高彤
- 作品数:6 被引量:8H指数:2
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 基因工程菌酶法合成抗癌新药6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷被引量:3
- 2007年
- 6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)是一种新型抗癌药物,它作为药物前体应用于PNP自杀基因治疗系统可以选择性杀伤肿瘤细胞。本实验构建了一个高效表达大肠杆菌来源的嘌呤核苷磷酸化酶重组质粒,并利用基因工程菌以15mmol/L 6-甲基嘌呤和60mmol/L 2′-脱氧尿苷为底物合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷,在40mmol/L pH7.0的磷酸缓冲液中,2%菌体在55℃反应2h,转化率可达83.78%。用硅胶制备薄层提纯得到白色针状晶体,收率为76.4%。HPLC测定该产物纯度99.3%,核磁共振鉴定该产物为MePdR。
- 高彤李文舟梁胜华李晓晖任大明霍旭辉刘万峰乔宾福
- 关键词:嘌呤核苷磷酸化酶工程菌酶法合成
- 强直性肌营养不良症致病新位点的阶段性研究
- 2005年
- 目的研究强直性肌营养不良症(MD)是否存在致病新位点及可能的致病新位点的位置。方法以中国上海地区一个较大的MD家系的31名成员为研究对象, 抽取血样后首先进行MD1及MD2位点PCR扩增,并PAGE电泳检测;对该家系的部分成员血样进行MD1位点克隆和测序检测,在MD1和MD2位点未显示异常之后,采用全基因组扫描技术为平台的连锁分析方法,计算LOD值,以判定某些可能与MD连锁的基因位点。结果该家系31名成员的血样MD1及MD2位点未显示寡核苷酸串的异常扩增;并经参数型连锁分析,其MD1及MD2位点两侧微卫星标记的LOD值均小于0.3,在D1S484、D2S486、D5S641、D5S471、D5S436、D6S434、D12S79、D14S70、D14S292位点得到的LOD值分别为1.9393(θ=0.0)、1.2857(θ=0.1)、1.1064(θ=0.1)、1.4488(θ=0.0)、1.1298(θ=0.1)、1.6851(θ=0.0)、1.3882(θ=0.1)、1.1212(θ=0.1)、1.7720(θ=0.0)。提示这些标记可能与MD存在连锁关系。结论强直性肌营养不良症(MD)极可能存在致病新位点,并且致病新位点可能存在于以上微卫星标记处。
- 余志良谢惠君牛芳高彤赵晓萍丁素菊任大明邓本强
- 关键词:强直性肌营养不良症致病微卫星标记PCR扩增PAGE基因位点
- 基因工程菌酶法合成核苷类抗癌新药6-甲基嘌呤-2'-脱氧核苷
- 6-甲基嘌呤一2’一脱氧核苷(MePdR)作为潜在的抗癌候选药物正受到越来越多的关注。MePdR本身是无毒的药物前体,可被大肠杆菌(Escherichiacoli)的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)分解成6一甲基嘌呤(MeP)...
- 高彤
- 关键词:嘌呤核苷磷酸化酶酶法合成基因工程抗癌药物
- 文献传递
- 嘌呤核苷磷酸化酶基因的克隆及原核表达载体的构建被引量:3
- 2006年
- 通过PCR方法从产气肠杆菌、胡萝卜软腐欧文氏菌、大肠杆菌扩增嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因,然后将扩增的约720bp的基因片段克隆到pET-28b表达载体上,构建重组PNPase的表达载体。核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因在三个菌株之间有很高的同源性。SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异性蛋白质条带,其分子量约为29.8kDa.该载体的构建为进一步研究核苷及其类似物的生物合成奠定基础。
- 李晓晖孙嘉康高彤任大明陈晓丽刘岩乔宾福
- 关键词:嘌呤核苷磷酸化酶基因克隆表达载体构建
- 用基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷的方法
- 本发明本发明属于生物制药技术领域,具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌,并利用该基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(6-Methylpurine-2′-Deoxyriboside,MePdR)的方法。包括如...
- 梁胜华李文周高彤李晓晖任大明
- 文献传递
- 散发性帕金森病患者γ-synuclein基因的研究被引量:2
- 2003年
- 目的 探讨 γ-synuclein基因 C2 43 G和 A3 77T多态在散发性帕金森病 (Parkinson' s dis-ease,PD)的疾病易感性中的意义。方法 采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态法 ,对上海汉族人中14 5例 PD患者和 184名正常人进行γ-synuclein基因 C2 43 G和 A3 77T多态分型 ,并作与 PD的遗传关联研究。结果 PD患者与正常对照间γ-synuclein基因 C2 43 G和 A3 77T多态分布的差异无显著性 ,两种多态与 PD亦无关联 (P值均大于 0 .0 5)。结论 上海地区汉族人群中γ-synuclein基因 C2 43 G和 A3 77T多态与散发性
- 苏敬敬谢惠君赵武伟韩海雄高彤徐玲汤国梅任大明
- 关键词:散发性帕金森病PD染色体遗传性疾病