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百合MDHAR基因的克隆与表达分析被引量：7: 2010年; 抗坏血酸（ascorbic acid,AsA）作为植物细胞内重要的自由基清除剂,是通过参与一系列的氧化还原反应而发挥抗氧化剂的功能。单脱氢抗坏血酸还原酶（monodehydroascorbate reductase,MDHAR）在抗坏血酸-谷胱甘肽循环中，; 陈莉辛海波李晓艳李晓昕义鸣放; 关键词：铁炮百合克隆

百合热激转录因子基因LlHSF1的克隆与表达分析被引量：8: 2012年; 以铁炮百合(Lilium longiforum)‘白天堂’的组培苗叶片为试材,通过RACE方法得到了一个热激转录因子(heat shock transcription factor,HSF)基因LlHSF1的cDNA全长序列。该序列全长1068bp,推断其含有一个780bp的开放阅读框(ORF),编码260个氨基酸,推导的蛋白质分子量为30.123kD。对推定的氨基酸序列与其它已知物种HSF进行比对发现,该基因有热激转录因子所具备的典型结构域和调控元件,据此推断,克隆到的基因是一个新的热激转录因子成员,命名为LlHSF1。荧光定量PCR分析结果表明:常温下该基因在百合根、鳞茎、叶中都有表达,但在叶片中表达量较高;实时荧光定量PCR分析结果表明,42℃处理1～12h,叶中该基因表达量增加。; 易瑾罗弦曹兴陈莉辛海波李晓昕陈进义鸣放; 关键词：百合铁炮百合热激转录因子荧光定量RT-PCR

铁炮百合热激转录因子基因克隆与表达分析被引量：4: 2010年; 以铁炮百合(Lilium longiforum)‘白天堂’为试材,通过RACE方法得到了一个热激转录因子(Heat shock transcription factor,HSF)A家族基因全长序列。该基因包含一个编码350个氨基酸的开放阅读框。对推定的氨基酸序列进行聚类分析,与已知的HSFA2同源性较高,据此推断,克隆到的基因是一个新的HSFA2成员。经过与功能明确的番茄和拟南芥HSFA2序列比对分析,该基因有热激转录因子所具备的典型结构域和调控元件。RT-PCR分析该基因时空表达模式的结果表明:37℃条件下处理1h,根、鳞茎、叶中能检测到其表达,叶片37℃处理0.5～12h均可检测到表达。; 辛海波陈莉李晓燕何秀丽义鸣放; 关键词：百合热激转录因子热激耐热性

唐菖蒲2种主要病毒的多重RT-PCR检测被引量：4: 2011年; 根据黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物对,运用单重RT-PCR检测到病毒并筛选出适合多重RT-PCR的引物对。以唐菖蒲18S rRNA为内参照,建立同时检测CMV和TMV的多重RT-PCR方法。此方法可从带病样品中扩增出CMV(629bp)和TMV(423bp)2条特异片段。测序结果表明:CMV扩增产物与其他植物分离物核苷酸的同源性为93%～97%,TMV扩增产物与其他分离物核苷酸的同源性可达99%。; 胡小燕陈莉辛海波连青龙义鸣放; 关键词：唐菖蒲多重RT-PCR 黄瓜花叶病毒烟草花叶病毒

百合鳞片薄层细胞培养高效再生体系的建立被引量：8: 2009年; 为了建立适宜百合遗传转化的受体系统,以铁炮百合品种白天堂无菌苗的叶片和鳞片为外植体,薄层切割后接种于添加不同植物激素的培养基上,观察其植株再生情况,并对其建立的再生体系的遗传转化前景进行了分析比较。结果表明,叶片薄层细胞几乎没有再生能力;2,4-D和Picloram均可诱导横向薄层鳞片细胞直接产生鳞茎芽,最适的培养基是MS+2,4-D 0.002 mg/L,在30 d内就可直接诱导出鳞茎芽,再生率达到100%,平均出芽数为2.38;MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.5 mg/L可以诱导横向薄层鳞片细胞产生愈伤。综合考虑,百合鳞片薄层培养以MS+2,4-D 0.002 mg/L诱导的直接再生体系为最佳的再生体系。; 李晓艳陈莉辛海波义鸣放; 关键词：百合鳞片

唐菖蒲GhAOS基因的克隆与表达被引量：5: 2011年; 丙二烯氧合酶(AOS)是茉莉酸(JA)生物合成途径中的关键酶,为深入研究AOS基因在唐菖蒲茉莉酸生物合成途径中的作用及唐菖蒲球茎膨大的分子机制,以唐菖蒲品种‘Rose Supreme’的球茎为试材,采用RT-PCR和RACE技术,克隆到了一个GhAOS的cDNA序列,序列内部含有一个1533bp的开放阅读框(ORF),编码510个氨基酸,推导的蛋白质分子质量为56.53kD。组织特异性RT-PCR表达分析表明:GhAOS基因在唐菖蒲叶、花、根、匍匐茎、新球茎和籽球上都表达,而在叶和匍匐茎中表达量较高;经过不同浓度梯度的水杨酸(SA)0、0.1、0.5、1.0、2.0mmol/L处理后,在唐菖蒲球茎中GhAOS基因的表达水平随着浓度的升高而降低。结果表明,GhAOS是一个新的AOS基因,SA抑制了该基因的表达,初步验证了SA与JA在信号途径中相互拮抗的作用。; 连青龙韩昊君辛海波陈莉胡小燕何秀丽义鸣放; 关键词：唐菖蒲茉莉酸克隆

百合APX基因的克隆及转LlAPX提高拟南芥耐盐性被引量：13: 2010年; 从铁炮百合‘白天堂’（Lilium longiforum ‘White Heaven’）组培苗叶片中克隆得到一个抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）的cDNA序列,全长1074bp,推断其编码251个氨基酸。系统进化树分析表明APX在进化过程中保守性很高。通过构建过表达载体,转化拟南芥,其APX酶活性提高了4.7-7.8倍,AsA含量提高了1.5~2.3倍,其种子耐盐性提高。; 陈莉辛海波孙向荣尹慧李晓昕义鸣放; 关键词：铁炮百合 APX 克隆耐盐性

百合MDHAR基因的克隆与表达分析: 采用RACE技术,从铁炮百合‘白天堂’(‘white heaven’)组培苗叶片中克隆得到一个单脱氢抗坏血酸还原酶基因(MDHAR)的cDNA序列,全长1502bp,推断其编码434个氨基酸。序列分析表明该基因与其他植物...; 陈莉辛海波李晓艳李晓昕义鸣放; 关键词：铁炮百合克隆

百合叶片总RNA提取方法比较及优化被引量：41: 2008年; 为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。; 尹慧陈莉李晓艳陈秋明义鸣放; 关键词：百合叶片 RNA提取多糖 RT-PCR

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陈莉