刘继勇
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 黑腹果蝇p55基因与细胞周期调控及DNA复制的关系研究
- RbAp48/46最初在哺乳动物中作为与Rb(retinoblastoma)相结合的蛋白而被鉴定，随后的实验发现该蛋白从酵母到哺乳动物高度保守。p55是它在黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中的同...
- 刘继勇
- 关键词：黑腹果蝇
- 基于TALEN介导的一种高效、简便、特异地获得黑腹果蝇突变体的方法
- 刘继勇张博邓武民焦仁杰李常青于忠胜黄鹏伍洪刚魏传贤朱南南沈延陈毅序
- 从随机突变到精确编辑:果蝇基因组编辑技术的发展及演化被引量：2
- 2016年
- 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是研究生命科学的重要模式动物,基因组编辑技术的发展有助于人们更好地利用果蝇来进行遗传学、发育生物学、生物医学等领域的研究。从20世纪开始,果蝇基因组编辑技术经历了从随机突变到精确敲除、从单纯的基因突变体制作到多样化的基因组精确编辑的过程。甲基磺酸乙酯(Ethyl methanesulfonate,EMS)化学诱变是利用正向遗传学研究基因功能的重要手段,但是无法实现果蝇基因的精确敲除。基于同源重组建立的基因打靶技术首次实现对果蝇基因组任意位点的精确编辑,但效率较低。CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein)系统介导的果蝇基因组精确编辑相对于基因打靶技术具有简单、快速、高效的特点。本文以果蝇基因敲除为主线,系统阐述了果蝇基因组编辑技术的演化,着重论述了基因打靶、ZFN(Zinc-finger nucleases)、TALEN(Transcription activator-like effector nucleases)及CRISPR/Cas9技术的发展和应用。
- 苏方黄宗靓郭雅文焦仁杰李孜陈建明刘继勇
- 关键词：果蝇TALEN
- 基于TALEN介导的一种高效、简便、特异地获得黑腹果蝇突变体的方法
- 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是现代遗传学研究的重要材料。基因突变体的获得是对果蝇重要基因进行功能诠释的限速步骤。经典的EMS化学诱变法容易引起非特异性突变,筛选困难。P因子插入、P因子非精确...
- 刘继勇李常青于忠胜黄鹏伍洪刚魏传贤朱南南沈延陈毅序张博邓武民焦仁杰
- 文献传递
- 黑腹果蝇dCAF-1-p55突变引起果蝇发育迟缓和染色体不稳定性(英文)
- 2012年
- 在真核生物中高度保守的染色质装配因子1(chromatin assembly factor 1,CAF-1)是染色质装配过程中的组蛋白分子伴侣之一.dCAF-1-p55是果蝇中CAF-1复合物中的最小亚基,它与另外两个亚基dCAF-1-p180及dCAF-1-p105一起负责将组蛋白H3/H4组装到新合成的DNA上.除了CAF-1复合物,dCAF-1-p55还参与其他多个复合物的形成,如NURF、PRC2及Sin3-HDAC1.dCAF-1-p55的这一广泛参与性提示了其功能的多样性和重要性.为了研究dCAF-1-p55的体内功能,我们利用基因靶向敲除技术制备了果蝇dCAF-1-p55突变体.实验结果表明,dCAF-1-p55的缺失导致果蝇发育迟缓并且最终致死.进一步研究发现,在dCAF-1-p55突变细胞中,中期染色体较为松散,姐妹染色单体连接异常,后期染色体不能正常分离.这些缺陷都是与癌症发生密切相关的染色体不稳定性(chromosome instability,CIN)的典型特征.综上所述,我们的研究表明了dCAF-1-p55在果蝇发育过程及维持染色体稳定性方面的重要作用,同时提示该基因具有保护细胞免遭CIN和癌变的潜在功能.
- 吴青华刘继勇陈毅序焦仁杰
- 关键词：染色体不稳定性染色体分离
- 果蝇蛋白质激酶Pitslre通过调控抗菌肽表达参与天然免疫反应
- 2019年
- 为鉴定新的参与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)天然免疫信号通路调控的分子及作用机制,应用果蝇的Gal4/UAS系统敲低54个蛋白质激酶编码基因,分别利用革兰氏阳性菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)或革兰氏阴性菌(Erwinia carototovovora carototovovora15,Ecc15)感染基因敲低果蝇,筛选参与果蝇天然免疫反应的蛋白质激酶。结果显示,全身性敲低蛋白质激酶Pitslre的果蝇感染E.faecalis或Ecc15后,生存率降低,半致死时间LT50分别降低为对照组的667%和286%。相应的,Pitslre功能缺失导致革兰氏阳性菌和阴性菌分别感染后,Toll及IMD通路下游抗菌肽Drosomycin和Diptercin表达水平明显下降。在脂肪体和血淋巴细胞中特异性敲低Pitslre基因,导致革兰氏阳性菌及阴性菌感染后的果蝇半致死时间LT50分别缩短75%和90%,细菌载量分别升高约10倍。在果蝇S2细胞中,敲低Pitslre基因,导致细胞的抗菌肽Drosomycin、Attacin和Diptercin表达水平分别降低约50%。此外,通过免疫共沉淀实验检测Pitslre与预测存在相互作用的蛋白质TSC1、Rcd5和pbl之间的相互作用。综上所述,蛋白质激酶Pitslre参与果蝇天然免疫反应,在正向调控果蝇天然免疫Toll和IMD通路中发挥重要作用。
- 刘燕谢欣雨陈赖强苏方王欢焦仁杰焦仁杰
- 关键词：黑腹果蝇蛋白质激酶天然免疫抗菌肽
