马臣杰
- 作品数：42 被引量：34H指数：3
- 供职机构：宁夏大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏大学科学研究基金资助更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 产气荚膜梭菌β2毒素抗体的间接ELISA方法
- 本发明公开了一种产气荚膜梭菌β2毒素抗体间接ELISA检测方法，包括步骤一、产气荚膜梭菌β2毒素抗体的间接ELISA方法的建立，步骤二、结果判定标准的确定。本发明属于病原微生物检测技术领域，具体是提供了一种特异性好、灵敏...
- 曾瑾王玉炯吴霜宋孚洋李勇马臣杰张思雨马玲玲马红梅王东李文
- 文献传递
- 奶牛养殖场堆积粪便中病原微生物多样性及耐药基因丰度研究
- 2022年
- 为了探讨堆积粪便和周围土壤中微生物相对丰度,分析粪便堆积和周围土壤中病原微生物和抗生素耐药基因的分布及富集情况,本研究收集宁夏规模化奶牛养殖场3份堆积粪便和3份堆积区域周围土壤样本,采用宏基因组测序获得样本全基因组信息,使用NCBI-NR数据库进行分类学注释和分析,通过PHI数据库对样本内病原微生物和毒力基因进行注释分析,通过ARDB数据库对样本内抗生素耐药基因进行注释分析。结果表明,在堆积粪便和土壤中共注释到39个门、76个纲、167个目、369个科、1103个属、3264个种,其中细菌在堆积粪便及土壤样品中分别占97.49%和98.63%,为绝对优势。奶牛养殖场堆积粪便和周围土壤微生物群落主要由变形菌门、拟杆菌门和放线菌门等39个门组成。堆积粪便中病原微生物的种类、毒力基因相对丰度均高于土壤中相对丰度(657961.00±391617.24;155553.67±43038.27,P<0.01)。土壤中病原微生物相对丰度(relative abundances,RAs)在不同土壤深度中无差异,而堆积粪便中34个病原微生物属RAs均随粪便堆积深度的增加而增大,优势种主要为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、沙门氏菌(Salmonella enterica)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)和稻白叶枯黄杆菌(Xanthomonas oryzae)。堆积粪便中共注释到所属49类抗生素78种优势耐药基因(相对丰度>0.5%),高于土壤中的49种耐药基因(所属31类抗生素),其中29种耐药基因的相对丰度随堆积深度上调。主要包括链阳霉素A(vatb基因)、林可酰胺类抗生素/大环内脂类抗生素/链阳霉素B(tlrc,cara,oleb,srmb基因)、万古霉素(vanug基因)。可见牛奶养殖粪便的堆积会促进病原微生物、毒力基因、耐药基因的富集,并可能对周围土壤造成污染。
- 张旭马臣杰马臣杰吴晓玲张雯
- 关键词：宏基因组学病原微生物耐药基因
- LncRNA-COX2小干扰RNA的制备及其应用
- 本发明公开了一种长链非编码RNALncRNA‑COX2的小干扰RNA及其于治疗、诊断和预后评估结核病的药物中的用途，以及所述LncRNA‑COX2的小干扰RNA在制备用于预防和治疗结核病的药物中的用途。本发明所述的Lnc...
- 邓光存马臣杰徐雅楠
- 文献传递
- 绵羊肺炎支原体甘油代谢酶GlpO的表达、鉴定与纯化
- 2014年
- 为了研究绵羊肺炎支原体GlpO蛋白的结构和功能,试验构建了绵羊肺炎支原体Y98株甘油代谢酶GlpO的重组表达载体p ET-32a-glp O,并在大肠杆菌BL21(DE3)中对其进行表达,然后经SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定,最后利用Ni柱在AKTA系统上对GlpO进行纯化。结果表明:重组表达的GlpO蛋白在SDS-PAGE中的分子质量与GlpO理论分子质量54 ku接近,并且能够被anti-S-Tag antibody特异性识别。说明本试验成功在大肠杆菌中可溶性表达了绵羊肺炎支原体GlpO蛋白。
- 马臣杰侯玉婷李敏何玉龙何萍张斯民张文清
- 关键词：绵羊肺炎支原体大肠杆菌蛋白纯化
- 产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法
- 本发明公开了一种产气荚膜梭菌β1毒素抗体间接ELISA检测方法，包括步骤一、产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法的建立，步骤二、结果判定标准的确定。本发明属于病原微生物检测技术领域，具体是提供了一种特异性好、灵敏...
- 马臣杰曾瑾马玲玲李勇宋孚洋刘晓明马红梅吴霜马嘉琦王东李文
- 文献传递
- 单增李斯特菌感染RAW264.7细胞转录组差异表达分析
- 2023年
- 为研究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染前后RAW264.7细胞基因表达谱变化,筛选关键功能基因和通路,探究其致病机制。作者用感染复数(MOI)10的LM感染RAW264.7细胞6 h,提取细胞RNA进行转录组测序,选取感染组与对照组相比差异倍数≥1.5且P<0.05的差异表达基因进行GO和KEGG富集分析,并通过RT-qPCR验证部分差异基因。转录组结果显示,RAW264.7细胞在感染LM前后有1782个基因差异表达,其中上调为989,下调为793。GO分析结果主要涉及免疫系统过程、免疫反应、细胞程序性死亡调控等。KEGG分析结果显示,显著富集的通路有细胞因子-受体相互作用、肿瘤坏死因子信号通路、IL-17信号通路等。RT-qPCR验证实验结果显示,随机选择的11个显著差异基因表达倍数趋势与测序结果一致。该研究为进一步深入研究LM的致病机制奠定了基础。
- 马红梅马臣杰马臣杰马玲玲马嘉琦曾瑾
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌RAW264.7细胞转录组差异表达基因
- 甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立被引量：1
- 2016年
- 目的制备特异性的甘草酸单克隆抗体。方法通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体。结果经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5%,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r^2=0.9977)。结论为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 宋孚洋郝秀静张东涛马臣杰彭励丁晓莉
- 关键词：甘草酸单克隆抗体酶联免疫法甘草
- 甘草酸检测试剂盒的组装与效果评价
- 2015年
- 目的:研制甘草酸间接竞争酶联免疫试剂盒。方法:通过棋盘滴定法确定了抗原最佳包被浓度为1μg/m L,一抗稀释度为1:8000,并以此成功组装了甘草酸快速检测试剂盒。结果:使用试剂盒检测了甘草酸样品,并与HPLC测定结果进行对比,发现灵敏度有了显著提高,达到了纳克级别。试剂盒的回收率高于96%,变异系数低于4.5%。结论:开发出的试剂盒稳定性良好,不同批次产品间检测值没有显著差异,有效的缩短了检测时间和检测成本,为甘草酸快速检测提供了一种新方法。
- 宋孚洋张东涛郝秀静马臣杰彭励任树勇
- 关键词：甘草酸检测试剂盒酶联免疫吸附法
- 小鼠骨髓来源巨噬细胞培养模型的建立及鉴定
- 2022年
- 目的建立小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)培养模型,并对BMDM进行细胞表面标志物及吞噬能力鉴定。方法采用32℃培养10 d和37℃培养3 d的方式培养L929细胞,检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)的浓度。获取小鼠骨髓细胞后,分别以M-CSF和两种条件培养的L929细胞上清进行诱导分化,通过光学显微镜对诱导分化后的BMDM进行形态学观察;流式细胞术检测CD11b阳性细胞株所占百分比,免疫荧光法观察诱导后巨噬细胞表面标志抗原CD11b和CD16的表达;对表达绿色荧光蛋白的大肠埃希菌进行吞噬试验鉴定BMDM的吞噬功能。结果32℃培养10 d的L929细胞上清中M-CSF的浓度显著高于37℃培养3 d(P<0.05)。3种诱导方式均可使小鼠骨髓源细胞分化成熟,经32℃培养10 d的L929细胞上清诱导分化后的BMDM生长状态最佳。流式细胞术检测显示巨噬细胞表面标志抗原CD11b阳性率为80.62%,免疫荧光检测显示诱导分化后的BMDM细胞表面有巨噬细胞标志性抗原CD11b和CD16的表达,且具有对表达绿色荧光蛋白的大肠埃希菌良好的吞噬能力。结论成功制备了小鼠BMDM,并优化了制备和鉴定的条件,为研究免疫细胞功能、病原微生物与巨噬细胞相互作用提供了理想的细胞模型制备方法。
- 马玲玲马红梅朱源鹤宋孚洋宋孚洋马臣杰曾瑾
- 关键词：表面标志物
- 环介导等温扩增技术及其在基因突变筛查中的应用研究被引量：1
- 2020年
- 基因突变筛查是疾病临床诊断和确定治疗方案的有效方法之一。环介导等温扩增(LAMP)是一种新颖的恒温核酸扩增技术,由于其在灵敏度,特异性和快速性等方面具有显著优势,现已被广泛应用于各种研究领域,如食品检测和疾病诊断等。但是,LAMP技术在基因突变筛查中的应用研究报道相对较少。因此,本文就LAMP技术及以LAMP为基础衍生的新方法在基因突变筛查的应用进行重点阐述,旨在为以此技术平台为基础的推广及应用提供新的思路。
- 王雯雯张小雨马臣杰马臣杰邓光存
