侯爵
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种CpG佐剂增强HIV-1DNA疫苗免疫原性的研究被引量：1
- 2011年
- 目的以一种CpG寡聚核苷酸为HIV-1DNA疫苗候选佐剂,研究该CpG佐剂增强DNA疫苗免疫原性,体外促进DC细胞成熟等特点。方法在Balb/c小鼠模型上连续3次联合免疫HIV-1DNA疫苗及CpG佐剂,通过IFN-γ、IL-2ELISPOT及ELISA检测HIV特异性细胞免疫反应及体液免疫应答强度;体外制备小鼠骨髓来源的树突状细胞,通过FACS技术、高通量细胞因子检测等方法评价CpG佐剂刺激活化DC的能力。结果 CpG能够增强HIV-1DNA疫苗诱导的特异性细胞免疫反应水平,降低DNA疫苗使用剂量;CpG体外刺激原代小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),能显著上调CD40、CD80、CD86等BMDC表面共刺激分子的表达,活化BMDC并分泌各型细胞因子IL-5、IL-12p70,促炎症因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、MIP-2、KC、MIG、Eotaxin、GM-CSF等以发挥佐剂效应。结论综合体内体外实验数据,证实该型CpG能够充分活化BMDC,显著提高HIV-1DNA疫苗免疫原性,降低疫苗使用剂量,可成为HIV-1DNA疫苗临床试验用候选佐剂。
- 侯爵刘颖刘勇邵一鸣
- 关键词：HIV-1DNA疫苗佐剂
- 基于CyPA和Gag的DNA疫苗
- 本发明涉及基于CyPA和Gag的DNA疫苗，其包含编码CyPA的多核苷酸和编码HIV的Gag蛋白的多核苷酸，其中所述DNA疫苗在接种于人类对象后允许在所述对象中表达所述CyPA和Gag蛋白，并由此引发Gag‑特异性的抗H...
- 邵一鸣侯爵刘颖
- 文献传递
- 新型抗结核分枝杆菌药物筛选模型的建立被引量：2
- 2011年
- 为建立基于酶水平和细胞水平的新型抗结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)药物的筛选模型,以M.tuberculosis H37Rv基因组DNA为模板,PCR特异性扩增异柠檬酸裂解酶(ICL)基因,构建表达载体,在E.coli BL21(DE3)中高效表达,使用N i2+亲和层析柱纯化重组ICL,检测其活性。优化ICL酶反应条件,考察待筛选样品溶剂对酶活性的影响,建立ICL抑制剂酶水平筛选模型;考察与优化耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegma)在以乙酸盐为唯一碳源的培养基中的生长状况,建立基于M.sm egma的乙醛酸代谢途径抑制剂的细胞水平筛选模型;利用上述2种筛选模型对1 060种可能具有拮抗活性的微生物代谢样品进行初筛和复筛,两者筛选结果正相关性较好。
- 张磊磊由鹏飞姚广新侯爵张怡轩
- 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌
- 黄热病减毒活疫苗的研究进展被引量：1
- 2011年
- 黄热病毒疫苗17D（yellow fever attenuated livevaccine-17D，YF-17D）问世于20世纪30年代，至今已有70多年的使用历史，接种人群超过6亿。我国早在20世纪50年代就按照WHO规范开展了黄热病疫苗YF-17D的生产，已有近60年的历史，主要供潜在暴露危险的人群使用；至今我国仍保持年均生产数万份YF-17D疫苗的规模用于计划接种。
- 侯爵刘颖邵一鸣
- 关键词：FEVER黄热病疫苗病毒疫苗WHO
- HIV-1 CN54 Pol P51抗原高效表达、纯化、复性及在抗体检测中的应用被引量：2
- 2010年
- 为获得可溶性高纯度HIV-1中国株CN54PolP51抗原,将携带CN54polp51基因的重组质粒pTHioHisA51转化大肠杆菌BL21codonplus-RIL,用IPTG进行诱导表达。用Chelating SepharoseFF-Ni亲和层析柱及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱纯化目的蛋白,采用透析复性法得到可溶性抗原,Western blotting检测目的蛋白。用纯化的P51抗原蛋白标记辣根过氧化物酶及包被酶标板进行双抗原夹心法ELISA检测。结果显示P51以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的50%,经两步层析和透析复性,目的蛋白纯度大于95%。Western blotting和双抗原夹心法ELISA检测均显示了良好的灵敏度和特异性。本研究可以为HIV-1疫苗研究和开发检测试剂提供支持。
- 侯爵孙静徐智勇范文玲张怡轩刘勇郝彦玲
- 关键词：纯化复性抗体检测
- 缺失C8-K3片段重组天坛痘苗病毒的免疫策略研究
- 2013年
- 目的探索不同的DNA疫苗初免-重组痘苗病毒加强免疫策略的效果,为建立最佳免疫方案提供依据。方法对小鼠进行DNA疫苗初免,之后分别加强免疫一针、两针和三针重组痘苗病毒VTT△C8-K3-gag,在不同时间点采取血样及制备脾细胞,检测针对痘苗病毒和HIV特异性体液免疫及细胞免疫应答。结果三种免疫策略中,DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两次的效果最佳,诱导的针对p55的结合抗体滴度达到106,分泌IFN-γ的T细胞数为342/106细胞。针对痘苗病毒的体液和细胞免疫应答显著低于加强免疫三针诱导的免疫反应。结论DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两针可诱导较高水平的HIV免疫应答,同时保证了较低水平的载体免疫反应。
- 刘铮刘颖王书晖张其程王荣敏侯爵刘畅吉栩邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒天坛株DNA疫苗免疫策略
- 基于CyPA和Gag的DNA疫苗
- 本发明涉及基于CyPA和Gag的DNA疫苗，其包含编码CyPA的多核苷酸和编码HIV的Gag蛋白的多核苷酸，其中所述DNA疫苗在接种于人类对象后允许在所述对象中表达所述CyPA和Gag蛋白，并由此引发Gag-特异性的抗H...
- 邵一鸣侯爵刘颖
- 文献传递
- 黄热病毒的基因组及其蛋白研究进展被引量：4
- 2011年
- 黄热病毒（Yellowfever virus,YFV）是属于黄病毒科（Flavivirdae）黄病毒属（Flavivirus）的典型代表,为RNA病毒其不仅是第一个被发现的导致人类疾病的＂滤过性颗粒＂,也是第一个被证实通过蚊蜱传播的病毒。黄热病是一种区域性疾病,
- 侯爵刘颖邵一鸣
- 关键词：黄病毒科基因组蛋白人类疾病RNA病毒
- 痘苗病毒天坛株C8L—K3L片段缺失表达载体的生物学性能研究
- 2013年
- 目的研究缺失C8L．K3L片段的痘苗病毒天坛株载体的生物学性能及外源基因的免疫原性。方法构建缺失C8L-K3L区域的重组痘苗病毒天坛株载体VrITT△c8-K3-gag。在4种细胞上检钡0了重组载体的增殖能力、在小鼠和家兔模型上进行毒力评价，并在BALB／c小鼠进行了免疫效果评价。结果与Vrrr相比，VTTAC8-K3-gag在CEF、BHK-21、HeLa细胞中复制能力显著下降，在Vero细胞中失去复制能力。VTYAC8-K3-gag在小鼠和家兔模型中毒力均有显著降低。VTT△C8-K3-gag免疫小鼠第4周后诱导的痘苗病毒特异结合抗体与中和抗体滴度分别达到5．6×10^3和1．0×10^4，第9周滴度弦到5．8×10^5和5．25×10^3，与VTKgpe相比均显著下降3～9倍，但E3刺激后的细胞免疫应答无显著变化。VTT△C8-K3-gag单独免疫或与DNA疫苗联合免疫诱导的HIV特异性抗体水平和细胞免疫应答均与VTKgpe无差异。结论VTrAC8-K3-gag是一个安全性较高且具有深入研究价值的HIV候选疫苗株。
- 刘铮刘颖王书晖张其程刘莹侯爵王荣敏邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒天坛株毒力免疫应答
- 采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达
- 2016年
- 目的采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体的应用和改造提供参考。方法分别构建含有萤火虫荧光素酶基因(luciferase)及HIV-1CN54Gag基因DNA,且携带不同转录调控元件(posttranscriptional regulatory element)HPRE/WPRE的疫苗载体(p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc、p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag),均经后肢胫骨前肌注射BALB/c小鼠,20μg/只。p DRVI-1.0Luc、p DRVI1.0HLuc和p DRVI1.0WLuc组仅免疫1次,于免疫后第1、7、14天采用活体成像技术检测小鼠体内荧光表达强度;p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag组分别于第0、2、4周进行免疫,于末次免疫后第2周进行体液(ELISA法)及细胞免疫检测(ELISPOT法)。结果 p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc组小鼠于免疫后第1及7天,体内荧光均局限分布于注射部位,未出现扩散转移的现象,且p DRVI1.0HLuc质粒发光强度最强(P<0.05),免疫第14天各组均未检测到明显的荧光素酶表达;p DRVI1.0HGag组小鼠血清中抗Gag蛋白特异性抗体水平和Gag蛋白特异的分泌IFNγ的脾淋巴细胞数均明显高于p DRVI1.0Gag和p DRVI1.0WGag组(P<0.05)。结论活体成像技术可用于快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体改造及免疫策略的优化提供了一个良好的研究平台。
- 孙静施建东侯爵乌美妮郝彦玲胡凝珠李彦涵李建芳王海漩胡云章
- 关键词：活体成像DNA疫苗
