陈志明
- 作品数:4 被引量:17H指数:3
- 供职机构:暨南大学医学院生理学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 诱导人脐带MSCs分化为胰岛样细胞团的促成熟方案及机制被引量:4
- 2013年
- 目的:通过各种生物化学制剂的不同组合在体外诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向胰岛样细胞团(ILCs)分化,筛选出能表达激素原转化酶(PC)1和PC2的促成熟方案。方法:用胶原酶Ⅱ消化、过滤离心和不完全消化传代的方法从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞术、RT-PCR和免疫细胞荧光技术检测其干细胞标志物。选用A、B、C 3种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化:方案A为含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10μg/L表皮生长因子(EGF)、10 mg/L银杏提取液(GBE)及2%胎牛血清(FCS)的高糖培养基IM-DM;在方案A基础上加入10μg/L尼克酰胺为方案B;在方案B基础上加入10μg/L肝细胞生长因子(HGF)为方案C。在hUC-MSCs诱导前后,通过倒置显微镜观察其形态变化,采用RT-PCR、qPCR和Western blotting检测胰岛相关mRNA和蛋白,特别是PC1和PC2的表达情况。结果:(1)细胞形态、表面相关抗原、干细胞特异基因的表达等情况表明hUC-MSCs可以从人脐带中被成功地分离和纯化;hUC-MSCs普遍表达nestin,轻微表达Isl1。(2)RT-PCR检测发现方案A诱导的ILCs有Glut-2和MafA mRNA表达,方案B诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1和PC2mRNA表达,方案C诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1、PC2、Ngn3、Pdx1、PC1和胰岛素mRNA表达,提示A、B和C3种方案诱导的细胞有逐渐成熟的趋势。qPCR检测也证实了PC1 mRNA仅在方案C中有表达,PC2 mRNA在方案B和方案C中均有表达,但方案C中PC2 mRNA的表达量显著高于方案B(P<0.01);Western blotting结果也表明PC1蛋白只在方案C中有表达;PC2酶原(ProPC2)与PC2在方案B和方案C中都有表达,且它们在方案C中的表达量均显著高于方案B(P<0.01)。结论:(1)hUC-MSCs具有向胰岛祖细胞或胰岛细胞分化的潜能;(2)方案C中尼克酰胺和HGF可促进hUC-MSCs向ILCs分化,使ILCs表达PC1并上调PC2;相对于方案A和B,方案C是一种促成熟方案。
- 苏仲春陈家劲王圳陈志明王跃春
- 关键词:脐带间充质干细胞胰岛样细胞团
- 丙戊酸钠对人肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及其机制被引量:4
- 2012年
- 目的探讨丙戊酸钠对人肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法及克隆形成抑制实验观察丙戊酸钠对肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞早期凋亡水平,Western blotting检测细胞抗凋亡蛋白Bcl-xl,Bcl-2,Mcl-1及Caspase-9,Caspase-3表达的改变。结果不同浓度的丙戊酸钠作用于肺癌SPC-A1细胞48 h,均能显著抑制细胞增殖,SPC-A1细胞的IC50为1.8 mmol/L;丙戊酸钠能显著抑制SPC-A1细胞克隆形成,且导致显著的细胞凋亡,8 mmol/L的丙戊酸钠作用细胞48 h,细胞早期凋亡率达60.44%,细胞抗凋亡蛋白Bcl-xl,Bcl-2,Mcl-1表达减少,Caspase-9,Caspase-3蛋白酶切活化。结论丙戊酸钠通过诱导细胞凋亡,显著抑制肺癌SPC-A1细胞的增殖。
- 黄志宏陈庆马刘红陈志明陈文朴覃莉蒋建伟
- 关键词:丙戊酸钠凋亡肺癌SPC-A1细胞
- 绞股蓝总皂苷对实验性高血压大鼠的降压作用的研究被引量:9
- 2012年
- 目的研究绞股蓝总皂苷(Gypenosides,GPs)对实验性高血压大鼠和正常大鼠的血压的影响。方法大鼠随机分为空白对照组、GPs(360 mg/kg)对照组、高血压模型组、GPs干预组(180,360,720 mg/kg)。除了空白对照组和GPs对照组外,其余各组喂养高脂高糖饲料并交替饮用糖盐水(糖4%、盐1%)和果糖水(6%);除了空白对照组外,其余各组给予相应剂量的药物灌胃。各组按上述因素处理8周,颈动脉插管,BL-420F生物机能系统测量动物血压。结果高糖高脂饮食能明显诱导大鼠血压的增高,与对照组相比,动物收缩压增高(35.1±10.7)%,舒张压增高(18.1±8.6)%;GPs干预后,呈剂量依赖性的抑制高糖高脂诱导的大鼠的血压升高;GPs急性给药对于高血压大鼠的降血压作用也显著强于对正常大鼠血压的影响。结论绞股蓝总皂苷可预防高糖高脂诱导的大鼠血压的增高,同时也具有较为安全的治疗高血压的疗效。
- 梁小辉李伟健陈文朴杨丽丽陈志明陈丽新翁文朱林燕
- 关键词:绞股蓝总皂苷高血压
- 胰岛β细胞分泌的蛋白质组学
- 2011年
- 胰岛β细胞分泌蛋白质组是指胰岛β细胞分泌出胞的所有蛋白质。其主要涉及β细胞分泌颗粒中相关蛋白质的鉴定和分析,藉此阐明胰岛素分泌机制并更好地防治糖尿病。本文主要介绍胰岛素分泌的两条途径,概括从胰岛β细胞分泌颗粒中新发现的重要蛋白质,从而提出胰岛分泌蛋白质组研究领域目前存在的急需解决的问题和自己的看法。
- 王跃春黄晓恩苏仲春陈志明张诗颖
- 关键词:胰岛Β细胞分泌蛋白蛋白质组学