刘长振
- 作品数：28 被引量：39H指数：4
- 供职机构：中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国中医科学院自主选题项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 抗原呈递细胞及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种抗原呈递细胞及其制备方法与应用。本发明的制备抗原呈递细胞的方法，是在抗原处理相关性转运体蛋白表达下调的离体的抗原呈递细胞中表达抗原决定簇-人源β2微球蛋白融合蛋白，获得在细胞表面表达抗原决定簇/MHC I...
- 高斌刘长振吴莹
- IL-6/STAT3报告基因系统的构建及抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体的筛选及验证被引量：3
- 2020年
- 寻找可抑制IL-6/STAT3信号通路的活化从而抑制肿瘤的生长和恶化的中药单体化合物具有重要意义及发展前景。文中通过基因重组技术构建出一种含有STAT3增强子序列和NanoLuc(NLuc)报告基因序列的新表达载体,并进一步建立受STAT3调控并稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系,利用该细胞系定量检测多种中药单体化合物对IL-6/STAT3信号通路的调控作用,并对抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体的效果进行验证。酶切鉴定及测序结果表明报告基因表达载体pQCXIP-STAT3-NLuc构建成功。STAT3转录因子的刺激物白细胞介素-6(IL-6)作用于所构建的稳定表达NLuc的细胞系后出现特异性荧光素酶反应,且作用效果呈良好的剂量依赖性,表明受STAT3调控稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系构建成功。Western blotting及Real-time PCR实验结果表明所筛选的中药单体化合物石斛碱及粉防己碱可抑制IL-6/STAT3信号通路并显著下调其下游基因Bcl-2及Bcl-x的表达,且作用呈剂量依赖性。综上所述,文中构建了可高效检测STAT3转录活性的报告基因系统,并利用该系统成功地筛选出可抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体化合物,具有一定的理论和应用价值。
- 张露露李晶哲马琰岩尚腾飞王子依刘长振
- 关键词：石斛碱粉防己碱
- 评估中药和/或天然药物效能的系列转录因子报告基因系统及其应用
- 本发明公开了评估中药和/或天然药物效能的系列转录因子报告基因系统及其应用。本发明所提供的检测中药和/或天然药物对N种转录因子的影响的成套载体，由N种报告基因表达载体组成，N种报告基因表达载体中每种报告基因表达载体均携带一...
- 刘长振郭志兰李晶哲
- 文献传递
- 紫草素类化合物在制备促进TRAIL抗肿瘤活性药物中的应用
- 本发明公开了紫草素类化合物在制备促进TRAIL抗肿瘤活性药物中的应用。本发明提供了紫草素类化合物在制备增强A抗肿瘤活性的药物中的应用，所述A为TRAIL重组蛋白或TRAIL修饰物。实验证明，在SKN预处理后再加入低剂量的...
- 刘长振郭志兰李晶哲
- 文献传递
- 优化培养条件和裂解方法提高hRANKL在大肠杆菌内的表达（英文）被引量：3
- 2017年
- RANKL/RANK/OPG轴在骨代谢过程中起到中心调节作用,也是近年来骨相关疾病治疗研究的热点之一。RANKL蛋白在RANKL/RANK/OPG轴信号传递过程中起到关键作用,在骨代谢相关实验研究中用途广泛。但是,使用大肠杆菌Escherichia coli可溶表达重组人源RANKL蛋白(hRANKL)时产量远低于鼠源RANKL(mRANKL)。本研究通过将LB培养基pH值调整并稳定在7.5、降低诱导表达温度至16℃并优化细菌裂解条件,成功地将可溶hRANKL产量增加到了对照组的5-12倍。该方法有效提高了hRANKL在大肠杆菌中可溶表达的产量,同时也是研究重组蛋白在大肠杆菌内的可溶表达策略的有益尝试。
- 车路阳郭志兰郭清华潘冰李晶哲刘长振黄鹏
- 关键词：RANKL大肠杆菌蛋白表达骨质疏松
- 基因编辑技术的研究进展及其在中药研究中的前景展望被引量：11
- 2017年
- 基因编辑技术是一项对基因组进行精确定点修饰的技术,可对特定DNA片段进行敲除、加入和替换等,从而在基因组水平上进行精确的基因编辑。其技术本质均是利用非同源末端链接途径修复和同源重组修复,联合特异性DNA靶向识别及核酸内切酶完成的DNA序列改变。基因编辑技术在科研、农业、医疗等领域都具有极其广泛的发展前景和应用价值。在疾病基因治疗领域,基因编辑技术在癌症如白血病、遗传性疾病如血友病、地中海贫血、多种肌肉营养障碍症和逆转录病毒相关传染病如艾滋病等疾病的治疗方面取得许多堪称跨时代的佳绩:结合基因编辑技术开展的实验新方法学研究及动物模型的制备工作也在迅猛地发展和完善;世界各地的实验室也已将基因编辑技术应用于预防疟疾、器官移植、生物制药、农业育种改良、灭绝物种复活等多个研究领域。该文就基因编辑技术在上述领域中的研究进展进行一些概括和总结。此外还归纳了一些当前针对基因编辑技术存在的争议和思考,并初步探讨了该技术在中药研究中的潜在应用前景。
- 马琰岩李晶哲高尔宁钱丹钟菊迎刘长振
- 一种筛选非激动剂型PPARγ配体的方法
- 本发明提供了筛选非激动剂型PPARγ配体的方法，所述方法包括不分先后的以下步骤：步骤A、确定待测分子无促进PPARγ下游转录的活性；步骤B、确定待测分子可以与PPARγ的已知完全激动剂竞争结合PPARγ；步骤C、确定待测...
- 刘长振李晶哲
- 文献传递
- MHC-Ⅰ类肽组装复合体组分重要性的定量分析(英文)
- 2014年
- TAP2、tapasin和calreticulin(CRT)是MHC-Ⅰ类内源性抗原加工和递呈途径肽组装复合体(PLC)中的3个重要蛋白质.虽然对于肽组装复合体及其单个蛋白组分在抗原加工递呈中的作用,国内外已有大量的研究,但是由于研究手段的缺乏,其在复合体中的相对重要性还未得到清楚和定量的分析.本文中我们建立了一种新型的抗原递送方法,利用猪链球菌溶血酶(SLY)对鼠纤维母细胞系K41及其CRT缺陷细胞系K42、tapasin缺陷细胞系90a及tapasin、TAP2双缺陷细胞系91a进行穿孔并定量递送入鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),使其被内源性加工处理后的多肽SIINFEKL与小鼠H2-Kb装配成复合物并被递呈至细胞表面.通过利用小鼠T杂交瘤细胞B3Z和单克隆抗体25D1.16识别并检测不同细胞表面SIINFEKL与小鼠H2-Kb复合物,我们发现CRT缺陷细胞系K42的抗原提呈能力相比91a及90a,较K41有着更大幅度的下降,说明CRT在提呈过程中可能有着较预期更重要的作用.本文是首个对抗原递呈途径蛋白相对重要性的研究,其研究结果对于进一步研究MHC-Ⅰ类抗原加工和递呈途径相关蛋白的作用提供了理论依据与研究手段.
- 牛歌马娟刘长振马盼韩化敏赵云峰张鸽陶华高斌
- 异源动物细胞因子突变体疫苗及其应用
- 本发明公开了异源动物细胞因子突变体疫苗及其应用。该异源动物细胞因子突变体疫苗，它的活性成分是异源动物细胞因子突变体，所述异源动物细胞因子突变体是对来自异源动物的细胞因子进行突变得到的，所述异源动物细胞因子突变体满足如下条...
- 高斌刘长振赵云峰
- 文献传递
- 一种检测分泌型报告蛋白含量的优化方法及其所用生物材料
- 本发明公开了一种检测分泌型报告蛋白含量的优化方法及其所用生物材料。该方法包括：1)提供DNA分子，该DNA分子表达由分泌型报告蛋白和标签蛋白连接而成的融合蛋白；2)将该DNA分子导入生物细胞，得到含有所述DNA分子的重组...
- 刘长振李晶哲郭志兰
