STAT3基因RNA干扰在肿瘤研究中应用进展 2019年 信号转导子和转录激活因子(Signal transducer and activators of transcription,STATs)是研究干扰素诱导基因转录时首次鉴定出的一个胞浆蛋白家族,具有信号转导和转录调控的双重功能,可被不同的细胞因子受体激活。STATs在细胞的增殖、凋亡和侵袭中都起着极其重要的作用,其中以STAT3尤为活跃。RNA干扰(RNA Interference,RNAi)是转录后水平的基因沉默,具有很高的效率和特异性,可高效的调控特定基因表达。近年来,RNAi技术不仅成为研究特定基因功能的重要手段,也是肿瘤基因治疗研究的新热点。STAT3基因的RNA干扰已在多种肿瘤治疗研究中广泛应用,对其临床进展进行综述。 韩建秋关键词:RNA干扰 STAT3基因 肿瘤治疗 基因治疗 沉默STAT3基因对人卵巢癌化疗敏感性的影响 被引量:3 2010年 背景与目的:信号转导因子与转录激活因子3(STAT3)是近期研究较多的一种基因,在多种实体瘤如乳腺癌、胃癌和卵巢癌等中均有异常表达和活性增强。本研究旨在探讨STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对卵巢癌细胞SKOV3化疗敏感性的作用。方法:构建STAT3基因shRNA真核表达质粒,并转染卵巢癌SKOV3细胞。试验分为SKOV3、SKOV3NS和SKOV3siRNA3组,以RT-PCR及免疫蛋白印迹法分别检测各组STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平。细胞经20μmol/L顺铂(DDP)作用后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCS)检测细胞凋亡率。结果:MTT法检测肿瘤细胞的生长抑制率,SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞抑制率分别为0.46±0.13、0.44±0.11和0.71±0.12。与SKOV3组、SKOV3NS组相比,SKOV3siRNA组细胞抑制率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞凋亡率分别为18±4、17±3和35±4。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞凋亡率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞STAT3mRNA检测结果分别为0.50±0.08、0.48±0.07和0.31±0.09。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞STAT3mRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组细胞比较,STAT3mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3组、SKOV3NS组和SKOV3siRNA组细胞STAT3蛋白检测结果分别为0.54±0.09、0.56±0.08和0.32±0.09。与SKOV3组、SKOV3NS组比较,SKOV3siRNA组细胞STAT3蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而SKOV3NS组与SKOV3组比较,细胞STAT3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针对STAT3基因的shRNA真核表达载体能有效地抑制卵巢癌SKOV3细胞STAT3基因表达,增强其对化疗药物DD 王勇梅 吴维光 葛红雨 韩建秋关键词:卵巢肿瘤 RNA干扰 STAT3 化疗敏感性 紫杉醇联合顺铂新辅助治疗局部晚期宫颈癌对临床疗效分析 目的对局部晚期宫颈癌者应用紫杉醇和顺铂新辅助联合医治的效果进行分析。方法对本院2015年1月-2018年1月诊治局部性晚期宫颈癌66例患者临床资料加以分析,按照不同医治方案分成2组,将33例行顺铂+5-氟尿嘧啶新辅助化疗... 韩建秋关键词:晚期宫颈癌 顺铂 紫杉醇 新辅助化疗 lncRNA HOST2通过PI3K/Akt途径调控卵巢癌SKOV3细胞对顺铂的敏感性 被引量:4 2020年 目的探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)上皮性卵巢癌转录因子2(HOST2)表达对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,取对数生长期细胞分为空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组,其中阴性对照组和siRNA干扰组SKOV3细胞应用Lipofectamine 2000分别转染阴性对照siRNA和lncRNA HOST2-siRNA,空白对照组未进行转染。采用qPCR法检测各组细胞lncRNA HOST2的表达;Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白Akt、p-Akt(S473)、pAkt(S380)及Bcl-2的表达;CCK-8法检测经不同浓度(0、20、40、60、80、100μmol/L)顺铂作用后细胞的存活情况,并计算半抑制浓度(IC50);流式细胞术检测经20μmol/L顺铂作用后的细胞凋亡率。结果与空白对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞lncRNA HOST2表达及p-Akt(S473)、p-Akt(S380)和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均P<0.05);3组Akt蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组细胞存活率均随顺铂药物浓度的增加而降低,IC50分别为(59.58±5.97)、(51.42±5.22)和(39.75±5.31)μmol/L。siRNA干扰组细胞凋亡率(12.42%±1.46%)明显高于空白对照组(7.53%±1.25%)和阴性对照组(8.16%±1.31%)。结论下调lncRNA HOST2表达可增强人卵巢癌SKOV3细胞对顺铂的敏感性,其机制与抑制PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达有关。 韩建秋 郝丽惠 邢雅玲 张艳 吴维光关键词:顺铂 PI3K/AKT途径 阴式与腹腔镜子宫肌瘤剥除术临床疗效分析 2014年 目的:比较分析分析阴式与腹腔镜子宫肌瘤剥除术临床效果。方法以我院2011年12月~2012年12月所收治的49例行阴道子宫肌瘤剥除术的患者和77例行腹腔镜子宫肌瘤剥除术的患者为研究对象,回顾并对比分析两组患者的临床资料和术后效果。结果49例阴式组住院时间为(6.81±0.99)d,术中出血量为(50.35±14.61)mL,术后同期时间(36.58±7.78)h、手术时间(54.71±28.52)min以及术后体温是(37.21±0.36)℃。腹腔镜下子宫肌瘤剥除术岁对应的数据为(6.95±1.10)d,(69.94±18.79)mL、(39.22±6.99)h,(60.65±24.58)min、(37.12±0.34)℃。结论阴式子宫肌瘤剥除术具有创伤小、恢复快、设备简单、对患者腹壁的损伤小等优点,是一种比较理想的子宫肌瘤切除手术。 韩建秋关键词:腹腔镜 出血量 抑制survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂药物敏感性的影响(英文) 被引量:2 2011年 目的:探讨应用RNA i技术下调survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响。方法:构建survivin基因shRNA真核表达载体,转染人卵巢癌SKOV3细胞。定量PCR和Western blotting观察SKOV3细胞survivin mRNA和蛋白表达的改变;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性和药物敏感性;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:SKOV3-siRNA组细胞survivin mRNA及蛋白表达下降,同时细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。SKOV3-siRNA组细胞对顺铂的化学敏感性升高,顺铂的IC50值降低(P<0.05)。结论:下调survivin基因表达能够抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖能力,诱导细胞凋亡,增强细胞顺铂药物敏感性。因此,survivin基因可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点。 韩建秋 吴维光 王勇梅 葛红雨关键词:SURVIVIN RNA干扰 化学敏感性 卵巢癌 RNAi沉默STAT3基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1 2010年 目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。 韩建秋 吴维光 葛红雨 王勇梅关键词:卵巢癌 STAT3基因 增殖 凋亡 抑制Survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响 被引量:5 2015年 目的:探讨应用RNAi技术沉默Survivin基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:构建Survivin基因shRNA真核表达载体,转染人卵巢癌SKOV3细胞。RT-PCR及Western blot检测Survivin基因的表达,MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:siRNA实验组细胞Survivin蛋白及mRNA表达水平明显下降,细胞增殖能力显著降低,细胞凋亡率显著升高。结论:应用RNAi技术沉默Survivin基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞Survivin基因的表达,进而抑制肿瘤细胞的生长、增殖并诱导细胞凋亡。因此,Survivin基因可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点。 韩建秋 郝丽惠 赵丽冰 邢雅玲 王艳关键词:卵巢癌 SURVIVIN基因 增殖 凋亡 腹腔镜手术治疗卵巢子宫内膜异位囊肿疗效观察 被引量:1 2019年 目的探讨治疗卵巢子宫内膜异位囊肿患者采用腹腔镜手术的方法及临床疗效。方法 2016年4月至2018年4月选择本院收治的卵巢子宫内膜异位囊肿患者112例作为研究对象,随机分组各56例,对照组为开腹囊肿切除术治疗,观察组为腹腔镜手术治疗,观察两组手术时间、术中出血量及术后恢复情况分析。结果观察组手术时间、术中出血量、术后发热时间、住院时间均显著短于对照组(P<0.05);观察组术后卵巢子宫内膜异位囊肿复发率5.36%显著低于对照组17.86%(P<0.05)。结论针对卵巢子宫内膜异位囊肿患者采用腹腔镜囊肿切除术治疗可减少术中损害,利于加快术后恢复速度,值得推广应用。 韩建秋关键词:腹腔镜手术 卵巢子宫内膜异位囊肿 抑制STAT3基因表达对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响 被引量:2 2010年 目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制人宫颈癌HeLa细胞信号转导及转录活化因子3(STAT3)基因的表达,观察其对HeLa细胞定植和侵袭能力的影响。方法针对STAT3基因设计并合成编码小干扰RNA(siRNA)的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,从而构建针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒,用脂质体法将其转染入人宫颈癌HeLa细胞。利用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测STAT3 mRNA和蛋白表达水平;通过软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力。结果针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒成功转染人宫颈癌HeLa细胞;转染成功的HeLa细胞的STAT3基因mRNA及蛋白表达均下降;HeLa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少。结论针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力。 吴维光 陈亚琼 葛红雨 韩建秋 王勇梅关键词:宫颈癌 信号转导及转录活化因子3 RNA干扰