黄剑钧
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
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- 眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶活性检测方法的优化
- 2009年
- 目的优化眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAO)酶活性测定方法。方法采用邻联茴香胺(ODA)、邻苯二胺(OPD)和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)三种供氢体测定NAV-LAO的活性并比较其灵敏度和重复性。结果OPD方法测定L-氨基酸氧化酶酶活性的检测限为0.0025mg.mL-1,相对标准偏差(RSD)为2.1%。结论OPD方法测定NAV-LAO活性具有较好的灵敏度和稳定性。
- 陈洲黄剑钧薛玲许云禄林丽珊
- 关键词：眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶邻苯二胺
- 舟山眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化及对体内外抗血管生成作用
- L-氨基酸氧化酶(ECl.4.3.2)是一类以FAD为辅基的黄素蛋白酶，能立体特异性催化L-氨基酸氧化脱氨生成α-酮酸、H2O2和氨[1]。L-氨基酸氧化酶在蛇毒中分布非常广泛，是蛇毒中一种重要的组分，并有众多的生物学活...
- 黄剑钧
- 关键词：眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶分离纯化抗血管生成作用
- 文献传递
- 蛇毒L-氨基酸氧化酶的研究进展被引量：2
- 2009年
- L-氨基酸氧化酶（LAAO）作为蛇毒中的一个重要成分，有着多样的生物学活性，近年来许多文献报道LAAO的生化作用和药理作用，提供了许多关于其对血小板活性、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抗菌等方面的资料，本文就蛇毒L-氨基酸氧化酶（SV-LAAO）的理化性质、生物学特性及其可能的抗肿瘤作用及作用机制作一综述。
- 黄剑钧许云禄
- 关键词：蛇毒L-氨基酸氧化酶理化性质生物学活性抗肿瘤抗菌作用
- 眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶分离纯化及对血管内皮细胞的抑制作用被引量：7
- 2009年
- 目的从眼镜蛇毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-a-mino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAAO),观察其对血管内皮细胞是否有抑制作用。方法应用阳离子交换层析和亲和层析方法分离纯化NAV-LAAO;采用MTT法、Western blot测定caspase及细胞小管形成实验观察NAV-LAAO对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长和血管生成的影响。结果眼镜蛇毒粗毒经两步层析法得到的LAAO,分子量约为58 ku。NAV-LAAO抑制HUVEC细胞的生长和细胞小管形成,其抑制细胞生长的IC50为21.42 mg.L-1。与对照组相比,LAAO组caspase-3、caspase-8升高。结论应用两步层析法从眼镜蛇毒中分离出的NAV-LAAO具有剂量依赖性的抑制HUVEC细胞的生长和影响细胞小管形成的作用。
- 陈洲黄剑钧薛玲许云禄林丽珊
- 关键词：眼镜蛇毒分离纯化血管内皮细胞
- 蓖麻毒素的纯化及其对血管内皮细胞增殖与凋亡的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:对蓖麻毒素纯化方法进行改良并探讨其体外抗血管生成的药理作用。方法:通过磷酸盐缓冲液抽提、Sepharose 4B亲和层析与Sephacryl S-100分子筛层析纯化蓖麻毒素,反相疏水高效液相色谱法测定蛋白纯度,免疫印迹法进行鉴定;原代培养人脐静脉内皮细胞,免疫细胞化学法鉴定,MTT法检测蓖麻毒素对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术定量分析细胞凋亡率。结果:采用改良法纯化蓖麻毒素明显缩短了纯化周期,纯化的蛋白经免疫印迹技术证实为蓖麻毒素,蛋白纯度高达95.3%;纯化的蓖麻毒素抑制体外培养人脐静脉内皮细胞增殖作用具有明显的时间及剂量依赖效应,并且可明显诱导细胞凋亡,随着药物浓度增加,细胞凋亡率,尤其是晚期凋亡率上升更明显。结论:采用改良方法纯化可获得高纯度的蓖麻毒素,纯化的蓖麻毒素具有明显的抑制血管内皮细胞增殖,诱导细胞凋亡作用。
- 陈志奎林礼务黄剑钧何以敉高上达
- 关键词：蓖麻毒素纯化血管内皮细胞增殖凋亡
- 蛇毒L-氨基酸氧化酶的研究进展
- 2009年
- L-氨基酸氧化酶（LAAO）作为蛇毒中的一个重要成分，有着多样的生物学活性，近年来许多文献报道LAAO的生化作用和药理作用，提供了许多关于其对血小板活性、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抗菌等方面的资料，本文就蛇毒L-氨基酸氧化酶（SV-LAAO）的理化性质、生物学特性及其可能的抗肿瘤作用及作用机制作一综述。
- 黄剑钧许云禄
- 关键词：蛇毒L-氨基酸氧化酶理化性质生物学活性抗肿瘤抗菌作用
