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何竞: 作品数：44 被引量：30H指数：3; 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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HCV IgM抗体检测试剂的研制及其在丙型肝炎检测中的应用被引量：1: 2010年; 目的建立生物素标记HCV多表位嵌合抗原HCV IgM抗体捕获检测方法,探讨在急、慢性丙型肝炎检测中的意义.方法克隆表达HCV多表位嵌合抗原并标记生物素,链酶亲和素标记HRP,以抗人IgM单克隆抗体包被酶联板,研制出BA-ELISA HCV IgM捕获检测试剂.同时检测68例急性丙型肝炎和20例15～25年慢性丙型肝炎患者及34例健康献血员血清IgG和IgM.结果 68例急性丙型肝炎IgG和IgM检出率分别为97.05%（66/68）和48.53%（33/68）;20例慢性丙型肝炎IgG和IgM检测率分别为100%（20/20）和95%（19/20）.慢性丙型肝炎IgG和IgM 两种检测方法比较差异无统计学意义（P＞0.05）;34例健康献血员血清IgG和IgM特异度均为100%.结论研制的新型抗HCV IgM检测试剂可用于急、慢性丙型肝炎检测,具有较高的敏感度和特异度.抗-HCV IgM不能作为HCV感染的早期诊断指标,不能区分近期与既往感染,IgM存在时间至少25年.; 陈堃王国华宋晓国冯晓燕朱翠侠何竞修冰水张贺秋; 关键词：丙型肝炎 HCV IGM

丙型肝炎病毒NS3蛋白酶在酵母系统中的可溶性表达被引量：3: 2005年; 利用毕赤酵母系统表达具有催化活性的丙型肝炎病毒 (HCV)NS3蛋白酶 .将PCR直接扩增的病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因和重组的带有辅酶的单链NS3 NS4A蛋白酶基因 ,分别插入表达载体pPICZαA的EcoRⅠ和XbaⅠ克隆位点 ,转化毕赤酵母GS115 ,可溶性表达NS3蛋白酶和单链NS3 4A蛋白酶 ;ELISA法测定表达蛋白酶的抗原性 ;原核高效表达载体pBVIL1表达酶切底物NS5A B片段 ,体外与蛋白酶共同温育 ,SDS PAGE鉴定蛋白酶催化活性 .载体测序结果表明 ,重组载体pPICZαA NS3和pPICZαA NS3 4A中的目的基因序列插入正确 ;SDS PAGE结果显示 ,培养物上清中存在分泌型目的蛋白带 ;ELISA结果证实 ,表达蛋白与HCV阳性血清有结合活性 ;蛋白酶与底物NS5A B片段不同作用时间的SDS PAGE ,看到约 2 4kD处底物条带的分解 .说明用毕赤酵母表达系统成功地表达了可溶性HCVNS3和单链NS3 4A蛋白酶 ;两种结构形式的蛋白酶在体外系统中都有催化活性 ,同时也都具有抗原性 .该研究为大量和方便地获得有催化活性的HCVNS3蛋白酶提供了有效途径 .; 胡巍凌世淦宋晓国刘文何竞朱翠侠陈坤; 关键词：丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶毕赤酵母可溶性表达

东部马脑炎病毒分子生物学研究进展: 本文对东部马脑炎病毒的基因相结构,编码蛋白及其功能,以及进化过程,进化速率作了综述.; 何竞祝庆余; 关键词：基因组结构编码蛋白进化过程; 文献传递

甲型流感病毒A/H1N1-NP抗原表位区段的克隆和表达: 目的：分析比对甲型流感病毒A/H1N1-NP抗原的序列，克隆表达保守的和变异的表位抗原区段，为免疫学诊断试剂的研究提供候选抗原。方法：采用BioSun生物学软件比较新近公布的A/H1N1病毒和我国猪流感病毒浙...; 冯晓燕凌世淦王升启张贺秋宋晓国修冰水何竞王国华陈坤朱翠霞戴振华张向颖; 关键词：甲型流感病毒核蛋白克隆表达; 文献传递

CpG和Al（OH）3佐剂联合使用增强丙型肝炎病毒重组蛋白疫苗的细胞免疫原性: 2010年; 目的 CpG和Al（OH）3佐剂联合使用增强丙型肝炎病毒（HCV）重组蛋白联合疫苗（TFE）的细胞免疫原性.方法以CpG、Al（OH）3、Al（OH）3＋CpG和弗氏佐剂（FA）为免疫佐剂,分别与TFE混合免疫BALB/c小鼠.末次免疫后10 d取静脉血,分离血清,用ELISA方法测定血清中特异性抗体,并每组处死5只小鼠,分离小鼠脾细胞,体外检测IFN-γ、IL-4和CTL杀伤试验;剩余的小鼠背部皮下注射1×106个SP2/O-NS3细胞,观察其保护作用.组间均数差异用LSD-t检验.结果 TFE＋Al（OH）3＋CpG组的特异性CTL杀伤能力高于TFE＋FA组和TFE＋CpG组（P〈0.05）;与TFE＋Al（OH）3组和TFE＋CpG组相比,TFE＋Al（OH）3＋CpG组小鼠脾细胞中分泌IFN-γ的淋巴细胞的数量显著增多（P〈0.05）.结论 Al（OH）3和CpG合用能显著增强HCV重组蛋白联合疫苗TFE的细胞免疫原性;TFE＋Al（OH）3＋CpG能有效预防表达HCV非结构蛋白NS3的细胞SP2/0-NS3对免疫小鼠的攻击.; 李广学修冰水凌世淦张贺秋闫涛魏林贺峰冯晓燕宋晓国王国华陈坤何竞曾瑞红; 关键词：丙型肝炎病毒 CPG AL(OH)3

利用IFNγ-ELISPOT检测肝癌复合表位抗原的细胞免疫反应: 目的：构建肝癌多表位基因和含Tat PTD的多表位基因的原核表达载体,表达纯化融合蛋白,比较其细胞免疫反应。方法：中心模板法合成多表位和Tat PTD;PCR产物分别克隆入原核表达载体pBVIL1,构建含Tat PTD及...; 何竞张贺秋王国华宋晓国陈坤朱翠侠凌世淦; 关键词：肝癌细胞免疫反应融合蛋白; 文献传递

西尼罗病毒的生物学特性及实验室检测被引量：6: 2007年; 西尼罗病毒可引起人和马的西尼罗病毒性脑炎,是近年来全球性公共卫生的新威胁。本文仅简要综述西尼罗病毒生物学特性及实验室诊断的研究进展,以期为我国开展西尼罗病毒的研究与检测提供参考。; 何竞张贺秋; 关键词：西尼罗病毒生物学

丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价: 2008年; 目的对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价，并与间接法进行比较。方法收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份，共85份样品，采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV，对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中，间接法检测阳性76份（89．41％），阴性9份；双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％），阴性12份。有3份间接法检测弱阳性，而双抗原夹心法检测为阴性，经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性，1份仅1条带阳性，再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml，HCVRNA测定为阴性。结论研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同，特异性优于间接法。; 张贺秋王国华陈坤宋晓国冯晓燕修冰水何竞朱翠侠; 关键词：高危人群双抗原夹心法丙型肝炎病毒

甲型H1N1流感病毒抗原表位区段的克隆和表达被引量：3: 2009年; 修冰水冯晓燕宋晓国张向颖戴振华张贺秋王国华陈坤何竞柴文涵凌世淦朱翠霞; 关键词：甲型H1N1流感病毒血凝素神经氨酸酶抗原表位