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陈德风: 作品数：41 被引量：29H指数：3; 供职机构：南开大学生命科学学院分子生物学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市21世纪青年科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重组体的构建: 1997年; 本文将聚ADP核糖聚合酶基因1．4kb部分序列反向插入真核表达载体pMAMneo和pSMG中，同时12位密码子突变的活化ras癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组体pMAMneo－Cl．4－T24，pMAMneo－Cl.4－arT24，及pSMG－Cl．4-T24，上述质粒的构建成功为研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型．; 杨其伟张学陈雅文董元舒陈德风; 关键词：癌基因细胞恶变

PARP酶抑制剂未引起整合的外源LacZ基因的丢失被引量：2: 1997年; 使用聚ADP核糖聚合酶（PARP）NAD位点抑制剂苯甲酞胺（BA）研究了降低PARP酶活性对外源LacZ基因整合稳定性的影响．利用DNA体外重组技术将LacZ基因全序列插入到真核表达载体pSV2neo的HindⅢ位点，构建了一个具有真核细胞neo基因筛选标记和LacZ基因的真核表达重组体pSV2neo-beta-gal．将该重组体导入HeLa细胞，经G418筛选获得了能稳定表达β-半乳糖苷酶的HeLa转化细胞系HeLa-beta-gal．使用PARP酶抑制剂苯甲酸胺处理细胞5周，随后进行细胞基因组Southern杂交分析与细胞内容物β-半乳苷酶的活性检测．结果表明，经BA处理的HeLa-beta-gal细胞β-半乳糖苷酶的活性及杂交带密度与未经BA处理的HeLa-beta-gal细胞相比未有明显区别．结合以前的结果可以认为，PARP酶抑制剂BA并不能导致所有外源基因的丢失，且使用PARP酶抑制剂BA引起外源基因的丢失具有选择性．; 杨其伟陈雅文张学陈德风张自立; 关键词：LACZ基因 PARP抑制剂

针对点突变癌基因转录物的核酶细胞内性质的研究被引量：2: 1996年; 前文［１］已证实在体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验接近生理环境的条件下，本室设计、合成并克隆到的核酶能够高效选择性的定点切割Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转录物。在此基础上，为阐明该核酶在体内（ｉｎｖｉｖｏ）的生理活性，本文又进一步把核酶基因片段克隆在真核表达质粒ｐＳＭＧ上，并将重组质粒以磷酸钙沉淀法转染由Ｔ２４－ｒａｓ基因诱导的转化细胞系。在细胞和分子水平上检测了核酶在真核细胞内的生物学活性：表现为各恶性转化细胞系的形态特征逆转，生长速度减慢，并呈现出重叠生长减弱恢复接触抑制的趋势，细胞凝集行为接近正常、软琼脂集落形成能力下降；同时，引物延伸实验结果也表明：在体内实验条件下，核酶能够特异性切割点突变Ｔ２４－ｒａｓ癌基因转录物，抑制癌变细胞的恶性行为，使其得到一定程度的逆转。; 刘戈陈雅文赵西林董元舒陈德风; 关键词：核酶体内活性癌基因转录物

细胞信号和基因表达光学图像会议简介: 1996年; 1996年3月15—17日在美国长岛,笔者出席了由美国冷泉港实验室主办的细胞信号和基因表达光学图像国际专题会议。与会者包括美、英、法、日、德等主要国家近200名科学家。大会交流的学术论文有百余篇,同时还有美、日等国的厂家展示先进的光学图像分析系统仪器。我们提交大会论文的题目是:"The inhibitor of poly(ADP-Ribose)polymerase does notdelete the exogenous LacZ gene from cell chromosomes",已收集于大会论文集中,在交流中受到一定的好评。; 陈德风; 关键词：细胞信号基因光学图像

限制性核酸内切酶PvuⅡ识别序列外甲基化抑制其酶切活性的分子机理研究: 1997年; DNA甲基化是DNA分子上重要的碱基修饰方法之一,它可以影响核酸的结构及其与蛋白质的相互作用,由此影响基因的表达,关于甲基化与限制性核酸内切酶之间的关系,以往的研究表明:限制性核酸内切酶识别序列内DNA甲基化可特异性地抑制该酶的酶切活性。; 陈德风孙梅刘英苗史国利陈雅文; 关键词：甲基化核酸内切酶

利用反义RNA探索外源基因丢失的分子机理: 1998年; 利用反义RNA技术研究了调控PARP酶基因的表达对外源基因整合稳定性的影响。将PARP基因cDNA的部分序列反向插入到真核表达载体pSMG中，将重组质粒分别导入携带有外源基因的细胞中，地塞米松诱导反义PARP基因的表达后，进行Southern杂交检测。结果表明，外源基因仍保留在基因组中，这意味着外源基因的丢失并不是由于单一PARP酶活性降低所致。; 杨其伟赵立青董元舒陈雅文陈德风; 关键词：反义RNA 基因丢失基因

逆转录病毒载体设计对ANTI-RAS核酶基因转移效率的影响被引量：1: 1997年; 将anti-ras核酶基因R8克隆于不同的逆转录病毒载体，并导入逆转录病毒包装细胞系PA317，得到具一次感染性的缺失性病毒，通过测定病毒滴度选择R8基因的高效重组逆转录病毒载体．; 赵立青张丽陈雅文史国利游环宇陈德风; 关键词：逆转录病毒载体核酶基因转移

反义PARP基因真核表达重组体的构建及其HeLa转化细胞系的建立: 1998年; 利用DNA体外重组技术将PARP基因cDNA部分序列反向克隆到真核表达载体pMAMneo上，构建成重组质粒pMAMneo－C1．4和pMAMneo－C0．3．将重组质粒pMAM－neo－C1．4转染HeLa细胞，经G418筛选，建成细胞系HeLa－C1．4－neo，Southern杂交结果表明，外源PARP基因cDNA部分序列已稳定整合到受体细胞基因组中，该细胞系的建立为研究聚ADP核糖基化作用在细胞内的功能打下了基础．; 杨其伟史国利陈雅文刘丛陈德风; 关键词：DNA转染真核表达

重组腺病毒介导HSV-TK基因对胶质瘤细胞的生长抑制: 1999年; 本文构建了带有HSV-TK基因的腺病毒包装质粒pACCMVTK,并获得重组腺病毒AdCMVTK,用其感染胶质母细胞瘤细胞系TJ905,研究了HSV-TK/GCV系统对该细胞系的生长影响。结果发现该系统对胶质母细胞瘤细胞系TJ905生长有明显的抑制作用,以100MOI(重复感染率)的病毒剂量感染细胞,GCV半数抑制浓度IC_(50)仅为5μmol,同时发现HSV-TK/GCV系统对TJ905细胞系有明显的旁观效应。表明该系统有治疗胶质瘤的应用前景。; 史国利房欣王金环冯宇新罗勇陈德风; 关键词：重组腺病毒 HSV-TK基因胶质母细胞瘤抑瘤作用

限制酶识别序列外DNA甲基化生物功能探索被引量：1: 1996年; 限制酶识别序列外ＤＮＡ甲基化生物功能探索陈雅文，孙梅，刘英苗，陈德风（南开大学分子生物学研究所，天津３０００７１）Ａｂｓｔｒａｃｔ．Ｉｎ１９９１，ｗｅｆｏｕｎｄａｎｄｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈａｔｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅＰｖｕⅡｃｌ...; 陈雅文孙梅刘英苗陈德风; 关键词：DNA 限制酶甲基化