吴强
- 作品数：7 被引量：30H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省博士后科研启动基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鹅常见疫病的防控措施被引量：2
- 2017年
- 目前蛋鹅和肉鹅经常发生的疾病主要是小鹅瘟、副粘病毒、痛风、H5流感、支原体疾病等，对鹅的生长性能和产蛋性能产生极大的影响，对鹅养殖业造成严重的损失。由于养殖水平受限，我们对常见的疫病的防控有所不到位，如果按照科学的预防治疗，那么这些常见的疫病是可以控制的．同时也减少对养殖业造成的危害．减少经济损失。
- 吴强郭照成李叔伟葛俊伟
- 关键词：常见疫病防控措施小鹅瘟副粘病毒产蛋性能养殖水平
- 水貂源致病性大肠杆菌生物被膜形成能力、耐药性及毒力岛基因检测与分析被引量：16
- 2017年
- 为探索水貂肠道致病性大肠杆菌(E.coli)生物被膜(BF)形成能力、耐药性、毒力岛基因分布及其之间可能存在的相关性,本研究对收集的临床分离鉴定的54株致病性E.coli,采用结晶紫染色定量法测定体外BF形成能力,K-B法药敏试验检测对10种常见抗菌药物的敏感性,PCR检测毒力岛代表基因。结果显示,54株E.coli BF形成阳性率为90.7%,以强阳性为主;分离株对氨苄西林、环丙沙星、青霉素和四环素的耐药率分别为100%、97.5%、92.5%和90%,对多黏菌素B的耐药率最低为17.5%,多数菌株呈现多重耐药,其中对6种以上抗菌药物耐药的占92.6%。毒力岛基因irp2和eae阳性率均为7.4%,未检测到SGI基因。这些分离株普遍具有较强BF形成能力,并呈现多重耐药性,BF形成能力与菌株对呋喃妥因、环丙沙星及氟苯尼考的耐药性呈正相关,但未发现和毒力基因分布率存在明显相关性。
- 夏琦琦温珊珊马斯琪吴强赵丽丽魏成威葛俊伟陈洪岩
- 关键词：致病性大肠杆菌生物被膜耐药性
- 利用细菌展示技术系统地筛选猪圆环病毒2型衣壳蛋白的线性抗原区域被引量：4
- 2016年
- 为了系统的筛选位于猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白上的抗原优势区域,本研究将缺少N端核定位信号的Cap蛋白基因分成7个连续重叠的DNA片段cap（1~7）,然后分别克隆于细菌展示载体APEx中,IPTG诱导重组蛋白片段表达于细菌内膜外侧,采用流式细胞仪检测各片段和抗PCV2 Cap蛋白的多克隆抗体的结合能力。结果表明,cap（1~7）均可以和抗该Cap蛋白的多抗结合,并且cap6的结合能力最强。将cap6片段进一步分为连续不重叠的3段（cap6-1、cap6-2、cap6-3）,以同样的方法鉴定抗原表位。结果显示,cap6-2与抗PCV2 Cap蛋白的多抗结合能力最强。此外,应用western blot的方法对细菌展示结果进行了验证。本研究利用细菌展示技术以及流式细胞仪快速的筛选了PCV2b Cap蛋白上的抗原优势区域,cap（1~7）片段均包含抗原表位,并且cap6是Cap蛋白上的抗原优势区域,cap6-2可能是抗原优势表位。
- 徐文娟张瑛杰李青青吴强于向纺郭笑辰尹杰超任桂萍李德山
- 关键词：猪圆环病毒CAP蛋白多克隆抗体抗原表位
- 三种双特异性抗体对小鼠类风湿关节炎模型的治疗效果
- 2014年
- 为获得治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的先导药物,本研究比较了3种双特异性抗体(BsAB-1、BsAB-2和BsAB-3)对Ⅱ型胶原(CII)诱导的RA(CIA)模型小鼠的治疗效果。首先用ELISA法比较了3种二价抗体同时与两种抗原的结合能力,结果显示,3种抗体均能同时结合两种抗原,BsAB-1结合抗原的能力优于其他两种抗体(P<0.01)。用鸡CII建立CIA模型,用纯化的抗体对CIA模型小鼠进行治疗,每2天给药1次,治疗29天。治疗结束后与CIA模型对照组相比,各治疗组小鼠踝关节肿胀、皮肤紧绷、后足皮肤表面充血等临床症状明显减轻,其中BsAB-1治疗后足趾肿胀不明显,基本恢复正常。采用ELISA法检测了各组小鼠血清中CII抗体,real-time PCR法检测了脾脏中细胞因子IL-2、IL-1β、IL-17A和TNF-α的表达水平。与CIA模型对照组相比,所有抗体治疗组都能明显降低血清中CII抗体水平、脾脏中IL-2、IL-1β、IL-17A和TNF-α的表达量,且BsAB-1治疗效果最佳,与另外两种抗体比较有显著差异(P<0.01)。因此,3种二价抗体对CIA模型小鼠都有治疗效果,BsAB-1的治疗效果要优于另外两种抗体,是优选的先导药物。
- 李清萃韩晓辉周兵王文飞任桂萍孙翠羽吴强于引航徐黎明王秋颖齐剑英魏雨泉曹宏伟韩俊岩李德山
- 关键词：双特异抗体II型胶原
- Anti-hEGFR轻、重链共表达及高表达细胞株快速筛选被引量：2
- 2015年
- 为实现h EGFR全长抗体(anti-h EGFR)轻、重链共表达以及建立快速、高效筛选方法并获得共表达细胞株。采用分子克隆技术获得重链和轻链基因,将之连入peedual真核表达载体;经GS-Neo加压及流式细胞术筛选获得稳定表达细胞株;通过protein A亲和层析技术纯化出目标抗体;应用cck-8法、Annexin V/PI法以及q PCR技术检测anti-h EGFR对A431细胞增殖、凋亡影响。SDS-PAGE分析结果显示,纯化后抗体纯度为95.0%、分子质量约为150 ku。cck-8试验中不同浓度anti-h EGFR对A431细胞增殖均有极显著抑制作用,且与商品化Cetuximab效果相近;anti-h EGFR与Cetuximab均可诱导A431细胞产生凋亡,作用效果相近,均达极显著。全长抗体轻、重链的共表达,省去分别表达的重组过程,保证抗体天然结构;GS-Neo双加压结合流式筛选,实现阳性细胞株快速、高效分离;建立省时、高效抗体共表达平台,为抗体类药物真核构建及筛选提供新思路。
- 李德山刘春香姜媛媛刘铭瑶张瑛杰袁清艳郭笑辰任桂萍吴强李婷婷
- FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用及其机制被引量：6
- 2014年
- 本研究旨在阐明FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用机制。通过检测FGF-21或(和)胰岛素作用后,HepG2胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖的吸收率以及2型糖尿病db/db小鼠血糖变化,证明FGF-21和胰岛素具有协同作用;采用real-time PCR方法检测肝脏中GLUT1和GLUT4转录水平,揭示两者在调节糖代谢过程中协同作用的机制。实验结果表明,两者在调节糖代谢过程中具有协同作用。Real-time PCR结果表明,FGF-21单独作用可上调GLUT1转录水平,且呈剂量依赖性,而对GLUT4转录水平没有作用;胰岛素(4 u)单独作用组仅上调GLUT4转录水平,而对GLUT1转录水平无影响;FGF-21 0.1 mg·kg-1(无效剂量组)单独作用,GLUT1和GLUT4转录水平均没有改变。但是,当FGF-21 0.1 mg·kg-1(无效剂量)与胰岛素(4 u)共同作用时,GLUT1和GLUT4的转录水平均显著增加,且GLUT1转录水平与5倍浓度的FGF-21单独作用相似,GLUT4转录水平显著高于胰岛素单独作用的效果,说明在FGF-21存在的情况下,胰岛素具有增加FGF-21敏感性的作用;在胰岛素存在的情况下,FGF-21同样具有增加胰岛素敏感性的作用。综上所述,FGF-21与胰岛素在糖代谢过程中的协同作用机制是通过彼此增敏来实现的。
- 于丹孙翠羽孙国鹏任桂萍叶贤龙朱升龙王文飞徐鹏飞厉书杰吴强牛泽杉孙田刘铭瑶李德山
- 关键词：糖尿病FGF-21胰岛素
- 成纤维细胞生长因子21在大肠杆菌细胞周质中的表达
- 2016年
- 成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物。为研究人FGF21(h-FGF21)在大肠杆菌细胞周质表达,本实验在pET27b载体PelB(pectate lyase B)信号肽下游连入h-FGF21基因,成功构建了pET27bPelB-h-FGF21重组质粒,并发现pET27bPelB-h-FGF21转化E.coliBL21(含DE3)经诱导后能够在细胞周质成功地表达h-FGF21,表明PelB信号肽在h-FGF21细胞周质表达中起到了关键作用。经周质蛋白提取和两步离子交换层析,利用灰度分析软件分析得到了纯度大于95%的h-FGF21蛋白,SDS-PAGE与Western blotting结果证明了目的蛋白大小约20 k Da;经HepG2细胞的葡萄糖吸收实验以及在II型糖尿病db/db小鼠上的短期和长期血糖变化实验结果表明,细胞周质表达的h-FGF21(ph-FGF21)与胞内表达的FGF21(ih-FGF21)的生物学活性在统计学上无显著差异。
- 厉书杰叶贤龙吴强于引航于丹任桂萍李德山
- 关键词：信号肽糖尿病
