNA-STAT3质粒对脑神经细胞C6的作用。方法取对数生长期的C6细胞随机分为Mack组、Scramble组和p SiRNA-STAT3组采用MTT法检测C6细胞在不同时间段(6、8、10 h)细胞增殖活性;荧光显微镜观察吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)检测细胞凋亡及线粒体膜电位变化。结果 Lipo2000转染p SiRNA-STAT3质粒在8 h时对C6细胞具有明显的抑制作用;镜下观察p SiRNA-STAT3组可见典型的细胞凋亡形态学特征性改变;线粒体膜电位显著降低。Mock组与Scramble组比较无统计学意义(P>0.05);p SiRNA-STAT3组与Scramble组比较差异显著(P<0.05)。结论 Lipo2000转染p SiRNA-STAT3质粒可能通过降低线粒体膜电位,抑制肿瘤细胞增殖并促进细胞凋亡,发挥抗肿瘤生长的作用。
- 周翔宇田琳周悦戴乐刘爽周庆伟
- 关键词：线粒体膜电位
- 天萸胶囊降血糖作用的实验研究
- 2007年
- 目的研究天萸胶囊对糖尿病大鼠模型的降血糖作用。方法用链脲佐菌素或肾上腺素制作糖尿病模型大鼠,观察天萸胶囊的降血糖作用。结果给大鼠灌胃以1000mg/kg、2000mg/kg天萸胶囊连续灌服14d,天萸胶囊对正常大鼠血糖、血脂及血清胰岛素含量均无明显影响,但可显著降低糖尿病大鼠的血糖、血脂及血液黏度的作用,并明显提高血清胰岛素的含量。结论天萸胶囊可以明显改善糖尿病大鼠胰岛β细胞功能并刺激胰岛β细胞释放胰岛素有关。
- 张晓英孙波刘宏键周悦周庆伟
- 关键词：糖尿病链脲佐菌素降糖作用
- 具有血管生成抑制活性的杂合肽实验研究
- 目的:观察一种新的血管抑素对新生血管的抑制作用,并初步探讨其作用靶点及机制。方法:体外药效研究,采用人脐静脉内皮细胞增殖、迁移法。体内采用C<,57>BL/CN纯系小鼠及鸡胚尿囊绒膜(CAM)模型,观察新生血管生成情况。...
- 周庆伟张晓英马杰王芳王建秋周悦颜炜群
- 关键词：血管抑素新生血管血管内皮细胞
- 文献传递
- 续归胶囊治疗骨折的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的:观察续归胶囊对大鼠桡骨骨折愈合的影响。方法:采用健康SD雄性大鼠制成右侧桡侧骨折后,每天灌胃一次,于14 d、28 d观察其对骨折的愈合作用。结果:研究显示,续归胶囊组在治疗骨折14d时,影像学观察,骨折线消失,可见大量骨痂,骨皮质连续;组织病理及免疫组织化学显示,可见大量成骨细胞,编织骨开始塑形,骨髓腔再通;VEGF的表达含量在骨折愈合14 d时与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);在骨折愈合28d时VEGF表达水平与各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在骨折修复过程中续归胶囊可能通过调节VEGF的合成与分泌,从而促进骨折的愈合。
- 周悦陈垚张鹏国周庆伟
- 关键词：骨折血管内皮细胞生长因子
- 新的血管生成抑制肽的实验研究
- 该文根据两个血管生成抑制蛋白,即血小板反应蛋白-Ⅰ和血管抑素的'血管生成抑制同源区'(AHR)设计并用固相多肽合成法和Fmoc保护策略合成出含两个AHR的一个新的血管生成抑制肽(AIP).经RP-HPLC纯化和质谱鉴定,...
- 周庆伟
- 关键词：血管内皮细胞肿瘤新生血管免疫组织化学眼烧伤鸡胚
- 文献传递
- 骨髓血管内皮祖细胞的分离培养及分化鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的研究分离、培养小鼠骨髓血管内皮祖细胞的方法并对其进行诱导分化鉴定,为临床进行缺血性疾病的替代治疗奠定细胞学基础。方法用灌注法分离小鼠骨髓血管内皮祖细胞,用血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子诱导其分化,形态学观察细胞的生长过程,并利用抗CD34抗体鉴定血管内皮祖细胞,利用抗vWF抗体、抗eNOS抗体鉴定血管内皮细胞。结果小鼠骨髓血管内皮祖细胞可在体外培养条件下贴壁生长,可诱导分化为表达特异性组织蛋白的内皮细胞。结论在小鼠骨髓内可分离出骨髓源性血管内皮祖细胞,呈贴壁增殖状态,并有分化能力。
- 宋丹王芳才子斌周庆伟王桂云苏冠方
- 关键词：血管内皮祖细胞血管内皮细胞骨髓源性分化
- 黄芋胶囊对糖尿病模型大鼠的降血糖作用被引量：2
- 2007年
- 目的研究黄芋胶囊对糖尿病大鼠降血糖作用及其可能机制。方法50只雄性Wistar大鼠,以55mg/kgip链脲菌佐素建立糖尿病大鼠模型;选择造模成功且血糖值相近的大鼠32只,随机分为4组(每组8只);模型组、优降糖组(80mg/kg)、黄芋胶囊(1.0、2.0g/kg)组;另设正常对照组。实验第2周时检测各组血糖、血脂、肝糖原及血液流变学各项指标并用放射免疫法测定血清胰岛素的量。结果黄芋胶囊连续ig14d对正常大鼠血糖、血液流变学指标及血清胰岛素量均无明显影响,但可显著降低糖尿病大鼠的血糖、血脂及血液流变学指标,并明显提高血清胰岛素及肝糖原的量。结论黄芋胶囊降血糖作用与改善胰岛β细胞功能并能刺激胰岛β细胞释放胰岛素有关。
- 张晓英周悦张吉凤周庆伟
- 关键词：糖尿病链脲佐菌素降血糖作用
- 高特异性HER-2/neu肽疫苗的实验研究
- 2004年
- 目的 设计并制备显著激活细胞毒性 T细胞 (CTL)的高特异性 HER- 2 / neu肽疫苗 ,并对其进行活性实验研究。方法 根据 T site蛋白质分析软件模拟的 HER- 2 / neu空间构象 ,选取、合成 2种与 MHC- I类分子高亲和性的区段 P4 2 - 50 、P782 - 790 并对其进行修饰。建立 BALB/ c小鼠的乳腺癌模型 ,用上述多肽作疫苗、GM- CSF做佐剂 ,免疫小鼠 ,分别应用 MTT法、EL ISPOT法、颗粒酶释放法测定 T细胞的增殖 ,T细胞分泌 IFN-γ,CTL对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 经修饰的 HER- 2 / neu多肽疫苗可促进 T细胞增殖 ,促进 T细胞分泌 IFN-γ及 CTL杀伤乳腺癌细胞。结论 经修饰过的 HER- 2 / neu多肽疫苗可显著激活细胞免疫 ,增加对乳腺癌细胞的杀伤作用。
- 王芳周庆伟王丽君王毅徐煌侯立中颜炜群
- 关键词：乳腺癌癌基因免疫活性
