于劼 作品数:4 被引量:10 H指数:2 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
免疫亲和层析法纯化蛋白C 被引量:5 1993年 研制一种蛋白 C(PC)的特异单克隆抗体(McAb),它可以识别在钙离子存在与否的条件下呈现不同构象的 PC 抗原,将其偶联至 Sepharose 4B 凝胶上,组成亲和层析柱。凝胶上的 McAb 能连接无钙离子血浆中的 PC,这种免疫纯化法一步即可达到12000倍的纯化。PC 成品的比活性为180~230U/mg,在非还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现两条带(α-PC 和β-PC),在还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现5条带(α-SC-PC,β-SC-PC,α-HC,β-HC 和 LC)。 王海龄 钟峻 肖小璞 李和 于劼关键词:蛋白C 单克隆抗体 抗人血浆蛋白C单克隆抗体研制的初步报告 被引量:2 1995年 用物理化学方法纯化的人血浆蛋白C(HPC)免疫小鼠,制备了8株分泌抗HPC单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为PC01~PC08。各株杂交瘤细胞都具有长期稳定的抗体分泌能力,其中PC03为构象特异性单克隆抗体,二价金属离子对其与HPC的结合有明显影响;PC02和PC03对活性蛋白C的酶活性有促进作用;而PC04具有抑制作用。 王海龄 李和 于劼 肖小璞 钟峻关键词:单克隆抗体 人血浆蛋白C的酶联免疫测定法的建立 被引量:4 1995年 人血浆蛋白C(Human protein C,HPC)是维生素K依赖蛋白的一种,在调节血凝和纤溶过程中起着重要作用。HPC的缺乏,可以导致多种血栓性疾病,如静脉血栓、脑栓塞、新生儿突发性紫癜、严重中风和播散性血管内凝血(DIC)等。因此,在研究HPC缺乏的临床生理病理,以及在HPC制剂的制备和临床应用方面,HPC抗原(HPC:Ag)水平的检测都有着重要的意义。 国外目前采用3种方法测定HPC:Ag,即ELISA法、放射免疫测定法和火箭电泳法。放射免疫测定法所需仪器设备复杂,一般实验室难以开展;火箭电泳法特异性差,敏感性低,并且受抗血清制备规模的限制。 李和 于劼 肖小璞 王海龄关键词:酶联免疫测定 单克隆抗体 缺蛋白C血浆的研制 被引量:1 1995年 选择一种可识别有含Ca^(2+)或无Ca^(2+)条件下呈现不同构象蛋白C(Protein C,PC)的特异单克隆抗体(McAb),将其与Sepharose 4B凝胶偶联制成亲和层析柱。新鲜人血浆通过该柱时,仅PC被吸附,流出液即为缺蛋白C血浆(Protein C Deficient Plasma,PCDP)。经检测,PCDP内残余的PC<1%,其它凝血因子含量或活性基本未变。用含Ca^(2+)缓冲液清洗层析柱后(洗脱物Pc为另一重要产品),该柱可反复使用。 肖小璞 李和 于劼 赵建阳 周宇 闻欣 王海龄关键词:蛋白C 单克隆抗体