余俊达 作品数:29 被引量:133 H指数:8 供职机构: 北京中医药大学 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
七箭方提取物防治糖尿病肾病的机制研究 被引量:2 2010年 目的:检测糖尿病大鼠肾脏组织中的纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1/2,以阐明七箭方提取物防治糖尿病肾病的机制。方法:链脲佐菌素腹腔注射造模,七箭方提取物及卡托普利灌胃16周后,免疫组化法、Elisa法检测正常组、模型组、七箭方提取物组、卡托普利组大鼠肾脏组中的FN、Ⅳ型胶原、MMP-2/9、TIMP-1/2。结果:Elisa结果显示模型组Ⅳ型胶原、TIMP-1/2表达升高,MMP-2/9表达降低;七箭方提取物组IV型胶原、TIMP-1/2降低,MMP-2表达升高;卡托普利组IV型胶原、TIMP-1降低。免疫组化结果显示模型组Ⅳ型胶原、TIMP-2表达升高,MMP-2表达降低;而七箭方提取物组与卡托普利组Ⅳ型胶原、TIMP-2表达降低,MMP-2表达升高。结论:七箭方提取物可通过影响Ⅳ型胶原、TIMP-1/2、MMP-2的表达防治糖尿病肾病。 许庆修 韩静 赵慧辉 潘秋 余俊达 王伟关键词:糖尿病肾病 胶原 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制剂 CGRP-shRNA慢病毒载体的构建与鉴定 2012年 目的:构建针对CGRP基因的shRNA载体并进行鉴定。方法:针对小鼠CGRP的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至质粒,构建重组体pLLU2G/CGRP,转化至stbl3细菌,挑选阳性克隆测序鉴定。慢病毒包装后,脂质体转导至neuro2A,显微镜观察荧光蛋白的表达。结果:测序证实质粒为所需的序列,脂质体转导至neuro2A 48 h后可见绿色荧光蛋白,转导率达90%。结论:成功地构建了针对CGRP基因的shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础。 韩静 余俊达 王伟关键词:降钙素基因相关肽 SHRNA 慢病毒 活血解毒方对糖尿病大鼠神经中AC-cAMP-PKA途径的影响 被引量:1 2012年 目的:观察腺苷酸环化酶(AC)-环磷腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)途径在糖尿病大鼠周围神经中的变化及活血解毒方对其的影响。方法:雄性SD大鼠分为正常组、模型组、甲钴胺组、活血解毒方高低剂量组。链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射65mg/kg造模,放免法检测坐骨神经内cAMP水平,免疫组化法检测坐骨神经中AC、PKA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经内AC、cAMP水平降低;与模型组比较,活血解毒方高、低剂量组大鼠坐骨神经内AC表达升高,高剂量组cAMP含量升高。结论:AC-cAMP在糖尿病大鼠周围神经中表达水平下降,活血解毒方可能通过调控AC-cAMP途径防治糖尿病神经病变。 韩静 姚青 余俊达 黄黎明 王伟关键词:活血解毒方 糖尿病神经病变 腺苷酸环化酶 环磷腺苷 蛋白激酶A 活血解毒方对糖尿病早期大鼠视网膜功能的影响 被引量:8 2012年 目的观察活血解毒方对糖尿病早期大鼠模型视网膜电图(electroretinogram,ERG)和大鼠视网膜组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)表达的影响。方法采用链脲佐菌素(65mg/kg)一次性腹腔注射SD大鼠建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和活血解毒方低(3.85g/kg)、中(7.70g/kg)、高剂量组(15.40g/kg)及西药组(羟苯磺酸钙胶囊,0.167g/kg),每组8只。另设正常对照组(8只,给予等体积蒸馏水灌胃),各组均灌胃给药20周。测定ERG,检测暗适应眼最大电反应的a、b波振幅及振荡电位(oscillatory potentials,OPs)振幅总和。并采用免疫组织化学法、Western blot和荧光定量PCR法检测大鼠视网膜积分光密度值(integral optical density,IOD)、GFAP蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠ERGa波、b波和OPs振幅降低(P<0.01),IOD、GFAP蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。与模型组比较,活血解毒方各剂量组b波和OPs振幅升高,IOD、GFAP蛋白及mRNA表达降低,活血解毒方中、高剂量组a波振幅值升高;西药组b波振幅值升高,IOD表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。西药组与活血解毒方各剂量组各指标比较,差异无统计学意义。结论活血解毒方可减轻糖尿病早期大鼠视觉电生理功能损害,对视网膜神经胶质细胞有一定的保护作用。 姚青 韩静 黄黎明 余俊达 王伟关键词:活血解毒方 视网膜电流图 糖尿病视网膜病变 胶质纤维酸性蛋白 活血解毒方对糖尿病大鼠氧化应激的影响 被引量:8 2010年 目的研究活血解毒方对糖尿病大鼠神经病变的预防作用,探讨其作用机制。方法观察活血解毒方对糖尿病大鼠周围神经病变的疗效及作用机理。雄性SD大鼠分为正常组、模型组、活血解毒方组。链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射60 mg/kg造模,观察大鼠血糖、热板实验潜伏期、甩尾时间、坐骨神经病理的改变,检测血清及坐骨神经中抑制羟自由基、超氧阴离子能力和过氧化氢、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果模型组大鼠血糖显著升高,热板潜伏期延长,甩尾时间延长(P<0.01),坐骨神经结构显著改变;活血解毒方组热板潜伏期及甩尾时间显著缩短(P<0.01),坐骨神经病理明显改善。模型组大鼠血清中抑制羟自由基及超氧阴离子能力显著降低(P<0.01),活血解毒方组血清中抑制羟自由基及超氧阴离子能力升高(P<0.05或P<0.01),血清及坐骨神经中MDA含量下降(P<0.05)。结论活血解毒方可能对糖尿病大鼠神经病变有预防作用,其机制可能与抑制氧化应激有关。 韩静 潘秋 余俊达 柴欣楼 郭淑贞 赵慧辉 刘永刚 王伟关键词:活血解毒方 糖尿病 氧化应激 cTnT与慢性心肌缺血血瘀证模型心功能相关性的实验研究 被引量:6 2011年 目的:观察肌钙蛋白T(cTnT)与小型猪血瘀证(慢性心肌缺血)模型后期心功能(心肌肥厚与重构)的相关性。方法:采用中华小型猪左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法制备慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组和模型组。动态观察模型动物心肌缺血(0~8周)情况,采用超声心动测定心功能与心肌缺血的程度,冠脉造影观测冠脉狭窄程度;应用放免法测定血中cTnT的浓度。结果:心电图、B超、冠脉造影结果显示该模型术后4~8周冠心病(心肌缺血)血瘀证病证模型稳定。心功能(LVEF)下降30%,左室收缩末期容量(ESV)增加27.6%,左室舒张末内径(LVEDd)、左室舒张末容积(EDV)、左室收缩末容积(ESV)分别增大14.41%、22.54%和64.96%。而8周心腔扩大,心肌重构,心指数进一步恶化,与对照组比较差异非常显著(P<0.01)。cTnT的浓度随心功能的下降而升高,呈强烈负相关。结论:冠心病(心肌缺血)血瘀证的发生发展尤其心功能与心腔结构的变化与cTnT密切相关,其浓度水平随缺血严重程度而增高,可用于临床冠心病(慢性心肌缺血)判断预后的参考指标与中药复方药物治疗的干预环节之一。 王勇 王思轩 李春 啜文静 郭淑贞 赵慧辉 陈建新 余俊达 王伟关键词:CTNT 慢性心肌缺血 心功能 血瘀证 指标的检测对糖尿病大鼠表征的影响 被引量:1 2011年 目的:观察定期检测胰岛素对糖尿病大鼠表征的影响。方法:链脲佐菌素(STZ)腹腔注射50mg/kg建立糖尿病模型,观察4周。模型1组(M1组)与正常1组(N1组)每周尾静脉采血0.5mL测试胰岛素;模型2组(M2组)与正常2组(N2组)在处死后采血测试胰岛素。定期观察大鼠一般状况,检测大鼠体重、血糖、饮水量、尿量、体温、旷场活动、抓力。结果:分别与N1、N2组比较,M1、M2组大鼠体重及抓力下降、血糖升高、饮水量及尿量增加,差异有统计学意义(P<0.05);M2组大鼠体温下降,差异有统计学意义(P<0.05),毛、尾巴、爪光泽尚可;M1组大鼠体温改变不明显,毛枯槁、尾巴严重结痂、爪脱屑。结论:M1、M2组糖尿病大鼠具有不同的表征,可能与M1组定期尾静脉采血有关,提示指标检测过程会影响动物的表征。 韩静 余俊达 潘秋 禄颖 刘永刚 张伟 王伟关键词:动物模型 糖尿病 活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变内皮素-1表达的影响 被引量:13 2012年 目的:探讨活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的影响。方法:采用链脲佐菌素(65 mg.kg-1)1次性ip的方法建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和活血解毒方高、中、低剂量组(15.4,7.70,3.85 g.kg-1)及导升明组(0.167 g.kg-1),ig给药,20周后处死,取血清检测AngⅡ和ET-1的含量。摘除眼球应用免疫组织化学标记抗生蛋白连菌素法(LSAB)法检测大鼠视网膜全层ET-1的表达。取大鼠视网膜组织,采用实时聚合酶链反应Real-time PCR检测ET-1 mRNA的表达。结果:糖尿病模型组大鼠血清AngⅡ和ET-1含量分别为(417.95±156.11),(330.12±81.59)ng.L-1,比正常组升高(P<0.01)。糖尿病模型组大鼠视网膜LSAB法标记染色病理切片中ET-1蛋白的表达升高,积分吸光度(IA)为(53.45±15.67),与正常组相比(12.76±3.27)显著升高(P<0.01),活血解毒方各剂量组及导升明组与模型组相比显著降低(P<0.01)。模型组ET-1 mRNA的表达显著高于正常组,活血解毒方各剂量组的表达明显低于模型组,与模型组相比有显著性差异。结论:活血解毒方可能通过降低视网膜ET-1的表达,延缓糖尿病大鼠视网膜病变的发展。 姚青 韩静 黄黎明 余俊达 王伟关键词:活血解毒方 糖尿病视网膜病变 内皮素-1 中药有效部位复方对糖尿病大鼠胰岛保护作用的研究 韩静 姚青 黄黎明 余俊达 王伟两种糖尿病大鼠模型证候特点的对比研究 被引量:2 2010年 目的:比较2种糖尿病大鼠模型的证候特点。方法:80mg/kg链脲佐菌素(strep to zocin,STZ)腹腔注射或高脂饮食辅以35mg/kgSTZ腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型。每周观察大鼠的宏观指征,定期检测大鼠的抓力、体温,8周后处死检测血糖、血脂、血液流变学、血常规、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodo thyronine,FT3)等指标,分析2种糖尿病大鼠模型证候特点的异同。结果:大剂量STZ造模大鼠表现为爪色青紫,唇色青紫,肢体冰凉;而且体温降低,抓力降低,FT3降低。高脂饮食造模大鼠表现为大便黏滞,耳有瘀点,尾巴湿润;而且抓力降低,血液黏稠。结论:大剂量STZ造模大鼠的证候可能符合阳虚血瘀的特点,高脂饮食造模大鼠的证候可能符合痰瘀互阻的特点。 韩静 潘秋 余俊达 柴欣楼 刘永刚 赵慧辉 王伟关键词:糖尿病 动物模型 证候