刘柯
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南方医科大学附属花都医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人乳头瘤病毒16型E6基因核酶对宫颈癌CaSKi细胞增殖和侵袭力的影响
- 核酶(Ribozyme,RZ)是一类具有酶活性的RNA分子,可序列特异性地与靶RNA分子配对,对底物进行切割,促进mRNA的降解,从而使其失去生物活性.其阻断有害基因表达的作用已得到证实.同反义核酸比较,核酶具有封闭和切...
- 刘柯
- 关键词：核酶侵袭力COX-2
- 文献传递
- pLEGFP—N1-基质细胞衍生因子-1α的构建与目的基因在恒河猴骨髓基质细胞内的稳定表达
- 2010年
- 目的 构建携带人基质细胞衍生因子（SDF）1α基因的反转录病毒真核表达载体pLEGFP-N1-SDF-1α,转染恒河猴骨髓基质细胞（BMSC）,观察外源性SDF-1α和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因在BMSC中的表达情况.方法 应用基因重组技术,从pBudce4.1-SDF-1α获得SDF-1α基因片段,重组到pLEGFP-N1真核表达载体上.pLEGFP-N1-SDF-1α经病毒包装,转染至恒河猴BMSC,用Western免疫印迹和免疫细胞化学检测表达情况.结果 酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入基因片段的正确性.BMSC转染pLEGFP-N1-SDF-1α后,在荧光显微镜下发出绿色荧光.western免疫印迹和免疫细胞化学证实SDF-1α在细胞内有效表达.结论 成功构建本研究pLEGFP-N1-SDF-1α,经病毒包装转染至恒河猴BMSC,SDF-1α和EGFP基因在BMSC内有效表达.为BMSC-SDF-1α-EGFP工程细胞自体移植治疗相关疾病提供了依据.
- 李三清徐强刘柯许百男潘力饶军华
- 关键词：基质细胞衍生因子-1Α绿色荧光蛋白质类骨髓基质细胞恒河猴
- 外源性SDF-1α和GDNF基因在恒河猴骨髓基质细胞内的稳定表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建携带人基质细胞衍生因子-1α（SDF-100和胶质细胞源神经营养因子（GDNF）基因的真核表达质粒pBudCE4．1-SDF-1α—GDNF，转染恒河猴骨髓基质细胞（BMSCs），观察外源性SDF-Jd和GDNF基因在BMSCs中的表达情况。方法应用基因重组技术，从cDNA文库获得GDNF和SDF-1α基因，重组到pBudCE4．1双表达载体上。pBudCE4．1-SDF-1α—GDNF经脂质体转染培养的恒河猴BMSCs，48h后行GDNF和SDF-1αWestern blot和免疫组化检测。结果酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入基因片段的正确性：48h后行West blot和免疫组化证实GDNF和SDF-1α在细胞内能有效表达。pBudCE4．1-GDNF—SDF-1仅转染BMSCs表达的GDNF和SDF—1α蛋白的量是阴性对照细胞的10倍和6倍。结论双基因真核表达质粒pBudCE4．1-SDF-1α-GDNF转染至恒河猴BMSCs后．SDF-1α和GDNF基因在BMSCs内能有效表达，为BMSCs携带SDF-1α和GDNF双基因自体移植治疗相关疾病奠定了基础。
- 徐强许百男刘柯潘力饶军华徐如祥
- 关键词：基质细胞衍生因子-1Α胶质细胞源神经营养因子
