陈吉中
- 作品数：38 被引量：112H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科委重大项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 鼠粒细胞集落刺激因子受体的纯化及鉴定
- 1999年
- 粒细胞集落刺激因子受体（ＧＣＳＦＲ）在鼠ＮＦＳ６０细胞中有较高的含量，通过对ＮＦＳ６０细胞的大规模培养，用ＣＨＡＰＳ及超速离心抽提ＧＣＳＦＲ，经ＧＣＳＦ亲和层析纯化获得ＧＣＳＦＲ，采用ＡＢＣＥＬＩＳＡ进行鉴定．
- 陈惠鹏范国才付炜陈吉中蒋中华张强
- 关键词：G-CSFABC-ELISA纯化
- 抗人肝再生增强因子单克隆抗体的研制被引量：3
- 2000年
- 目的利用纯化的重组人肝再生 增强因子(hALR)制备抗hALR的单克隆抗体,建立hALR的检测方法。方法采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,经ELISA和免疫印迹证明其特异性。 结果获得了4株分泌抗hALR特异性抗体的杂交瘤细胞 系;无血清培养液效价为1×10^(-2),腹水效价为1×10^(-5);亚类鉴定 表明:2株单克隆抗体为IgG1,另2株为IgG2b;免疫印迹显示:抗体结合抗原的分子量 与hALR相符,为特异性抗hALR抗体。结论通过杂交瘤 技术,获得了抗hALR的单克隆抗体,为以后的工作奠定了基础。
- 章波陈惠鹏范国才陈吉中王清明
- 关键词：肝再生增强因子单克隆抗体杂交瘤
- 大容量人天然抗体库的构建、鉴定及初步应用被引量：7
- 2005年
- 从未经主动免疫的健康志愿者的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,得到了6种VH家族基因,11种VL家族基因,这些抗体基因家族覆盖了人抗体基因多样性的95%以上。采用改进的SOEPCR法将VH基因和VL基因连接成人单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,将连接产物电转化大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7超感染,构建了库容为5.58×109的噬菌体单链抗体库。采用BstNI酶切法证明,构建的噬菌体单链抗体库具有良好的多样性。以TNF-α为靶,从该抗体库中筛选到了抗TNF-α抗体,这说明该抗体库可用于人源抗体的筛选。
- 唐晓明王清明杨俊涛陈吉中范国才汪思应
- 关键词：主动免疫外周血淋巴细胞噬菌体抗体药物生物技术
- 噬菌体抗体库的构建及抗乳腺癌细胞单链抗体的筛选被引量：6
- 2004年
- 构建抗人乳腺癌细胞MCF 7的噬菌体单链抗体库 ,从中筛选MCF 7细胞特异性单链抗体。用MCF 7细胞免疫BALB C小鼠 ,取脾脏 ,提取总RNA ,用RT PCR技术扩增小鼠抗体重链 (VH)和轻链 (VL)可变区基因 ,经重叠PCR(SOE PCR) ,在体外将VH 和VL 连接成单链抗体 (scFv)基因 ,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中 ,电转化至大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染 ,构建噬菌体单链抗体库。从该抗体库中筛选特异性识别MCF 7细胞的噬菌体单链抗体 ,将表面展示单链抗体的单克隆噬菌体转化大肠杆菌TOP10进行可溶性表达。成功地构建了库容为 1 2× 10 6 的抗MCF 7乳腺癌细胞的单链抗体库 ,初步筛选到了与MCF 7细胞特异性结合的scFv,Westernblot检测表明 。
- 赵岩王清明付学奇陈吉中范国才陈惠鹏
- 关键词：噬菌体抗体库人乳腺癌细胞MCF-7单链抗体
- 肝细胞生成素——一种非经典分泌蛋白被引量：2
- 2005年
- 肝细胞生成素(hepatopoietin ,HPO)是一种分泌蛋白.为了研究肝细胞生成素的分泌途径,利用SignalP软件分析了HPO的氨基酸序列,但HPO序列中没有经典分泌蛋白的信号肽.Western印迹实验证明,HPO能以双体形式从细胞中分泌出来.特异性体外阻断实验表明,布雷菲尔德菌素A(brefeldinA)和莫能菌素(monensin)都不能阻断HPO的分泌,说明HPO并不通过经典的内质网 高尔基体(ER -Golgi)途径分泌;优降糖(glyburide)对HPO的分泌没有抑制作用,说明HPO的分泌并不是由ABC1(ATP bindingcassette)转运子介导的;DNP和NH4Cl也不能刺激HPO的分泌,说明内体 溶酶体系统不参与HPO的分泌.上述结果表明,HPO是一种非经典分泌蛋白(non classicalsecretoryprotein) ,能以双体形式从细胞中分泌出来.但和已知的非经典分泌蛋白IL -1β不同,HPO的分泌并不是通过ABC1转运子介导的,内体 溶酶体系统也不参与其分泌.
- 刘刚王清明陈吉中范国才陈惠鹏
- 肝细胞生成素的信号转导机制研究
- 贺福初李勇陆承荣王阁杨晓明王清明邢桂春陈吉中吴祖泽魏汉东
- 该实验室首先克隆了人的肝细胞生成素(HPO)，继而在国际上率先研制出其重组品rhHPO，并进一步证明rhHPO具有缓解肝细胞损伤、刺激肝细胞及肝癌细胞增殖、救治重症肝衰竭的作用。但是，HPO作为新发现的因子，其刺激肝细胞...
- 关键词：
- 关键词：肝细胞生成素信号转导肝细胞损伤肝癌细胞细胞增殖
- 基质金属蛋白酶2的小肽抑制剂
- 本发明公开了一种基质金属蛋白酶2的小肽抑制剂的氨基酸序列及一组具有基质金属蛋白酶2结合活性的小肽，属于生物医学领域。在表达并纯化了基质金属蛋白酶－2(MMP－2)的催化区MCD的基础上，以MCD为靶标筛选噬菌体随机环七肽...
- 王清明高红伟陈惠鹏陈吉中范国才孔丽君刘刚
- 文献传递
- 抗环血酸-Fe^(3+)羟自由基生成体系对质粒pBR322 DNA的损伤被引量：2
- 1992年
- 以抗坏血酸-Fe^(3+)作为自由基生成体系,结合琼脂糖电泳和激光密度扫描等方法,观察了自由基对质粒pBR322 DNA的损伤及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的防护效能。结果表明,该体系生成的羟自由基可造成DNA的单链断裂而使pBR322的超螺旋构型转变为开环构型;过氧化氢酶对羟自由基所致DNA损伤的抑制作用显著,而超氧化物歧化酶无明显抑制作用。
- 吕星陈吉中方允中
- 关键词：DNA维生素C
- HPO结构与受体结合功能关系的初步研究被引量：1
- 2003年
- 肝细胞生成素(HPO)是一种新型细胞因子,在肝再生过程中具有重要的调控作用,研究发现在肝源细胞表面有其特异性受体。为了研究HPO结构与其受体结合功能的关系,构建并表达了HPO及其系列缺失体,利用流式细胞术检测了HPO及其系列缺失体与受体的结合能力。结果表明,在HPO的序列中可能有多个受体结合功能区,其N端的前10位氨基酸残基和C端的第11-20位氨基酸残基对于其受体结合能力是必需的,而C端前10位氨基酸残基对HPO与受体的结合有一定的抑制作用。此外HPO结构的完整性对于其受体结合功能也是必需的。
- 刘刚王清明陈吉中范国才陈惠鹏
- 关键词：肝细胞生成素流式细胞术
- 人铜锌超氧化物歧化酶的大规模生产工艺被引量：2
- 1994年
- 本文以干扰素生产中废弃的人红细胞为原料，采用乙醇－氯份沉淀→磷酸氢二钾盐析→丙酮沉淀手续和ＤＥＡＥ—５２层析步骤，进行了人铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）大规模生产工艺的实验研究。结果表明，生产的酶制剂中含量为９０．６％，比活性在２０００ＭｃＣｏｒｄ—Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ单位／ｍｇ蛋白以上，无菌、无热原质、安全性等项指标符合国家卫生部对血液制品的要求。
- 吕星陈吉中隋建丽方允中周潮
- 关键词：超氧化物歧化酶人红细胞生产工艺
