顾雨春
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：北京大学分子医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家教育部“985工程”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 二十二碳六烯酸干预低氧诱导大鼠肺动脉高压的研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨二十二碳六烯酸（DHA）对低氧性肺动脉高压的影响及机制.方法 实验SD大鼠分为常氧组、常氧DHA组、低氧组和低氧DHA组.肺动脉高压模型采用间断低氧法,大鼠肺小动脉形态学采用HE染色,肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）采用组织贴块法,细胞增殖及迁移分别采用噻唑蓝比色法和改良Boyden小室法.α-肌动蛋白、调宁蛋白和肌动蛋白相关蛋白（SM22α） mRNA水平采用RT-PCR法.结果 低氧组大鼠平均肺动脉压力[mPAP,（30.1±2.6） mmHg,1 mmHg=0.133 kPa],右心室肥厚指数[RV/（LV ＋S）,（40.4±4.2）％],肺小动脉管壁厚度与外径比值[WT％,（44.6±4.1）％]及管壁面积占血管总面积的百分比[WA％,（81.2±5.4）％]与常氧对照组相比均明显升高[mPAP：（18.4±1.2） mmHg；RV/（LV＋S）：（27.8±1.6）％；WT％：（17.7±3.3）％;WA％：（42.9±3.5）％,P＜0.05]；DHA干预的低氧组大鼠上述各指标[mPAP为（22.7±1.8）mmHg,RV/（LV ＋S）为（34.2±2.2）％,WT％为（21.6±4.1）％,WA％为（52.0±2.9）％]均低于低氧组（P＜0.05）；常氧DHA组,低氧DHA组与常氧组相比,上述指标无显著差别.在体外,DHA能显著抑制低氧诱导的PASMCs增殖、迁移（P＜0.05）.低氧时DHA能促进α-肌动蛋白,调宁蛋白和SM22α的mRNA表达.结论 DHA对低氧所致的肺动脉高压具有较好的抑制作用,其机制可能是通过抑制PASMCs增殖,迁移和表型转换而起作用.
- 陈蕊刘培晶严金川顾雨春
- 关键词：二十二碳六烯酸低氧
- 地高辛早期干预对低氧诱导肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响及其机制被引量：5
- 2014年
- 目的探讨地高辛早期干预对低氧诱导肺动脉高压（PAH）大鼠肺血管重构的影响及其机制。方法48只sD大鼠按随机数字表法随机均分为4组并分别进行如下处理：（1）常氧对照组，（2）常氧＋地高辛组，（3）低氧对照组，（4）低氧＋地高辛组。常氧干预大鼠正常氧浓度（21％）仓内饲养，低氧干预大鼠则置于低氧仓内，氧浓度控制（10．5±0．5）％范围内，每日间断低氧8h（8：00—16：00）；地高辛干预大鼠每次人仓前腹腔注射地高辛注射液1．0mg·kg^-1·d^-1，对照组大鼠每次人仓前腹腔注射等体积注射用水。21d后测定各组大鼠肺动脉平均压（mPAP），计算右室肥厚指数[RV／（LV＋S）]，测定管壁厚度占血管外径的百分比（WT％）和管壁面积占血管总面积的百分比（WA％）。肺动脉平滑肌细胞培养采用组织贴块法，细胞增殖及迁移检测分别采用噻唑蓝比色法和Transwell小室法。肺动脉平滑肌细胞收缩表型标志物仅肌动蛋白、调宁蛋白和肌动蛋白相关蛋白mRNA水平检测采用实时定量PCR法。肺动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶（MMPs）分泌水平检测采用Western印迹法。结果低氧对照组大鼠mPAP、RV／（LV＋S）、WT％、WA％均显著高于常氧对照组[（38．5±2．3）比（21．0±1．5）mmHg（1mmHg=0．133kPa）、（42．8±2．6）％比（26．7±1．5）％、（39．3±2．0）％比（17．5±3．3）％、（79．5±5．7）％比（45．7±4．9）％，均P〈0．05]。而低氧＋地高辛组大鼠上述指标均显著低于低氧对照组[（27．3±2．7）比（38．5±2．3）mmHg、（30．9±3．3）％比（42．8±2．6）％、（21．7±3．6）％比（39．3±2．0）％、（56．3±4．7）％比（79．5±5．7）％，均P〈0．05l。地高辛（100nmol／L）显著抑制低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖（吸光度值：0．575±0．030比0．747±0．039，P〈0．05），减少�
- 鄢高亮胡圣大王庆捷王栋王婧乔勇汤成春马根山顾雨春
- 关键词：地高辛肺性
- 二十二碳六烯酸对大鼠肺动脉平滑肌细胞大电导钙激活性钾通道的影响
- 2013年
- 目的:探讨二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)大电导钙激活性钾离子通道(BKCa)的作用。方法:采用酶解法获得单个活性良好的PASMC,PASMCs的BKCa电流变化采用全细胞膜片钳技术记录,PASMCs胞浆内游离钙离子浓度([Ca2+]i)采用激光共聚焦显微镜技术测定。结果:DHA 0.01μmol/L对BKCa无显著激活作用;0.1、1、10μmol/L DHA可显著激活BKCa。不同浓度的DHA(0、0.1、1、10μmol/L)在指令电压为+60 mV时,BKCa电流密度分别为(30.5±6.5)pA/pF、(59.4±5.8)pA/pF、(87.2±4.3)pA/pF和(117.3±7.1)pA/pF(P<0.01)。急性缺氧在指令电压为+60 mV时,BKCa电流密度从(32.7±8.5)pA/pF降低至(11.9±5.8)pA/pF(P<0.01)。DHA(10μmol/L)能明显逆转急性缺氧对BKCa的抑制作用(P<0.01),同时DHA触发PASMCs内[Ca2+]i的增加,最大增加速率为(71.9±4.1)%(P<0.01)。结论:DHA通过增加PASMCs[Ca2+]i激活BKCa,逆转急性缺氧对BKCa的抑制作用,具有舒张肺血管的作用。
- 陈蕊刘培晶严金川顾雨春
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞二十二碳六烯酸大电导钙激活钾通道
- 囊性纤维化转运调节因子氯离子通道功能障碍影响小鼠睾丸支持细胞细胞骨架被引量：2
- 2016年
- 目的:探究囊性纤维化转运调节因子(CFTR)氯离子通道功能障碍是否影响小鼠睾丸支持细胞骨架。方法:培养TM4小鼠睾丸支持细胞系,用1、5、10、20μmol/L的CFTR氯离子通道特异阻断剂CFTRinh-172分别干预细胞48 h。CCK-8试剂盒检测细胞毒性,细胞免疫荧光法检测TM4细胞骨架蛋白F-actin和Ac-tub的表达。实时荧光定量PCR(q PCR)检测细胞间连接相关蛋白N-钙粘蛋白、波形蛋白、粘着斑蛋白的表达。结果:20μmol/L浓度的CFTRinh-172对支持细胞有毒性。用不同浓度的CFTRinh-172处理TM4细胞48、72 h时,与细胞骨架密切相关的F-actin和Ac-tub的表达随着CFTRinh-172浓度增加而减少(P<0.05)。q PCR实验结果显示不同浓度CFTRinh-172对支持细胞N-钙粘蛋白、波形蛋白和粘着斑蛋白mRNA表达没有显著影响。结论:CFTR氯离子通道对维持正常睾丸支持细胞骨架有着重要作用。CFTR氯离子通道功能的下降以及细胞骨架蛋白表达下调有可能影响睾丸支持细胞的功能,进而影响睾丸的生精功能。
- 张洪亮张哲姜辉顾雨春洪锴唐文豪赵连明刘德风毛加明杨宇卓
- 关键词：F-ACTIN细胞骨架
- 囊性纤维化转运调节因子氯离子通道功能障碍影响小鼠睾丸支持细胞细胞骨架
- 张洪亮张哲姜辉顾雨春洪锴唐文豪赵连明刘德风毛加明杨宇卓
