黄丽
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p100蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义的研究
- 研究目的：原发性肝癌是目前我国最普遍的恶性肿瘤疾病之一。由于不同的基因表型和个体差异以及广泛的危险因素,肝癌的发病机制尚未明确。肝癌因其发病隐匿,发现时多为晚期,预后较差。因其对化疗不敏感和对放疗的耐药性,所以肝脏切除和...
- 黄丽
- 关键词：P100肝癌SMMC7721人肝癌细胞系
- 文献传递
- p100蛋白慢病毒干扰载体及p100沉默的HepG2稳定细胞系的构建被引量：1
- 2012年
- 目的:用表达shRNA的干扰慢病毒载体系统构建p100基因稳定沉默的HepG2人肝癌细胞系。方法:通过RNAi序列设计软件进行p100干扰片段设计,筛选出p100基因的RNAi有效靶序列,进一步合成靶序列的OligoDNA并构建pLKO.3G-p100I慢病毒载体,用双酶切及测序进行鉴定。将构建好的p100shRNA表达质粒与慢病毒包装质粒共转染至包装细胞293T,包装产生病毒颗粒。运用病毒颗粒感染HepG2细胞,获得p100稳定沉默的细胞系。荧光显微镜下观察感染效率,利用Westernblot方法检测稳定细胞株中p100的沉默效果。结果:成功构建了具有p100干扰效果的慢病毒载体,并获得了稳定沉默p100及对照的HepG2细胞株。慢病毒感染HepG2细胞后,荧光显微镜下观察到90%以上细胞发出绿色荧光,Westernblot证实干扰p100后,HepG2细胞株中p100蛋白表达水平明显降低。结论:成功构建了具有p100干扰效果的慢病毒干扰载体及p100稳定沉默的HepG2细胞系。
- 黄丽尹洁丁建民宋娟高星杰经翔杨洁
- 关键词：细胞系慢病毒载体HEPG2细胞系
