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化学发光免疫分析系统的建立及其应用: 杨晓林孙旭东吴晓东吴旭东于晋生刘红唐磊朱琳琳吴丽金鲍云罗陶成英张仲国高建忠杨萌萌兰江; 该项目属临床诊断领域。免疫分析是大部分疾病临床病因学诊断的主要手段，也是疗效评价、预后分析的重要技术；还是卫生防疫、环境检测、法医鉴定等领域的技术平台之一。发光免疫分析是近年来国外迅速发展的非放射性免疫分析技术，已成为国...; 关键词：; 关键词：病因学诊断

血清游离轻链用于多发性骨髓瘤及自身免疫性高球蛋白血症鉴别诊断价值研究被引量：1: 2013年; 目的探讨血清游离轻链(sFLCs)及其κ型与λ型比值(κ/λ值)在高球蛋白疾病良恶性鉴别中的临床价值。方法收集2012年1—8月北京大学人民医院血液科收治的多发性骨髓瘤(MM)65例,选取同期就诊于风湿免疫内科的高球蛋白血症患者31例。采用免疫比浊法测定sFLCs。比较两组免疫球蛋白、sFLCs、κ/λ值水平。结果 MM患者sFLCs质量浓度显著高于自身免疫疾病组(P<0.05),良恶性疾病κ/λ值差异有统计学意义(P<0.05)。κ型MM患者κ/λ值鉴别良恶性疾病的ROC曲线下面积(AUC)为0.92,最佳临界点为2.18时,其所对应敏感度为71%,特异度为100%。λ型MM患者κ/λ值鉴别良恶性疾病的AUC 0.82,最佳临界点为0.48时,其所对应的敏感度为79%,特异度为87%。κ型MM患者高κ/λ组较低κ/λ组生存时间短(P<0.05),λ型MM患者高κ/λ组较低κ/λ组生存时间长(P<0.05)。结论 sFLC的κ/λ值对于鉴别高球蛋白疾病良恶性有较高的敏感度和特异度,且对于κ型MM低肿瘤负荷患者诊断效能更高。κ/λ值与MM预后密切相关。; 高莉赵丹丹刘红贾园樊春红王辉路瑾; 关键词：游离轻链高球蛋白血症多发性骨髓瘤自身免疫疾病

人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1: 2012年; 目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。; 刘红刘宾李瑞娟杨萌萌李鹏聪张鑫孙旭东杨铁生

SARS-CoV抗原化学发光免疫分析法的应用被引量：5: 2005年; 目的建立一种可用于严重急性呼吸综合征(SARS)早期诊断的简便、快速、灵敏的实验室检测方法.方法采用化学发光免疫分析方法(chemiluminescence immunosaasy,CLIA)测定12种不同病毒培养上清和人血中SARS冠状病毒核衣壳蛋白 (nucleocapsid protein)抗原(SARS-CoV-N).结果 7种不同SARS毒株测定均为阳性,12种非SARS毒株测定均为阴性,最低可检出核酸定量为6.3×101 PFU/mL的SARS-CoV培养上清;测定63例临床确诊SARS的阳性血清样本,发病6～10 d的样本检出率最高,可达100%;测定1 066例正常人样本,99.35%为阴性.结论 SARS-CoV的CLIA的灵敏度和特异性较高,并且简便、快速,在SARS的早期诊断中展示了良好的应用前景.; 甄亚平刘红齐娜单若明王巧巧吴晓东; 关键词：化学发光免疫分析法培养上清核衣壳蛋白 SAILS 核酸定量 CLIA

增敏化学发光免疫分析系统: 杨晓林孙旭东黄岚于晋生兰江王申五陶成英刘红吴旭东; 在发明增敏化学发光系统和高线性度单光子计数器的基础上，建立了一套符合国际标准的，将检测仪器和配套试剂的研制、生产、销售、服务统一纳入一体化管理的企业运行模式，批量生产和推广具有国际领先水平的化学发光免疫分析系统。该产品可...; 关键词：; 关键词：免疫分析

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定被引量：2: 2013年; 目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST.Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据。; 刘红刘宾和骁赵晓涛; 关键词：单纯疱疹病毒1型糖蛋白D 原核表达

人血清CYFRA21-1化学发光免疫分析方法的初步建立及应用被引量：1: 2012年; 目的:建立人血清CYFRA21-1化学发光免疫分析方法并在临床检测中的应用。方法:使用CY-FRA21-1定量测定试剂盒(化学发光法)检测308例临床血清标本,并与CYFRA21-1电化学发光全自动免疫分析方法进行对比。结果:灵敏度0.04μg/L,线性范围(1.5～100)μg/L,与NSE及CEA无交叉反应,样本中抗凝剂量的柠檬酸钠、肝素、EDTA-Na_2对测定结果没有影响。添加回收率和稀释回收率为90%～110%,分析内和分析间变异系数均<10.0%。该方法正常参考值为(0～3.4)μg/L(95%可信限)。ECLA测定结果与本法相比,临床总符合率为96.65%。结论:该方法灵敏度高、特异性好、稳定性强,检测范围宽,有良好的准确性和重复性,完全可替代进口化学发光试剂用于临床样本的检测。; 潘慧杰刘红唐磊李嘉杨萌萌杨铁生樊春红杨晓林孙旭东; 关键词：化学发光免疫分析细胞角蛋白19

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刘红