刘元婧
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
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- 拟穴青蟹PDI保守区域的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 蛋白二硫键异构酶（PDI）是真核生物重要的多功能蛋白，其基因结构在虾蟹类尚未报道．从拟穴青蟹Scyllapa。ramamosain（Estampador，1949）脑组织中分离纯化总RNA，经逆转录得到cDNA第一条链，并以之为模板利用RACE（rapid—amplificationofcDNAends）技术，扩增出一条950bp的cDNA．将所得cDNA克隆到质粒载体pTZS7R／T，转化大肠杆菌DH5a细胞并对筛选的阳性克隆测序．通过与目前数据库中序列的比较，在此cDNA编码蛋白中发现其中i01个氨基酸与其他物种已知蛋白二硫键异构酶（PDI）中的PDI_a_PDI_a＇_C保守区域相似率在64％～79％之间．确定此cDNA编码拟穴青蟹PDI_a_PDI_a＇_C保守区域．
- 刘元婧杨玉荣叶海辉黄辉洋王桂忠李少菁
- 关键词：拟穴青蟹基因克隆
- 锯缘青蟹FSH β亚基基因的初步研究
- 根据脊椎动物中卵泡刺激素FSH β亚基基因序列保守区域设计引物,分别以锯缘青蟹基因组、脑cDNA和胸神经团cDNA为模板进行PCR反应,对产物进行克隆与测序,获得了可能与FSH β亚基有关的基因片段,为进一步研究该基因的...
- 刘元婧杨玉荣叶海辉
- 关键词：锯缘青蟹基因克隆卵泡刺激素PCR反应
- 文献传递
- 拟穴青蟹HSP70基因的克隆与组织表达被引量：3
- 2011年
- 热休克蛋白70(HSP70)是一种重要的功能蛋白.利用RACE和基因克隆等分子生物学技术,获得拟穴青蟹(Scylla paramamosain)HSP70全长cDNA序列,全长共2 189 bp,包括110 bp的5′UTR(untranslated regions)、126 bp的3′UTR和一个1 953 bp的开放阅读框(ORF).ORF可编码650个氨基酸残基,总分子质量约为71.2 ku,pI为5.38.同源蛋白的比较结果显示,拟穴青蟹HSP70序列与其他一些物种具有很高相似性,推测HSP70基因具有很高的遗传保守性,而基于HSP70氨基酸序列比对而绘制的系统树基本能够反映出各物种间的进化关系.以RT-PCR法检测雌性拟穴青蟹一些组织中的HSP70表达,结果显示各待测组织中均能扩增得到HSP70,说明HSP70在拟穴青蟹为组成型表达.其中,HSP70在卵巢中表达量最高,其次为脑神经节,推测这与HSP70作为分子伴侣的功能相关.
- 李文杏刘元婧叶海辉黄辉洋李少菁
- 关键词：拟穴青蟹HSP70克隆
- 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)蛋白二硫键异构酶基因的分子克隆与表达分析
- 2013年
- 蛋白二硫键异构酶(PDI)是内质网中的关键酶,参与蛋白合成过程中二硫键的形成、还原和异构。本文首次从拟穴青蟹(Scylla paramamosain)克隆获得了PDI基因cDNA全长,该序列长度为2015bp,开放阅读框为1452bp,编码483个氨基酸。荧光定量PCR检测发现PDI存在于拟穴青蟹的多个组织中;在拟穴青蟹卵巢发育过程中,PDI基因的表达量在前4个时期逐渐上升,到了第5期(成熟期)表达量则下降,表明PDI参与了卵巢发育的蛋白合成过程。免疫组化表明,拟穴青蟹卵母细胞存在PDI阳性反应,进一步为该分子参与卵巢发育提供了形态学证据。
- 曾祥兰刘元婧曾慧黄辉洋叶海辉王桂忠
- 关键词：拟穴青蟹卵巢发育荧光定量免疫组化
- 拟穴青蟹HSP70、PDI及GnRH受体的研究
- 拟穴青蟹Scylla paramamosain(Estampador，1949)是我国东南沿海4种青蟹中的主要优势种，重要的海洋经济蟹类之一。本研究采用分子生物学和免疫学技术对拟穴青蟹的一些功能蛋白—热休克蛋白70(he...
- 刘元婧
- 关键词：拟穴青蟹蛋白质二硫键异构酶分子克隆生殖调控
- 文献传递
- 拟穴青蟹蛋白二硫键异构酶保守区域cDNA序列及其克隆方法
- 拟穴青蟹蛋白二硫键异构酶保守区域cDNA序列及其克隆方法，涉及一种cDNA序列。提供一种拟穴青蟹蛋白二硫键异构酶保守区域cDNA序列及其克隆方法。拟穴青蟹蛋白二硫键异构酶保守区域cDNA序列是从拟穴青蟹脑组织中得到的PD...
- 叶海辉刘元婧杨玉荣黄辉洋
- 文献传递
- 拟穴青蟹GnRH-R的免疫识别
- 2011年
- 促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体（GnRH-R）对生殖具有重要的调控作用．迄今无脊椎动物GnRH及GnRH-R的研究尚少．本研究采用兔抗人GnRH-R、兔抗果蝇GnRH-R和兔抗海鞘GnRH-R的抗体，应用免疫印迹和免疫共沉淀技术对拟穴青蟹（Scylla paramamosain）GnRH-R进行了免疫识别，所得结果如下：1）经免疫印迹检测，拟穴青蟹脑、胸神经团、视神经节和精巢中共有的免疫阳性条带分子质量为45-55ku．脑和胸神经团中另有一条36ku条带；在精巢中，兔抗人GnRH-R和兔抗果蝇GnRH-R抗体只有一条28ku条带，而兔抗海鞘GnRH-R抗体显示有28，36和30ku的条带．2）利用免疫共沉淀技术，分离出与GnRH-R抗体相结合的两种物质，分子质量分别为38．1和54．0ku，分别与哺乳动物和非哺乳动物GnRH-R的分子质量接近．该发现提示拟穴青蟹体内存在GnRH-R，为深入了解甲壳动物生殖调控机理提供了理论依据．
- 陶永刘元婧叶海辉王桂忠李少菁
- 关键词：甲壳动物免疫印迹免疫共沉淀
