周一叶
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金全球变化研究国家重大科学研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 牛绝对端粒长度测定及DNA提取造成的影响
- 2023年
- 目的:端粒是真核生物染色体末端的一种高度保守的负责维持染色体稳定的特殊结构,其DNA序列长度即端粒长度,会随着年龄增长或疾病发生发展而逐渐缩短,检测端粒长度可以为评估机体衰老和健康状况提供参考,但目前缺乏测定微量牛DNA样本绝对端粒长度的方法;通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)实现微量牛DNA样本绝对端粒长度的测定并评估DNA提取方法对牛绝对端粒长度测定结果的影响,为进行端粒长度研究时选择合适的DNA提取方法和端粒长度分析方法提供参考。方法:利用标准曲线对检测样本的端粒和内参Ct值进行转换,通过qPCR测定牛端粒长度绝对值;采用膜吸附法、苯酚-氯仿法和磁珠法3种方法分别提取相同样本的DNA,分别用端粒末端限制性片段(terminal restriction fragment,TRF)分析法和qPCR法分析端粒长度,比较不同DNA提取方法对牛绝对端粒长度测定的影响。结果:(1)qPCR可以测定纳克级别DNA样本的绝对端粒长度,检测结果重复性良好,并且和“金标准”TRF测定结果的相关性良好。(2)不同方法提取的DNA用TRF分析法和qPCR法测定端粒长度时,结果有显著差异,其中磁珠法提取的DNA在用2种不同方法进行端粒长度测定时,测定结果的一致性最好。结论:qPCR法是较TRF分析法更加灵敏的端粒长度绝对值测定方法,适合微量DNA样本的测定,且方便快捷;DNA提取方法会影响端粒长度的测定结果,在测定时应统一样本的DNA提取方法,磁珠法是相对更优的选择。
- 鲍莉雯蔡勤周一叶许淼舒娟许淼舒娟李华曾凡一
- 关键词：端粒长度TRFDNA提取方法
- 体细胞诱导为多能干细胞的最新进展被引量：3
- 2008年
- 2007年11-12月,Cell、Science和Nature发表一系列体外诱导人类体细胞转变为多能干细胞的论文。来自日本和美国的研究小组利用慢病毒载体分别将Oct-4、Sox2、C-Myc、Klf4和Oct-4、Sox2、Nanog、Lin28两套基因转入人成纤维细胞,均获得类似ES细胞的克隆。小鼠诱导性多能干细胞已初步用于镰刀细胞性贫血的基因治疗。短短一年半,诱导性多能干细胞的研究和关注度呈现了爆炸式成长;体细胞重编程、去分化、多能干细胞来源等一系列热点问题再次成为大众瞩目的中心。
- 周一叶曾凡一
- 关键词：多能干细胞重编程体细胞外源基因
- 逆转生命时钟:诱导性多能干细胞
- 2008年
- 生命是怎样生生不息的？包括人类在内的生命体，又是怎样由一个受精卵发育为一个有血有肉、有五脏六腑的成体的？这个过程是如何组织协调的。能不能逆转呢？一直以来，为了医疗需要和理论探索，人们致力于通过各种途径获得拥有类似胚胎的强大发育潜能的特殊细胞——干细胞，但同时又被各种技术瓶颈和伦理问题所困扰。
- 周一叶曾凡一曾溢滔
- 关键词：重编程多能干细胞体细胞
- 体细胞重编程的革新之路
- 2012年
- 2012年10月8日瑞典卡罗林斯卡医学院宣布．将诺贝尔生理学或医学奖授予英国发育生物学家格登（JohnGurdon）和日本医学教授山中伸弥（ShinyaYa—manaka）．以表彰他们在体细胞重编程领域做出的革命性贡献。他们分别以不同途径发现“成熟、特化的细胞能够被重编程为可发育成身体各组织的非成熟细胞”．革新了人们对细胞和生命发育的理解。
- 周一叶曾凡一
- 关键词：体细胞重编程诺贝尔生理学或医学奖成熟细胞生物学家
- 牛的3种单个早期胚胎中基因表达的差异
- 2009年
- 为建立哺乳动物单个早期胚胎中基因表达的分析方法,解决胚胎实验中取材困难的矛盾,本研究以牛体内受精胚(invivo cultured,IVC)、体外受精(in vitro fertilization,IVF)和体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)3种来源的7日龄囊胚作实验材料,通过单个胚胎直接裂解后进行逆转录结合随机引物指数扩增的方法富集相应cDNA。对克隆囊胚cDNA库中随机挑选的15个阳性克隆进行测序和EST分析。并运用特异性的引物,对哺乳动物胚胎发育的3个重要基因Nanog,Oct-4和Sox2的表达进行了扩增和表达检测。结果表明,在哺乳动物胚胎囊胚阶段,这3个维持细胞多能性的相关基因的表达都相当活跃;相对于体内胚和体外受精胚,克隆胚中这3种基因的表达明显偏低。本方法为牛植入前胚胎发育阶段特异性基因的筛选和基因表达模式的研究提供了有效的材料和技术途径。
- 严忠海颜昊周一叶赵祥杰卢全晟曾溢滔
- 关键词：植入前胚胎重编程体外受精体细胞核移植CDNA
- 维持胚胎干细胞多能性和自我更新的转录因子Oct-4/Nanog以及相关的调控网络被引量：10
- 2008年
- Oct-4和Nanog是两种维持干细胞多能性和自我更新的转录因子,它们通过结合靶基因调控区,选择性地抑制分化基因表达或促进多能性基因表达。它们通常只在多能干细胞中表达,在分化细胞中不表达。在不同的发育阶段,它们的表达量受到特异调控,并且分别与Sox-2、FoxD3等其他转录因子以及LIF、BMP等胞外信号通路互相作用,形成一个复杂的转录调节crosstalk网络,在特异时空激活或抑制靶基因的转录;通过互相制约最终决定干细胞是保持多能性还是分化,以及向哪个方向分化。此外,Oct-4和Nanog对体细胞重编程为多能细胞也有重要作用。
- 周一叶曾凡一
- 关键词：OCT-4NANOG多能性自我更新
