陈祖欢
- 作品数：18 被引量：66H指数：5
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 钩端螺旋体DNA疫苗pcDL41的构建、体外表达及免疫保护效果
- 钩端螺旋体(简称钩体)病是一种常见的人兽共患病,严重威胁人类健康和畜牧业生产。在世界各地均有分布,我国大部分地区均有分布,尤其是长江流域的某些省份;近年来,北方许多省份不断有钩体病流行的报道。但目前尚缺乏一种有效的疫苗,...
- 寇志华张平武孙树汉陈祖欢
- 文献传递
- 56609株钩体lipL32基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的初步表达
- 2003年
- 寇志华孙树汉施柯郭瀛军陈祖欢
- 关键词：钩端螺旋体病聚合酶链反应大肠杆菌基因克隆
- SARS相关冠状病毒S1融合蛋白的原核表达与纯化被引量：6
- 2003年
- 目的 :克隆严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 (SARS- Co V) S1蛋白编码 DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 5 T/ S1,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白。方法 :采用 PCR方法扩增合成 S1片段 ,并克隆入载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把S1序列定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T的多克隆位点 ,转化大肠杆菌 K80 2 ,将纯化后的融合蛋白用于 SARS- Co V抗体阳性血清的检测。结果 :GST- S1融合蛋白以可溶形式表达 ,纯化后的蛋白用 EL ISA法检测 ,结果与对照相符。结论 :成功诱导原核表达并纯化出融合蛋白 S1,为将其应用于 SARS- Co
- 张术王开宇郭瀛军黄力陈祖欢朱维佳孙树汉
- 关键词：严重急性呼吸综合征相关冠状病毒原核表达SARS
- SARS相关冠状病毒S2基因的克隆及其DNA疫苗的免疫效果被引量：3
- 2003年
- 目的 :构建抗原基因为 SARS相关冠状病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS- Co V) S2基因的DNA疫苗 ,将其接种小鼠后观察病毒特异性抗体产生情况。方法 :将合成的 S2基因片段克隆至真核表达载体 ,随之将质粒进行小鼠肌内接种免疫 ,定期检测血清中抗 SARS- Co V的病毒特异性抗体水平。结果 :疫苗接种后第 2周就能检测出病毒特异性抗体 ,随着时间的延续 ,抗体水平逐步升高 ,而空质粒对照组未检测出明显的特异性抗体。 结论 :以 S2为抗原基因的 DNA疫苗能诱导
- 郭瀛军黄力王开宇张术陈祖欢朱维佳陈则孙树汉
- 关键词：冠状病毒S2基因DNA疫苗免疫效果严重急性呼吸综合征
- SARS相关冠状病毒M基因片段的克隆及其DNA疫苗诱导的体液免疫被引量：10
- 2003年
- 目的 :构建含有 SARS相关冠状病毒 (severe acute respiratory syndrom e coronavirus,SARS- Co V) M基因片段的核酸疫苗 ,观察其免疫小鼠后病毒特异性抗体产生情况。方法 :将合成的 M基因片段克隆到核酸疫苗真核表达载体 p VAX1中 ,免疫小鼠后 ,用 SARS- Co V抗体 EL ISA检测试剂盒定期检测免疫小鼠血清中抗 SARS- Co V的病毒特异性抗体水平。 结果 :构建了重组核酸疫苗质粒 p VCo- M,免疫小鼠后可诱导产生出病毒特异性抗体。 结论 :以 M为抗原基因的 DNA疫苗能诱导SARS病毒特异性抗体 ,为进一步改进或探索同类 DNA疫苗提供有益启示。
- 黄力郭瀛军张术王开宇陈祖欢朱维佳孙树汉
- 关键词：克隆DNA疫苗体液免疫严重急性呼吸综合征
- 一种口蹄疫DNA疫苗
- 本发明涉及医药技术领域,是一种口蹄疫DNA疫苗。它是采用猪特有的O型口蹄疫的合成表位基因SG为抗原基因,以pVAX1为表达载体构建的。SG序列为:ATGGTCACCA GTGACTCATT CGGACGTTGCGGTGG...
- 孙树汉张洪英郭瀛军陈祖欢
- 文献传递
- 钩端螺旋体膜表面蛋白LipL41基因的克隆、序列分析及表达被引量：2
- 2002年
- 目的：进一步分析钩端螺旋体LipL－41的免疫原性。方法：通过PCR的方法，以我国特有的钩端螺旋体流感伤寒群临海型lin6株（56609）的 DNA为模板，扩增目的基因 LipL41，克隆至 PcDNA3载体上，以自动测序仪测序后进行序列分析，然后克隆至原核表达载体pGEX－5T进行原核表达，Western印迹分析其免疫原性。珐票：获得长 1068 hp的片段，DNA序列分析表明该菌株的LipL41基因与文献报道具有很高的同源性（95．0％～99．4％），在大肠杆菌中获得了表达，并与抗钩端螺旋体血清反应。结论：该抗原为致病性钩端螺旋体所具有的保守性抗原成分，可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用。
- 寇志华孙树汉郭嬴军陈祖欢施柯胡振林张洪英周凤娟
- 关键词：免疫原性钩端螺旋体外膜蛋白原核表达基因克隆
- 一种口蹄疫DNA疫苗
- 本发明涉及医药技术领域，是一种口蹄疫DNA疫苗。它是采用猪特有的O型口蹄疫的合成表位基因SG为抗原基因，以pVAX1为表达载体构建的。SG序列为：;ATGGTCACCA GTGACTCATT CGGACGTTGC;GGT...
- 孙树汉张洪英郭瀛军陈祖欢
- 文献传递
- 口蹄疫病毒融合表位基因在pET原核系统的高表达及产物的纯化被引量：2
- 2003年
- 构建口蹄疫融合表位基因 - SG表达载体 p ET- SG,转化重组子与 K80 2 ,新鲜过夜菌以 2 %接种量接种 2 YT培养液 ,37℃培养 2 h后用 IPTG诱导 ,每隔 1h取样 ,共 8h。根据 SDS- PAGE结果 ,口蹄疫融合表位基因 - SG在 p ET原核表达系统可获得较高表达 ,用 IPTG诱导 4 h蛋白表达量最高 ,用 Ni+柱亲和层析可得到较纯蛋白。
- 陈祖欢张洪英郭瀛军林懿朱维佳孙树汉
- 关键词：口蹄疫病毒基因表达纯化
- 猪囊尾蚴抗原cC1 DNA疫苗和蛋白质疫苗联合诱导小鼠免疫应答被引量：20
- 2004年
- 目的 :观察 c C1 DNA疫苗和蛋白质疫苗联合免疫对诱导 BAL B/ c小鼠免疫应答的影响。 方法 :雌性 BAL B/ c小鼠随机分为 4组 :A组 (DNA疫苗组 ) ,质粒 DNA以 1 0 d间隔免疫 3次 ;B组 (联合免疫组 ) ,质粒 DNA以 1 0 d间隔免疫 2次后以 GST- c C1融合蛋白加强免疫 1次 ;C组 (蛋白质疫苗组 ) ,分别在第 0、3周免疫接种融合蛋白 ;D组 (pc DNA3对照组 ) ,以 1 0d间隔 ,3次免疫接种质粒 pc DNA3。 EL ISA法检测血清样品中的特异性抗体水平以及实验小鼠脾脏淋巴细胞分泌 IFN- γ和IL- 4水平 ,以 MTT法行脾脏淋巴细胞增殖实验。 结果 :C组可诱导相对较强的小鼠免疫应答 ,其特异性 Ig G和 Ig G1以及脾脏淋巴细胞分泌 IL- 4水平均高于其他各组 (P<0 .0 5 ) ,免疫的类型以 Th2应答为主。B组诱导的特异性抗体水平和淋巴细胞分泌细胞因子水平均明显高于 A组 (P<0 .0 5 ) ,B组和 A组诱导的免疫应答类型均以 Th1应答为主。结论 :以 DNA prim ing-protein boost的策略可有效诱导较 DNA疫苗单独使用更高的特异性抗体应答 ,且以
- 吴丹王庆敏陈蕊雯朱维佳陈祖欢孙树汉
- 关键词：猪囊尾蚴抗原DNA疫苗蛋白质疫苗小鼠免疫应答
