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陈蕾: 作品数：41 被引量：92H指数：6; 供职机构：四川农业大学更多>>; 发文基金：四川省科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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猪环曲病毒病原特点和流行病学被引量：5: 2013年; 猪环曲病毒在世界范围内广泛分布,猪群感染率高,在腹泻病例中检出率高,被认为是一种可能的猪腹泻病原。凸隆病毒的型间重组和抗原交叉反应,意味着猪环曲病毒存在人兽共患的风险。基于近年在我国部分地区因为仔猪腹泻导致了较大损失,本文介绍了猪环曲病毒发展历史,综述了该病毒基因组和蛋白特点、流行病学、实验室诊断等,以期为相关研究提供参考。; 陈蕾朱玲周远成郭万柱; 关键词：腹泻

猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用被引量：23: 2009年; 【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100～10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nPCR方法的符合率为94.3%(115/122),阳性和阴性符合率分别为86.4%(38/44)和98.7%(77/78),Kappa值为0.87>0.75【。结论】建立的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法能鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒,且特异性好、灵敏度高、与笔者先前建立的RT-nPCR方法对临床样本的检测结果具有高度的一致性。; 刘俊王琴范学政徐璐赵启祖黄伟汤波沙莎周远成陈蕾邹兴启; 关键词：猪瘟荧光定量PCR 兔化弱毒疫苗

猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列，针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条，以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模...; 刘业兵张磊宁宜宝陈蕾; 文献传递

猪细小病毒四川株的分离鉴定及其一步生长曲线: 2013年; 为了研究猪细小病毒(PPV)的增殖规律,利用PK-15细胞从流产胎儿的肝、肠系膜淋巴结和肾样品中分离到1株病毒,经PCR检测、蚀斑纯化、病毒理化试验、微量中和试验和血凝试验证实该分离株为猪细小病毒,命名为SC-L。针对PPV的VP1和NS1基因设计特异性引物,建立PPV的荧光定量PCR方法。以SC-L分离株感染PK-15细胞,感染后每隔4h分别收集感染细胞与上清液,利用荧光定量PCR方法对不同样品中的病毒DNA进行定量分析,绘制PPV SC-L的一步生长曲线。PPV SC-L株感染PK-15细胞,细胞外病毒含量在第4～20小时缓慢增加,20h后呈对数增长,第56小时达到最大值,随后病毒含量迅速下降,在第68小时时趋于稳定;在细胞内感染4h检测到微量的病毒粒子,第4～24小时细胞内病毒缓慢增长,24h细胞内病毒粒子呈对数增长,第44小时达到最大量,随后胞内病毒粒子逐渐降低。表明PPV在细胞内增殖到一定数量后逐步释放到细胞外,且细胞外病毒最大量高于细胞内。; 江一帆吴云飞朱玲徐志文阳爱国廖珊陈蕾黄仆郭万柱; 关键词：猪细小病毒实时荧光定量PCR

猪细小病毒PK-15细胞适应株的培育及增殖特性被引量：8: 2013年; 为了研究猪细小病毒不同接毒方式的增殖规律及在不同细胞的病毒含量差异。本实验利用PK-15细胞对猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)分离株进行适应性培养。针对PPV的NS1基因设计特异性引物,建立实时荧光定量PCR方法。利用该方法检测PPV分离株同步和分步接毒的病毒含量,绘制一步生长曲线;同时检测PPV在HeLa、MDBK、PK-15、ST、F81、BHK-21和Marc-145细胞上的增殖特性。结果显示,PPV分离株盲传至12代产生CPE,继续传代培养10代仍能产生稳定的细胞病变,成功培育出PK-15细胞适应株。一步生长曲线显示,分步接毒的病毒含量高于同步接毒,而增殖周期短于同步接毒;PPV在不同细胞的增殖结果显示,各细胞开始出现CPE的时间依次为PK-15、ST、HeLa和MDBK,病毒含量高低依次是ST、PK-15、MDBK和HeLa,而不能在F81、BHK-21和Marc-145细胞上增殖。本实验首次利用荧光定量PCR方法成功分析PPV不同接毒方式的增殖规律及不同细胞的增殖特性,为PPV基础研究和疫苗生产提供资料。; 吴云飞朱玲徐志文付梦瑾陈蕾阳爱国郭万柱; 关键词：猪细小病毒实时荧光定量PCR

PRRSV体外感染Marc-145细胞对NF-κB p65/p50转录时相及核易位的影响: 2013年; 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染对细胞核转录因子-κB(NF-κB,p65/p50)mRNA转录时相及核易位的影响,探讨PRRSV感染导致的免疫抑制与NF-κB的活化异常是否有一定的相关性,运用实时荧光定量PCR技术对PRRSV感染Marc-145细胞不同时期NF-κB p50、p65mRNA的转录水平变化进行定量分析,并提取不同感染时期Marc-145细胞核蛋白,利用免疫印迹法检测细胞核内具有活性的p50、p65水平变化。荧光定量结果表明,Marc-145细胞感染PRRSV后第8～12小时,p50、p65转录水平急剧下调,第12～120小时p50、p65mRNA含量一直维持在较低水平,与接毒前及对照组同时期的转录水平相比,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。免疫印迹结果表明,Marc-145细胞感染PRRSV后第12～96小时,细胞核内均未检测到p50的表达;感染后第12小时,细胞核内p65表达下调,第48～96小时未检测到p65的表达。可见,PRRSV体外感染Marc-145细胞能够抑制NF-κB p65/p50mRNA的转录及核易位。以上结果支持PRRSV感染早期无力的先天性免疫应答可能与NF-κB活化水平的低下有关的观点,为进一步研究PRRS的感染机制及NF-κB的功能提供新的思路和依据。; 王潇娣朱玲周远成陈蕾李碧蔡雨函徐志文; 关键词：转录时相

猪A群轮状病毒和C群轮状病毒以及猪星状病毒多重RT-PCR同时检测方法的建立及应用被引量：11: 2014年; 为建立同时快速检测猪A群轮状病毒(GARV)、猪C群轮状病毒(GCRV)和猪星状病毒(AstV)的三重RT-PCR检测方法,根据GenBank中公布的序列进行病毒基因区同源性分析,然后使用Primer Premier 5.0软件分别设计了GARV、GCRV的VP6基因和AstV的ORF2基因特异性引物,预期扩增片段的大小分别为229、166和410bp。在这3种病毒单项RT-PCR技术的基础上,建立了GARV、GCRV和AstV的多重RT-PCR检测方法,并用该方法检测30份四川省仔猪腹泻粪样。结果显示,GARV、GCRV、AstV的阳性检出率分别为26.7%、13.3%、16.7%,本方法与这3种病毒的单项RT-PCR检测结果的符合率分别为100%、100%、83%,整体符合率达94.3%,特异性为100%。结果表明,本试验建立的多重RTPCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于GARV、GCRV和AstV的同时检测。; 杨文宇周远成韩燕陈蕾廖春燕付梦瑾季洪伟蔡雨涵朱玲徐志文郭万柱; 关键词：多重RT-PCR

猪瘟病毒RT-LAMP快速诊断方法的建立: 针对CSFV的保守区设计并筛选出一套RT-LAMP引物,以石门株为标准毒株,采用梯度稀释法对各反应要素进行优化,最终确定CSFV RT-LAMP的反应体系为:4mM镁离子浓度,0.8M甜菜碱,1.4mM dNTP mix...; 陈蕾范学政王琴徐璐赵启祖; 关键词：CSFV RT-LAMP; 文献传递

猪嵴病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：9: 2013年; 根据GenBank中猪嵴病毒(porcine kobuvirus)3D-RNA聚合酶基因序列设计并合成了1对特异性引物,建立了一种猪嵴病毒RT-PCR检测方法。反应产物测序结果与GenBank中猪嵴病毒SH-W-CHN/2010/China株比较,基因序列同源性为93%。利用该方法对猪蓝耳病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、链球菌、猪巴氏杆菌和大肠杆菌等病原核酸进行扩增,均无条带出现,表明该方法具有较高的特异性;敏感性试验表明,该方法最低能检测到的病毒核酸含量为1pg。利用所建立的RT-PCR方法检测采集自我国四川地区123份临床样品,结果阳性率为59.3%,表明猪嵴病毒在四川地区猪群中流行率较高。; 李淞朱玲周远成吴云飞陈蕾徐志文郭万柱; 关键词：RT-PCR

一种便携式活体猪只头型测量器: 本实用新型公开一种便携式活体猪只头型测量器，包括X型支架、延长触杆和手柄；X型支架包括两支杆，两支杆中段转动连接，支杆的一端安装有第一触头，两第一触头相对设置；延长触杆设有两个，两延长触杆分别可拆卸连接在两支杆的靠近第一...; 甘麦邻沈林園朱砺陈蕾张顺华赵叶牛丽莉王艳

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