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SYBR Green I联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义被引量：2: 2007年; 目的探索SYBR GreenI联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义。方法选择浓度为108.48、105.70和103.70copies/ml的3种HBV-DNA阳性血清和<1×103.0copies/ml的阴性血清各1份,在TaqMan-PCR混合反应体系中加入SYBR Green I组成双荧光PCR(TaqMan+SYBR Green I组),同时进行TaqMan和SYBR Green I的单荧光PCR(分别为TaqMan组和SYBR Green I组),设置同一PCR和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其Tm,每种方法一次检测每份血清5次。结果TaqMan+SYBR Green I组检测的HBV-DNA阳性血清均为阳性,其平均含量为108.55±、105.79±、103.81±,与TaqMan组的108.49±、105.69±、103.72±copies/ml0.320.290.300.310.300.25对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31、0.54和0.27,P>0.05);与SYBR Green I组的108.41±、0.35105.21±和103.26±copies/ml(不含未检出的两次血清)比较,除高浓度外,中低浓度有统计学意义(t=2.90和0.340.262.62,P<0.05)。TaqMan+SYBR Green I组和SYBR Green I组阳性血清均出现明显熔解曲线,熔解温度(Tm)分别为71.8℃、72℃和79.8℃,阴性血清未出现扩增曲线和Tm值。结论SYBR Green I联合TaqMan-PCR检测HBV-DNA时,具有能维持TaqMan-PCR的高灵敏度、特异性更强,并能同时检测HBV-DNATm的特点,为HBV的DNA多态性分析,尤其是在HBV基因分型方面提供了新的检测思路。; 赵友云高应林王春香乐惠荣; 关键词：SYBR TAQMAN 定量PCR HBV-DNA含量

血清药理学方法观察芍药苷对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响被引量：8: 2006年; 目的:研究芍药苷含药血清对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:采用血清药理学方法,以500mg·kg-1·d-1药量的芍药苷给兔灌胃,分离药物血清后,加到培养的Bel-7402细胞中,MTT比色法观察含药血清对人肝癌细胞增殖的抑制作用。并设立无药血清及阿霉素药物血清进行对照。结果:3种不同浓度的芍药苷血清及阿霉素血清均对人肝癌细胞Bel-7402增殖有抑制作用,其中以浓度为20%的芍药苷血清的抑制率最高,与阿霉素血清的作用相当。结论:芍药苷含药血清对人肝癌细胞Bel-7402有一定抑制作用。; 吴玲善晏雪生刘新莲乐惠荣; 关键词：芍药苷肿瘤细胞阿霉素血清药理学

丙氨酸氨基转移酶正常人群隐匿型乙型肝炎病毒核酸的检测: 2007年; [目的]了解隐匿型乙型肝炎病毒(occult HBV)在丙氨酸氨基转移酶(ALT)正常人群中的感染情况。[方法]应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测538例ALT正常、HBsAg阴性人群血清中HBV-DNA水平。[结果]538例人群中HBV-DNA阳性率为15.6%,男性(22.8%)显著高于女性(7.8%)(P<0.01),≥50岁(16.7%)与<50岁(15.5%)差异无统计学意义(P>0.05),有输血史(21.9%)高于无输血史(14.1%)(P<0.05),且HBV-DNA水平均<103.6copies/ml。[结论]ALT正常人群中存在隐匿型HBV感染,且与输血史和性别有关。提示临床进行输血和器官移植等异体成分治疗时,在检测ALT和HBV标志物的同时,应结合灵敏度高的FQ-PCR方法检测HBV-DNA,以杜绝隐匿型HBV传播的可能性。; 赵友云高应林王春香乐惠荣; 关键词：乙型肝炎荧光定量聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA 乙型肝炎表面抗原

ALT正常、HBsAg阴性人群中隐匿型乙型肝炎病毒的感染情况被引量：3: 2007年; 目的了解隐匿型乙型肝炎病毒(occult HBV)在ALT正常、HBsAg阴性人群中的感染情况。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测192例ALT正常、HBsAg阴性人群血清中HBV-DNA含量。结果192例人群中HBV-DNA阳性率为15.6%(30/192),HBV-DNA含量均低于103.6copies/ml。男性和女性人群的HBV-DNA阳性率分别为22.8%(23/101)和7.7%(7/91),差异有显著性(2=8.26,P<0.01);50岁以上和50岁以下人群的HBV-DNA阳性率分别为17.6%(3/17)和15.4%(27/175),两者差异无显著性(2=0.06,P>0.05);抗-HBe阳性和(或)抗-HBc阳性和(或)抗-HBs阳性与HBV标志物(HBV-M)全阴性人群的HBV-DNA阳性率分别为18.2%(28/154)与5.3%(2/38),差异有显著性(2=3.86,P<0.05)。结论ALT正常人群中存在隐匿型HBV感染,且与性别有关。提示临床在输血和器官移植时,应结合灵敏度高的HBV-DNA检测方法,方能预防隐匿型HBV的传播。; 赵友云高应林王春香乐惠荣; 关键词：FQ-PCR HBV-DNA HBSAG阴性

改良荧光定量PCR同步检测HBV-DNA含量及其熔解温度: 2007年; 目的通过改进荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的单荧光标记,建立灵敏、特异的HBV-DNA含量及其熔解温度(Tm)的同步检测方法。方法根据荧光标记物质的不同,将FQ-PCR分为TaqMan+SYBR GreenI双标记(T+S组)、TaqMan探针单标记(T组)和SYBR GreenI染料单标记(S组)三种,同时检测HBV-DNA已知浓度为108.48、105.70、103.70和<1×103.00(copies/ml)的血清中HBV-DNA含量及Tm,每组FQ-PCR检测每份血清时1次做5个平行管。结果T+S组检测的HBV-DNA阳性血清均为阳性,其平均含量为108.55±0.32、105.79±0.29、103.81±0.30,与T组的108.49±0.31、105.69±0.30、103.72±0.25copies/ml对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31、0.54和0.27,P>0.05);与S组的108.41±0.35、105.21±0.34和103.26±0.26copies/ml(不含未检出的两次血清)比较,除高浓度外,中低浓度有统计学意义(t=2.90和2.62,P<0.05)。T+S组和S组阳性血清均出现明显熔解曲线,Tm分别为71.8℃、72℃和79.8℃,阴性血清未出现扩增曲线和Tm值。T+S组、T组和S组的灵敏度分别为102.70、102.70和103.00copies/ml。结论改良的SYBR GreenI和TaqMan探针双标记的FQ-PCR检测HBV-DNA时,兼有TaqMan探针标记FQ-PCR的灵敏度高、特异性强和SYBR GreenI标记FQ-PCR的Tm分析的优点,能达到同步检测HBV-DNA含量及其Tm的目的,为HBV-DNA含量及其多态性分析,尤其是为HBV-DNA含量及其基因分型同步检测提供了新思路。; 赵友云高应林王春香乐惠荣; 关键词：荧光标记聚合酶链反应乙型肝炎病毒核酸

医院内下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析被引量：2: 2007年; 目的:研究我院下呼吸道感染病原菌的分布及耐药趋势,为指导临床用药提供依据。方法:对本院2004年11月至2005年11月住院患者下呼吸道标本中分离的主要细菌用纸片扩散法检测药敏。结果:共分离病原菌1230株,主要以G-杆菌为主,占检出菌总数的40.81%,其次为真菌,占21.2%,G+球菌占17.8%。检出率最高的前6种菌为:铜绿假单胞菌(38.9%),真菌(21.2%),大肠埃希菌(8.6%),金黄色葡萄球菌(8.0%),凝固酶阴性葡萄球菌(5.4%),肺炎克雷伯菌(4.9%)。耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为86.59%,除氯霉素的耐药率为42.11%外,其他的抗生素的耐药率均高于70%,对万古霉素的敏感率仍为100%。G-杆菌对亚胺培南的耐药率最低,其次为头孢派酮/舒巴坦和头孢吡肟,耐药率低于50%,对头孢噻肟、氨曲南的耐药率较高。结论:细菌的耐药情况日益严重,根据结果调整用药方案是保证治疗效果的可靠保证。; 王飞乐惠荣; 关键词：下呼吸道病原菌耐药性

FQ-PCR技术在孕妇Ⅱ型单纯疱疹病毒感染中的应用被引量：1: 2008年; 目的：探讨孕妇血清中Ⅱ型单纯疱疹病毒核酸（HSV 2-DNA）的数量与宫内感染率之间的关系。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法对31例HSV 2-IgG阳性的晚期妊娠孕妇血清及其新生儿脐血HSV 2-DNA含量进行检测。结果：31例HSV 2-IgG阳性孕妇中有27例血清HSV 2-DNA阳性,含量为1.0×10^3～5.4×10^5copies/mL,新生儿脐血HSV 2-DNA阳性7例,宫内传播率为25.9%（7/27）,7例发生新生儿宫内感染的孕妇血清HSV 2-DNA含量均〉5.3×10^4copies/mL。结论：孕妇血清中HSV 2-DNA含量升高是胎儿发生Ⅱ型HSV感染的重要因素之一。FQ-PCR可以准确检测血清HSV 2-DNA的含量,提示体内复制和宫内感染情况,对于临床诊断与治疗有一定的指导意义。; 高应林赵友云王春香乐惠荣; 关键词：荧光定量聚合酶链反应单纯疱疹病毒妊娠

乙型肝炎患者HBsAg*PHSA-Re检测的临床意义: 2000年; 笔者检测264例乙型肝炎患者的HBsAg*PHSA-Re(乙肝病毒表面抗原*聚合人血清白蛋白受体)及HBV-M(乙肝病毒标志物)、HBV-DNA和ALT,比较它们之间的关系,探讨HBsAg*PHSA-Re的临床意义。现报告如下。 1 资料与方法 1.1 研究对象 264例乙型肝炎患者均来自于我院肝病中心门诊。其中急性肝炎74例,慢性肝炎190例。按1995年5月北京第5次全国传染病学术会议制定的病毒性肝炎诊断标准分型。41例健康者,或抗-HBs阳性或HBV-M全部阴性,且肝功能均正常。; 蔡望喜胡传芳乐惠荣王春香; 关键词：乙型肝炎 HBSAG

不同感染途径的丙型肝炎患者血清HCV RNA及抗-HCV与ALT水平的分析被引量：3: 2006年; 目的:探讨丙型肝炎(丙肝)患者感染途径与其肝脏病变程度的关系。方法:根据感染途径的不同将210例丙肝患者分输血后丙肝(PTHC组)102例和散发性丙肝(SHC组)108例,应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术、酶联免疫吸附方法(ELISA)和自动生化速率法分别检测两组患者血清中HCV RNA含量、抗-HCV及ALT水平。结果:PTHC组HCV RNA阳性率和ALT的异常率均显著高于SHC组(χ2=23.39,P<0.01和χ2=13.73,P<0.01);HCV RNA阳性患者中,PTHC组的HCV DNA含量均值显著高于SHC组(t=4.29,P<0.01);ALT异常患者中,PTHC组的ALT水平均值显著高于SHC组(t=4.30,P<0.01)。HCV RNA的含量与ALT水平呈正相关(r=0.794,P<0.01)。结论:PTHC组患者病毒血症水平和肝脏功能损害的程度均显著高于SHC组,HCV不同的感染途径可导致患者不同的感染结果。; 赵友云高应林乐惠荣王春香; 关键词：丙型肝炎病毒核糖核酸丙肝病毒抗体丙氨酸氨基转移酶

类风湿性关节炎患者抗环瓜氨酸肽抗体检测的临床分析被引量：2: 2008年; 乐惠荣袁惠; 关键词：类风湿性关节炎患者抗环瓜氨酸肽抗体检测自身免疫性疾病类风湿因子

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乐惠荣

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