史进方
- 作品数:103 被引量:426H指数:12
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项江苏省研究生培养创新工程项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 叉头转录因子1质粒标准品的构建
- 2009年
- 背景:研究表明叉头转录因子1是一种新的2型糖尿病易感基因,但2型糖尿病患者与健康人的叉头转录因子1基因在转录水平上差异性的研究不多。由于还没有商品化叉头转录因子1的质粒标准品,因此有必要构建其标准品。目的:构建应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测叉头转录因子1mRNA的质粒标准品。设计、时间及地点:单一样本重复实验,于2007-11/2008-03在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成。材料:SYBRExScriptTM反转录-聚合酶链反应Kit试剂盒,SYBRPremixExTaqTM试剂盒,凝胶回收纯化DNA试剂盒,质粒DNA小量纯化试剂盒,PMD18-TVector试剂盒等。方法:从健康志愿者血标本中提取总RNA,反转录合成cDNA,以cDNA为模板应用聚合酶链反应扩增出目的片段,对其回收纯化连接到PMD18-T载体及转化JM109,阳性克隆经测序分析,确认重组质粒正确。抽提重组质粒,用紫外分光光度仪测定其浓度,再根据公式换算成拷贝浓度,最后稀释成梯度标准品。主要观察指标:重组质粒聚合酶链反应和基因测序结果,标准品标准曲线的相关系数及标准品的重复性。结果:成功构建了叉头转录因子1质粒标准品,通过聚合酶链反应及基因测序鉴定其目的片段已成功插入载体。各稀释度的标准品经荧光定量-聚合酶链反应扩增后,其循环阈值与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系,线性范围是2.39×(105~1012)copies/mL。各稀释度标准品的批内重复性好,其变异系数范围为0.29%~1.16%。结论:实验成功构建了具有较好灵敏度和重复性的叉头转录因子1质粒标准品。
- 蔡惠芬史进方顾国浩
- 关键词:荧光定量-聚合酶链反应
- 胱抑素C水平与下肢血管病变之间的关系被引量:1
- 2016年
- 目的探讨胱抑素C(CysC)在下肢血管病变中的临床意义。方法收集2015年2月至2015年8月在苏大附属第一人民医院介入科住院并确诊为有下肢血管病变的30例患者作为试验组,设置60例健康体检者作为对照组,采集他们的空腹静脉血,于促凝管中离心得到空腹血清,在全自动生化仪上采用胶乳增强免疫透射比浊法测定血清CysC的浓度。结果下肢血管病变患者血清CysC的浓度显著高于健康体检者(P<0.05),而且下肢血管病变病情严重患者CysC的浓度也显著高于下肢血管病变病情一般的患者(P<0.05)。下肢病变合并高血压的患者CysC的值显著高于单纯下肢血管病变的患者(P<0.05)。结论测定CysC在临床诊断下肢血管病变中具有临床意义,应用前景广阔。
- 李翔翔史进方
- 关键词:胱抑素C下肢血管病变高血压
- 共刺激分子在免疫衰老过程中的表达研究被引量:2
- 2010年
- 赵琳史进方蒋敏顾国浩
- 关键词:共刺激分子免疫衰老
- 项目化教学法在微生物学检验教学中的应用和体会被引量:2
- 2017年
- 微生物学检验是实践性和技术性很强的学科,传统教学方法已不能适应提高学生实践能力的培养需求。"以项目为导向,以任务为驱动"的项目化教学法可以调动学生学习主动性、积极性,提高操作能力、创新能力及解决问题能力。本文介绍了项目化教学法在我校微生物学检验教学中的应用和体会。
- 杨李马桂芳孙金霞李启松黄思怡史进方
- 关键词:医学检验技术专业微生物学检验
- 端粒及端粒长度研究新进展
- 2006年
- 端粒位于真核细胞染色体末端,它由DNA重复序列和特定的端粒结合蛋白相结合而形成的核染色质组成。端粒DNA是由一小段富含G的简单重复序列,人的端粒DNA序列是由一段高度保守的重复序列d(TTAGGG)n构成的特化区。端粒结合蛋白,主要成分是“端粒重复结合因子”(TRF)。端粒排列成高级的“T-环”结构,像“帽子”一样扣在染色体两端,防止染色体融合、重组、降解,维持其完整性和稳定性。端粒的这种保护功能在基因完整性和细胞生理学其他方面的调节起至关重要的作用。
- 史进方卢莉莉顾国浩
- 关键词:端粒长度DNA重复序列端粒结合蛋白细胞染色体细胞生理学核染色质
- 替比夫定治疗慢性乙型肝炎患者乙肝标志物动态联检及其意义被引量:9
- 2011年
- 目的实验观察替比夫定治疗慢性乙型肝炎(以下简称乙肝)的疗效。方法将83例慢性乙肝患者分成HBeAg阴性组(40例)和HBeAg阳性组(43例),均首次给予替比夫定抗病毒治疗48周,于治疗0、4、12、24、48周时联检HBV DNA、ALT水平、乙肝两对半,分析上述时间点两组患者HBV DNA转阴率、ALT复常率、e抗原转阴率及血清转换率(又称血清乙肝标志物转换率)。结果 HBeAg阴性组治疗4、12、24、48周时HBV DNA转阴率分别为25.00%、47.50%、77.50%和87.50%;ALT的复常率分别为5.00%、55.00%、80.00%和97.50%;HBeAg阳性组治疗4、12、24、48周时的HBV DNA转阴率分别为2.33%、16.28%、48.84%和67.44%;ALT的复常率分别为2.33%、51.16%、79.07%和93.02%;e抗原转阴率分别为0、16.28%、32.56%和48.84%;血清学转换率分别为0、11.63%、18.60%和34.88%。结论替比夫定可明显抑制HBV DNA的复制,促使ALT回复正常,近期疗效好,对e抗原阴性的初治患者HBV DNA的阴转率更高。
- 张静顾国浩甘建和罗二平史进方高纯
- 关键词:慢性乙肝核苷类似物
- 老年原发性非小细胞肺癌患者外周血T细胞膜型和可溶性CD28的表达被引量:3
- 2009年
- 目的检测老年原发性非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血T细胞膜型CD28(mCD28)及血清中可溶性CD28(sCD28)的表达,探讨该分子增龄性改变与老年人肺癌发生发展之间的联系。方法应用四色免疫荧光标记流式细胞术和酶联免疫吸附法对63例老年人NSCLC(老年肺癌组)外周血的mCD28和sCD28进行检测,将其结果与老年肺良性病变组(老年非癌组35例)、老年健康组30例、青年健康组30例、青年肺良性病变组(青年非癌组20例)及青年肺癌组(20例)进行对比分析,并研究其与老年人肺癌临床病理特征之间的关系。结果老年肺癌组外周血mCD28的表达量[(19.27±6.93)%]显著低于其余各组(F=184.25,P〈0.01),其血清sCD28含量[(72.00±6.85)μg/L3则显著高于其余各组(F=365.40,P〈0.01);老年健康组外周血mCD28的表达量[(46.09±7.34)%]明显低于青年健康组和青年非癌组,其血清sCD28的含量[(35.84±5.02)μg/L]则明显高于青年健康组和青年非癌组;老年非癌组[(42.84±5.82)%、(39.38±6.02)μg/L9与老年健康组比较,两者表达差异均无统计学意义;Logistic回归分析显示,增龄、mCD28表达下调、sCD28含量增加均与肺癌的发生有统计学关联(OR值分别为2.432、0.876、1.113);老年肺癌组Ⅲ~Ⅳ期mCD28和sCD28的表达[(16.51±5.64)%、(75.03±5.98)μg/L3与Ⅰ~Ⅱ期表达[(24.41±8.24)%、(66.73±7.52)μg/L3比较,差异均有统计学意义(t值分别为4.497、4.794,均为P〈0.01),而不同病理类型之间比较,差异均无统计学意义(F值分别0.609、0.302,均为P〉0.05)。结论呈增龄性下调的mCD28和增龄性上调的sCD28,在老年人原发性肺癌的形成和进展过程中可能起重要作用。
- 潘旭东王翎史进方张光波张学光
- 关键词:CD28
- 血小板聚集机能检测的新方法及仪器的性能评价
- 2012年
- 目的对血小板聚集机能检测的新方法及仪器的性能进行评价并报告。方法按照国际血液学标准华委员会(ICSH)制定的评价标准进行。用EDTA.K2及柠檬酸钠静脉抗凝血测试血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性及线性性能,并与MPG.3E多功能双通道血液凝聚仪测定结果进行相关分析。结果各参数皆符合ICSH的要求。血小板分析仪批内、日间精密度的CV均〈5%;携带污染率〈1%;测定定值全血质控物,准确性满意,线性良好;测定结果与光密度比浊法结果相关性分析,R^2=0.9439。结论新型血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性、线性及比较实验均较好,报告结果准确可靠。新型血小板分析仪是一种较理想的适用于血栓病早期预警和诊断的新型血小板聚集机能检测仪,值得推广应用。
- 张有涛赵益明季顺东赵赟霄蒋敏金晓华史进方顾国浩阮长耿
- 关键词:血小板聚集
- 共信号分子ICOS/ICOSL mRNA定量方法学的建立
- 史进方赵琳蒋敏颐国浩陈永井张光波叶建新陈卫昌
- 超高倍多媒体显微诊断仪在腐食酪螨成螨形态鉴定中的应用被引量:4
- 2018年
- 目的利用超高倍显微镜观察腐食酪螨成螨的外部形态特征。方法采集某面粉厂的面粉灰尘样品,分离孳生腐食酪螨成螨,制备玻片标本,超高倍显微镜下观察其形态特征。结果镜下见腐食酪螨成螨体躯由颚体和躯体两部分组成。螯肢由3节(基节和二部分端节)构成。足Ⅰ端部背面有感棒。基节上毛(ps)膨大且有刺状侧突。格式器(G)有2个分枝,一枝为杆状,另一枝外形不规则。雄性成螨肛门达躯体末端,周围着生有5对肛毛(a),3对肛后毛(pa)。阳茎较短且弯曲呈"S"形。足末端呈柄状,前跗节较发达。结论超高倍显微镜下能清晰观察到腐食酪螨成螨外部形态特征,可为该螨的形态学鉴定提供实验依据。
- 杨李马桂芳李启松崔玉宝史进方
- 关键词:多媒体超高倍显微镜腐食酪螨成螨