南晓娟
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Wntll在输尿管梗阻大鼠肾小管上皮的表达及作用研究
- 目的：
肾脏疾病起病隐匿，许多慢性肾脏疾病被发现时已发展到肾衰竭期。肾间质纤维化是大多数慢性肾脏疾病发展到肾衰竭期的关键原因，也是其病理生理改变。因此如何阻止甚至逆转肾间质纤维化至关重要。目前攻克肾间质纤维化仍是一...
- 南晓娟
- 关键词：肾纤维化输尿管梗阻肾小管
- 文献传递
- Wnt11在输尿管梗阻大鼠肾小管上皮的表达及作用研究
- 目的：本实验通过建立单侧输尿管梗阻大鼠(UUO)模型,从组织和分子水平对Wnt11在梗阻性肾间质纤维化中的表达部位及其与肾间质纤维化的关系进行初步研究.方法：48只SPF级雄性Wistar大鼠(115-160克,4-6周...
- 南晓娟
- 关键词：分子水平
- 配对盒基因2对正常肾小管上皮细胞间充质转分化的诱导作用被引量：1
- 2013年
- 目的:观察体外转染配对盒基因2(PAX2)对肾小管上皮细胞表型标志物的影响,探讨PAX2诱导转分化的作用,为肾纤维化治疗提供依据。方法:正常肾小管上皮细胞株NRK52E分为对照组、空载组(转染pGC-Fu空质粒)和转染组(采用脂质体转染法将pGC-FU-GFP-PAX2质粒转染至细胞中)。转染72h后应用倒置相差显微镜观察各组细胞形态,应用Western blotting法和Real-time PCR法检测PAX2蛋白和mRNA表达水平;转染72h后应用免疫组织化学法、Western blotting法和Real-time PCR法检测各组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-肌动蛋白(α-SMA)及其mRNA表达水平。结果:pGC-FU-GFP-PAX2转染72h后,转染组细胞绿色荧光强度较对照组明显增强,且肾小管上皮细胞的形态伸长;Western blotting法检测,转染组PAX2蛋白表达水平明显高于空载组和对照组(P<0.05);Real-time PCR检测,转染组细胞的PAX2mRNA表达水平明显高于空载组和对照组(P<0.05);转染组细胞中的E-cadherin染色较空载组和对照组明显减弱;α-SMA染色较空载组和对照组明显增强。Western blotting法检测,转染组细胞中E-cadherin表达水平明显低于空载组和对照组(P<0.05);α-SMA表达水平明显高于空载组和对照组(P<0.05);Real-time PCR检测,转染组细胞中E-cadherin mRNA表达水平明显低于空载组和对照组(P<0.05);α-SMA mRNA表达水平明显高于空载组和对照组(P<0.05)。结论:PAX2转染正常肾小管上皮细胞后E-cadherin表达减少,α-SMA表达增加,PAX2可能在体外诱导正常肾小管上皮细胞间充质转分化。
- 李里南晓娟吴玉斌
- 关键词：肾小管上皮细胞转分化转染
- WNT4基因沉默对PAX2诱导肾小管上皮细胞间充质转分化的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:观察体外转染配对盒基因2(PAX2)对WNT4通路的激活作用及WNT4通路对PAX2诱导转分化的作用,探讨PAX2转分化机制。方法:应用脂质体介导将重组质粒pEGFP-PAX2转染入体外培养的大鼠肾小管上皮细胞,经G418筛选,建立稳定表达PAX2细胞系。细胞分为稳定转染PAX2组、空载组和对照组。Western blotting法和实时荧光定量(Real-time)PCR法检测各组细胞WNT4和β-catenin表达。应用靶向WNT4基因的siRNA沉默稳定转染PAX2细胞的WNT4,应用荧光显微镜观察转染效率,进行沉默鉴定筛选出最佳干扰链。将最佳干扰链WNT4siRNA转染至稳定转染PAX2细胞。在沉默24、48、72和96h应用Westernblotting法和Real-time PCR法检测β-catenin、正常肾小管上皮细胞表型标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和成纤维细胞表型标志物α-肌动蛋白(α-SMA)表达,同时筛选出沉默最佳时间点。应用免疫组织化学染色法检测沉默最佳时间点组E-cadherin和α-SMA蛋白表达。结果:Western blotting和Real-time PCR检测,稳定转染PAX2细胞组WNT4和β-catenin蛋白及mRNA表达水平较空载组和对照组明显增加(P<0.05)。阴性siRNA转染入稳定转染PAX2细胞24h后荧光显微镜观察,转染效率为47.46%±4.48%。3条WNT4干扰链分别转染至稳定转染PAX2细胞,Real-time PCR和Western blotting结果显示第3干扰链沉默效果最佳,WNT4mRNA表达抑制率为66.9%±3.8%(P<0.05);WNT4蛋白表达抑制率为63.7%±2.5%(P<0.05)。将最佳干扰链转染至稳定转染PAX2细胞,干扰24、48、72和96h后,各时间点细胞中的β-catenin mRNA及蛋白表达水平较对照组下调,72h组下调明显(P<0.05);各时间点细胞中E-cadherin mRNA及蛋白表达水平较对照组明显上调,72h组上调明显(P<0.05);各时间点细胞中α-SMA mRNA及蛋白表达水平较对照组明显下调,72h下调明显(P<0.05)。结论:PAX2转染至肾小管上皮细胞后激活了WNT4通路,PAX2在体外诱导正常肾小管上皮细胞间充质转分化可能�
- 李里南晓娟吴玉斌
- 关键词：肾小管上皮细胞转分化RNA干扰
- Wnt11基因在肾脏的表达及意义被引量：3
- 2013年
- Wnt信号通路是近年来的研究热点，对细胞的增殖、分化和迁移起巨大的调节作用。Wnt信号通路包括经典Wnt信号通路和非经典Wnt信号通路。Wnt11是非经典Wnt信号通路上一个非常重要的信号分子，是肾脏发育的重要的因子，在胚胎后肾的发育中起着积极的调控作用，在成熟肾脏处于沉默状态。有研究表明其在肾脏纤维化中重新表达。该文就其在肾脏发育中的作用及其与肾脏纤维化的关系作一综述。
- 南晓娟吴玉斌
- 关键词：肾发育肾纤维化
