陈学华
- 作品数：9 被引量：78H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝再生增强因子对外原性抗原引起机体免疫应答影响的研究被引量：8
- 2007年
- 目的研究rALR对HBsAg及BSA免疫大鼠产生抗体、细胞因子和对脾脏细胞增殖的影响。方法甲醇诱导表达rALR,测定活性并进行以下研究。①rALR对HBsAg免疫的影响:实验分为:生理盐水、HBsAg20μg/只、HBsAg20μg+rALR100μg/kg、HBsAg20μg+rALR25μg/kg、HBsAg20μg+pPIC9K表达上清、HBsAg20μg+CsA10mg/kg,共6组;②rALR对BSA免疫的影响:实验分为:生理盐水、BSA25μg/只、BSA25μg+rALR100μg/kg、BSA25μg+pPIC9K表达上清、BSA25μg+CsA10mg/kg,共5组。以上均皮下注射免疫大鼠,1次/周×4次,ELISA检测血清中相应抗体、IL-2和IFN-γ。③rALR对大鼠脾细胞增殖的影响:Wistar大鼠先皮下注射HBsAg(20μg/只)1次,2周后处死,分离脾单核细胞,种板,再加HBsAg1μg/孔和/或相应处理因素(rALR、空质粒表达产物等),48h后加3H-TdR,12h后收集细胞,检测cpm值。结果rALR100μg/kg+HBsAg组的8只动物中,有2只出现抗HBs的抗体,空质粒对照组和单用HBs Ag组8只动物均出现抗HBs。rALR100μg/kg+BSA组的8只动物中,有3只出现抗BSA抗体,空质粒对照组和单用BSA组8只动物均出现抗BSA的抗体。rALR100μg/kg能明显抑制细胞因子IL-2及IFN-γ的产生。rALR4μg体外能明显抑制脾细胞的增殖。结论rALR能抑制HBsAg和BSA诱导大鼠产生相应抗体及IL-2、IFN-γ的产生;体外能抑制经体内致敏的脾细胞的增殖,说明rALR有免疫抑制作用。
- 石小枫孙航唐琳陈学华刘杞
- 关键词：肝再生增强因子免疫抑制
- 抗基因及反义寡脱氧核苷酸抑制N－ras表达及对肝癌细胞增殖的影响被引量：3
- 1996年
- 探讨抗基因及反义寡核苷酸对肝癌的潜在治疗作用。方法合成了针对Ｎ－ｒａｓ转录、翻译起始区的１２ｍｅｒ硫代磷酸抗基因寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＯＤＨａｎ）、１９ｍｅｒ硫代磷酸反义寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＯＤＮＡａｓ）。采用ＥＬＩＳＡ、斑点杂交法分别检测了寡脱氧核苷酸处理的肝癌ＢＥＬ７４０２细胞内ｐ２１、Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ水平，观察了对ＢＥＬ７４０２肝癌细胞生长的影响。结果处理细胞内Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ水平低于对照组，以Ｓ－ＯＤＮａｎ组更明显。两者对ｐ２１合成的抑制率达８０％，６７．５％。两者的细胞生长抑制率达８８％、７７％，并呈剂量依赖性。两者处理的细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入降低为对照组的２１．８％、３０．５５％；ＡＦＰ水平明显低于对照组（Ｐ直＜０．００１）。结论Ｓ－ＯＤＮａｎ．Ｓ－ＤＤＮａｓ能有效抑制Ｎ－ｒａｓ表达及相关肝癌细胞增殖；也进一步说明Ｎ－ｒａｓ在肝癌发生中起作重要作用。
- 杨林张定凤王玉芝王升启任红陈学华朱宝珍陈亚西
- 关键词：肝细胞癌反义寡脱氧核苷酸
- HBV无症状携带者树突状细胞的分化及功能研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究HBV无症状携带者树突状细胞的分化及功能。方法抽取健康对照者(A组)、HBV无症状携带者(B组)外周静脉血,经密度梯度离心法分离获得PBMC,用TNF-αI、L-10分别和rhIL-4r、hGM-CSF刺激培养,获得:成熟树突状细胞(mDC)、不成熟树突状细胞(imDC)。rhIL-4r、hGM-CSF刺激培养获得树突状细胞(DC)作组内对照。imDC组加入TNF-α刺激,检验imDC的稳定性。流式细胞仪检测各组反映树突状细胞成熟度的各种分子。结果A、B组内mDC细胞膜表达HLA-DR,HLA-ABC分子,分泌的IL-12p70与imDC、DC、imDC+TNF-α组相比明显增加;A、B组间mDC的HLA-DR,HLA-ABC表达无显著性差异,IL-12p70分泌差异有统计学意义(P<0.01)。imDC的HLA-ABC、HLA-DR低表达,IL-12p70分泌也较低,与本组内DC比较结果差异有统计学意义(P<0.01);A、B组间imDC的HLA-DR,HLA-ABC低表达,IL-12p70分泌差异无统计学意义。imDC加入TNF-α后HLA-ABC、HLA-DR仍低表达,IL-12p70分泌低于本组内DC,结果差异有统计学意义(P<0.01);A、B组间结果无显著性差异。结论在A、B组,TNF-α均有效促进DC成熟为mDC,IL-10均抑制DC的成熟,不受A、B组细胞来源影响。mDC分泌大量IL-12p70,并在B组低于A组,说明B组mDC存在一定的功能不足。
- 石庆凤陈敏曾维群彭明利胡鹏胡怀东陈学华孙航唐开福刘杞任红
- 关键词：乙型肝炎病毒树突状细胞肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-10
- 反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用被引量：2
- 1997年
- 目的:探讨反义 RNA 抗乙肝病毒(HBV)作用。方法:构建了正、反义 HBV S 基因重组 EB 病毒载体 pMEP4Ss、pMEP4Sas,DNA-磷酸钙共沉淀法将重组载体 DNA 转染2.2.15细胞,潮霉素筛选1个月得到抗性细胞克隆。ELISA、斑点杂交法分别检测抗性细胞培养上清 HBsAg、HBeAg、HBV DNA 水平。结果:转染后1、2月,反义载体对 HBsAg、HBeAg 的抑制率分别达75%、51.6%;70%、46%。反义载体组 HBV DNA 水平低于对照组。正义载体组 HBeAg、HBVDNA 水平与对照组无差别,HBsAg 高于对照组。在实验范围内,载体对2.2.15细胞无毒性作用。结论:反义 HBV S 基因重组载体转移能有效抑制 HBV 复制及抗原合成。
- 杨林张定凤任红贾小平陈学华
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎
- 硫代磷酸反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒抗原表达的体外抑制作用
- 1997年
- 目的研究硫代磷酸反义寡核苷酸(S-ASON)的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用.方法作者以2.2.15细胞作为研究对象,在 HBV 基因 S 区和 C 区的翻译起始位点设计合成了2段16聚 S-ASONs,采用酶联免疫吸附试验检测了培养细胞上清中表面抗原(HBsAg)和 e 抗原(HBcAg)的分泌情况。结果当 S-ASON 浓度为每天2μmol/L 时,对 HBsAg 和HBcAg 的抑制率可分别达到88%和75%;而无关序列的寡核苷酸对 HBsAg 和 HBeAg 的抑制作用甚小(抑制率≤15%);ASONs 未对细胞产生毒性作用;ASONs 对 HBV 基因表达的序列特异性抑制作用呈剂量依赖性方式.结论 S-ASON可能成为抗 HBV 的一种有效制剂.
- 钟森王玉芝张定凤重庆医科大学病毒性肝炎研究所王升启任红王全立陈学华马立人
- 关键词：寡核苷酸类乙型肝炎病毒乙型肝炎硫代磷酸
- 不同产地叶下珠及其联合用药抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究被引量：30
- 1995年
- 本文应用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型进行了不同产地中草药叶下珠及其联合中药苦参及抗菌药环丙沙星的抗鸭乙型肝炎病毒（ｄｕｃｋｈｅｐａｔｉｔｉｓＢＶｉｒｕｓ，ＤＨＢＶ）疗效初探，连续用药１个月后，结果表明：广西叶下珠、云南叶下珠能使鸭血清中鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＤＨＢＶＤＮＡ）滴度下降（Ｐ＜０．０５），而重庆叶下珠无此作用（ｐ＞０．０５）；云南叶下珠停药后有血清ＤＨＢＶＤＮＡ回升现象；广西叶下珠与苦参合用，无明显协同作用，但与环丙沙星合用，似有增强抗病毒的作用（Ｐ＜０．０５）。
- 陈压西郭树华张定凤陈学华
- 关键词：叶下珠动物模型乙型肝炎环丙沙星
- ERK在ALR抑制免疫过程中的变化及意义被引量：3
- 2010年
- 目的观察肝再生增强因子(ALR)对外周血单核细胞增殖时ERK的影响,以探明ALR免疫抑制相关机理。方法梯度离心法分离健康人外周单核细胞,用ConA 5μg/ml刺激细胞增殖,选定最佳研究时间;观察不同剂量ALR抑制功能,选用最佳抑制剂量;利用Western blot检测ALR抑制细胞增殖时ERK的磷酸化改变。结果 ConA刺激细胞增殖最佳时间是60 h,ALR能抑制细胞增殖,并呈剂量依赖关系,30μg/ml ALR抑制效果最显著;ALR对单核细胞无直接增殖作用。ConA能引起ERK含量和磷酸化明显增加,ALR则抑制ConA对ERK的刺激,以抑制ERK2最明显。结论 ALR可能通ERK的含量和抑制ERK2的磷酸化抑制细胞增殖。
- 王新国刘杞孙航谢松丽梁珊彭明利陈学华
- 关键词：ERK外周血单核细胞免疫抑制
- 反义寡核苷酸靶向肝细胞体外抗乙型肝炎病毒的实验研究被引量：23
- 1995年
- 作者在对２．２．１５细胞中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因测序的基础上，设计合成了１段针对Ｕ５样序列区的１６－聚硫代磷酸反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ），并将其与肝导向性载体——半乳糖化白蛋白和半乳糖化多聚赖氨酸连接，在２．２．１５细胞中观察了它们的抗病毒作用。在相同实验条件下，非导向组ＡＳＯＮ对表面抗原和ｅ抗原的抑制仅为７０％和５８％，而导向组ＡＳＯＮ可高达９０％～９６％和７９％～８２％，两者差异有显著意义。可见肝导向性载体能明显提高ＡＳＯＮ的抗病毒活性。ＡＳＯＮ对ＨＢＶ的抑制作用是特异性的，呈剂量依赖性关系；而对肝细胞本身的甲胎蛋白合成无影响，亦未见细胞毒性作用。无关序列寡核苷酸无明显抑制作用，反义抑制机理可能是作用在病毒逆转录和翻译水平上。
- 钟森张定凤温守明王升启王玉芝陈学华黄爱龙任红周晓东
- 关键词：乙型肝炎病毒反义寡核苷酸基因表达调控
- 不同产地叶下珠及叶下珠联合用药抗鸭乙肝病毒疗效初探被引量：9
- 1994年
- 本文应用重庆麻鸭乙肝动物模型进行了不同产地叶下珠及叶下珠联合喹诺类抗菌药环丙沙星抗鸭乙肝病毒的疗效初探，连续一月用药后，结果表明：广西叶下珠、云南叶下珠能使血清ＤＨＢＶＤＮＡ滴度下降（Ｐ＜０．０５），而重庆叶下珠无此作用（Ｐ＞０．０５）；且云南叶下珠停药１周后有血清ＤＨＢＶＤＮＡ回升现象：广西叶下珠与环丙沙星合用，似有增强抗病毒的作用。
- 陈压西郭树华张定凤陈学华
- 关键词：叶下珠乙型肝炎病毒中医药疗法
