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周在威

作品数:5 被引量:10H指数:2
供职机构:上海交通大学附属儿童医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市基础研究重大(重点)项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇线粒体
  • 2篇精子
  • 2篇DNA
  • 2篇测序
  • 1篇低渗
  • 1篇整合酶
  • 1篇整合型
  • 1篇受精
  • 1篇数据分析
  • 1篇数据库
  • 1篇特异
  • 1篇牛精子
  • 1篇位点
  • 1篇线粒体DNA
  • 1篇命运
  • 1篇介导
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆测序
  • 1篇基因
  • 1篇基因关联

机构

  • 3篇上海交通大学
  • 3篇卫生部
  • 2篇上海交通大学...
  • 1篇上海市儿童医...

作者

  • 5篇周在威
  • 2篇任兆瑞
  • 2篇马晴雯
  • 1篇张敬之
  • 1篇路兆宁
  • 1篇颜景斌
  • 1篇刘浏

传媒

  • 2篇生殖与避孕
  • 1篇中华医学遗传...
  • 1篇医学分子生物...
  • 1篇中国医药生物...

年份

  • 1篇2019
  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2009
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
3种 DNA 甲基化定量分析方法的比较被引量:3
2015年
目的:比较特定基因区域 DNA 甲基化检测方法的优缺点。方法采用焦磷酸测序、克隆测序和DNA 甲基化芯片等3种 DNA 甲基化检测方法,对7例唐氏综合征和5例正常对照样本的 PRDM8内含子7 CpG 岛中的部分序列进行甲基化检测。从准确度、重复性和精确度(分辨率)等方面来比较3种方法,探讨哪种方法更适合特定基因的 DNA 甲基化水平定量检测。结果①焦磷酸测序可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平,结果重复性好,准确度高,而且能发现样本中 CpG 位点甲基化水平变化的规律;②克隆测序也可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平,但结果重复性较差,无法发现 CpG 位点甲基化水平变化的规律;③甲基化芯片可通过所测区域的两个探针来判断样本间甲基化水平的差异,但无法在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平;④上述3种方法检测结果之间存在一定的差异,但是样本间甲基化水平总体趋势基本一致。此外,唐氏综合征样本的甲基化水平高于正常对照样本。结论焦磷酸测序准确度高、重复性好、费用较低、操作较为简单快捷,更为适合在单碱基水平检测特定基因区域的 DNA 甲基化水平。
路兆宁周在威马晴雯颜景斌
关键词:焦磷酸测序克隆测序DNA甲基化修饰
位点特异整合型微环DNA的构建及应用被引量:2
2014年
目的联合应用LR克隆酶和链霉菌噬菌体ΦC31整合酶系统,建立一种获得位点特异整合型微环DNA的方法,为该载体在转基因研究中的应用提供科学资料。方法应用分子克隆技术,在目的基因表达盒及链霉菌attB位点两端接入λattR和λattL片段,随后插入ΦC31整合酶基因表达盒,构建可获得微环DNA的亲本质粒。该亲本质粒上的λattL和λattR序列可在LR克隆酶的催化下重组生成表达ΦC31整合酶的微质粒和含有目的基因表达盒及attB位点的微环DNA。以限制性内切酶酶切、定性以及定量PCR分析其重组效率。并将未经纯化的LR重组体系转染HeLa细胞,以流式细胞技术、克隆计数、ELISA等方法检测其转染率、整合率及目的蛋白表达水平,并与传统质粒进行比较。结果 LR克隆酶可有效催化亲本质粒的重组,重组率达80%以上。重组体系中的微环DNA和微质粒无需纯化即可成功转染HeLa细胞,且其转染率、整合率以及目的蛋白表达水平均高于传统质粒。结论建立了一种高效、快速获得位点特异整合型微环DNA的方法。
刘浏周在威马晴雯
临床测序数据后期处理中的常用工具及使用被引量:1
2019年
随着测序技术的日臻成熟及其在基因病诊断应用中的日益普及,测序数据的处理已成为临床基因诊断的一个重要环节.近年来,各类软件和数据库的开发,已使得对高通量测序数据的变异筛查流程变得更加完善、便捷.然而,将筛查到的变异与疾病表型进行关联,并对该变异可能的致病机理和分子机制进行进一步验证和阐述,仍是临床基因诊断所面临的重要挑战.本文将对测序数据处理的流程进行简要的介绍,并对常用的表型-基因型关联工具和方法、以及基因诊断中基因组的功能分析和验证方法进行综述.
韩亚丽周在威张敬之
关键词:测序技术数据分析基因关联数据库
低渗介导抽提牛精子线粒体DNA
2009年
目的:建立一种通过低渗介导的简便、有效的抽提冷冻牛精子线粒体DNA(mtDNA)的方法。方法:低渗处理牛精子,结合去污剂破膜释放精子线粒体,饱和酚去蛋白,无水乙醇沉淀DNA,设计线粒体特异性引物进行PCR分析以及通过NlaⅢ酶切对抽提获得的mtDNA作酶切鉴定,并以水解法作对照。结果:低渗法获得的mtDNA的PCR产物电泳分析和酶切鉴定都清楚地显示与预期相符的目的条带,而对照组水解法抽提冷冻牛精子mtDNA存在稳定性差及重复性差等缺点。结论:低渗介导是一种抽提精子mtDNA的有效方法。
周在威任兆瑞
关键词:DNA低渗抽提
受精后精子线粒体的命运被引量:4
2009年
人们普遍认为线粒体基因的遗传方式为母系遗传,精子线粒体在各种动物胚胎中的命运在很大程度上取决于核基因组与线粒体基因组间的相容性,而与精子线粒体相关的有些细胞组分被观察到能够在受精过程中得到传递,并且父系线粒体的遗传也在患者和种间杂交中被发现。然而用ICSI与IVF产生的正常后代中并没有发现父系mtDNA,反而在异常胚胎中检测到父系mtDNA.。本文通过对多种动物(如人、牛、小鼠和大鼠)精子线粒体在受精后的生物学特征进行总结,分析了其消失的可能机制及产生这种结果的原因。
周在威任兆瑞
关键词:精子线粒体命运
共1页<1>
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