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抗肝癌细胞单链抗体的筛选和鉴定: 2009年; 以人正常肝细胞系HL-7702为阴性筛选细胞,肝癌细胞系HepG-2为阳性筛选细胞,从全人源噬菌体抗体库中筛选与HepG-2细胞系特异性结合的单链抗体。通过PCR及ELISA鉴定,将阳性克隆转入pET22b载体中构建表达质粒。所得的基因工程菌经测序,以IPTG诱导可溶性单链抗体表达,并通过SDS-PAGE、Westernblot和ELISA检测,最终得到能与HepG-2特异性结合的单链抗体。; 吴晓军张娟陈卫栾立标王旻; 关键词：噬菌体展示单链抗体肝癌细胞可溶性表达

小球藻Chlorella vulgaris中α-葡糖苷酶抑制剂的提取和性质研究被引量：3: 2005年; 目的对小球藻中α-葡糖苷酶抑制剂的提取和性质进行研究。方法α-葡糖苷酶抑制剂采用烘干、脱脂、硅胶柱层析等方法进行提取分离,并对其纯度和成分进行了初步鉴定,对该抑制剂的活性以及在不同条件下对α-葡糖苷酶的影响进行了检测。结果结果显示该抑制剂可能是单一组分,为酚类物质。结论对α-葡糖苷酶具有较强的抑制作用,其作用机理为非竞争性抑制作用。; 田丽梅王陈卫; 关键词：Α-葡糖苷酶抑制剂小球藻

全人源抗血管内皮细胞生长因子受体2单链抗体: 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及基因工程设计、表达的对人血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)具有特异性亲和力的全人源单链抗体。本发明还提供重链可变区和轻链可变区免疫球蛋白分子的核苷酸序列，以及包含重链可变区和轻...; 王旻张娟李海鑫陈卫周雅琼

抗体药物研究进展与趋势被引量：9: 2008年; 自1986年第1个抗体药物OKT-3上市以来,抗体药物经历了20年的发展。在1986-1996年间,早期的鼠源抗体药物存在抗原性强、耐受性差的缺点,随后通过基因工程手段发展了低抗原性的嵌合抗体、人源化抗体。随着噬菌体呈现、大肠杆菌呈现、酵母呈现和核糖体呈现技术的成熟,最终通过体外筛选发展出了全人源抗体。抗体药物经历了早期10年的低谷期,1996年开始进入快速发展的轨道.在人源化抗体技术成熟后,进入临床试验的药物中抗体药物增长率显著高于小分子药物。同靶点类似抗体药物同时进入市场说明了抗体药物专利无法形成有效垄断。笔者概述了抗体药物的发展简史,列出自OKT-3上市以来美国FDA批准的用于诊断、预防、治疗的抗体药物,并对其中具有代表性的Vectibix与Humira进行了概述,并提出抗体药物现在所面临的4个方面的挑战。; 张弢陈卫浦迪张娟王旻; 关键词：抗体药物

全人源抗人白介素21单链抗体: 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及基因工程设计、表达的与人白介素21有特异性亲和力的全人源多肽类单链抗体。此工程抗体多肽是由一条柔性连接肽将抗体的轻链和重链可变区首尾相连而形成的，轻链和重链可变区的骨架与互补决定区均...; 王旻张弢浦迪陈卫张娟李海鑫; 文献传递

全人源抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体: 本发明公开了与人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)特异性结合的全人源单链抗体。本发明的抗体由一条柔性连接肽将抗体的轻链和重链可变区首尾相连而形成。本发明抗体在体外测试可中和hTNF-α的活性，可以用于检测hTNF-α，也适...; 王旻陈卫张娟李海鑫张弢; 文献传递

枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用被引量：28: 2006年; 目的从21味药中筛选对α-葡萄糖苷酶具有活性的中药。方法选用对α-葡萄糖苷酶活性抑制程度较高的中药枸杞作为研究对象。采用烘干、回流脱脂、水提、乙醇沉淀和DEAE纤维素柱层析等方法进行枸杞多糖的提取,并对其活性以及在不同条件下对α-葡萄糖苷酶的影响进行研究。结果0.4 mg的枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制程度达52%,2.0 mg的抑制率高达88%。结论枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,抑制机理为非竞争性抑制。; 田丽梅王旻陈卫; 关键词：枸杞多糖 Α-葡萄糖苷酶

人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达与配体结合活性的鉴定被引量：1: 2008年; 血管内皮生长因子受体(VEGFR)是血管内皮生长因子的特异性受体,VEGFR-2在介导VEGF刺激内皮细胞增殖及血管通透性等生物学活性中起重要作用。在大肠杆菌中实现可溶性的人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达,并鉴定其与配体结合的活性。采用重叠PCR的方法合成人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区基因,将该基因与高效表达载体pET-32a重组,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,表达产物依次经过CM阳离子交换树脂和镍柱亲和层析纯化。利用ELISA法和体外抑制VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞增殖实验检测表达产物与配体结合的活性。SDS-PAGE显示,目的蛋白主要以可溶性Trx-KDR3融合蛋白表达于胞质,30oC时1 mmol/L IPTG诱导细菌5 h融合蛋白表达量约占胞质可溶性总蛋白的20%,经CM阳离子交换树脂和镍柱亲合层析纯化得到纯度为95%的产物,Western blotting鉴定是目的蛋白。ELISA和体外HUVEC细胞增殖实验显示,表达产物具有特异性结合hVEGF165的活性,且该作用呈一定的浓度依赖性。具有配体特异性结合活性的可溶性人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区成功表达,为靶向血管抗肿瘤治疗和相关抗体的研究奠定了基础。; 张娟张艳丽李海鑫陈卫张弢王旻; 关键词：血管内皮生长因子 KDR

全人源抗血管内皮细胞生长因子受体2单链抗体: 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及基因工程设计、表达的对人血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)具有特异性亲和力的全人源单链抗体。本发明还提供重链可变区和轻链可变区免疫球蛋白分子的核苷酸序列，以及包含重链可变区和轻...; 王旻张娟李海鑫陈卫周雅琼; 文献传递

人白介素21Trx融合表达、纯化、复性以及活性检测被引量：4: 2009年; 全合成人IL-21基因,将IL-21编码区使用XhoI和NcoI位点插入pET32a构建原核表达载体,IPTG诱导表达,经DEAE-SepheroseFF柱和HisTrapFF柱纯化,SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的表达,MTT法检测Trx-hIL-21对Jurkat细胞的作用。获得了人IL-21的基因序列,SDS-PAGE检测可见33ku大小的融合蛋白表达,Western印迹表明其可以与抗IL-21单抗反应。Trx-hIL-21以剂量依赖的方式作用于Jurkat细胞的生长,当PHA浓度小于2μg/ml时,IL-21能刺激细胞增殖;当PHA浓度大于2μg/ml时,IL-21能抑制细胞增殖。; 张弢浦迪陈卫王旻; 关键词：原核表达复性纯化

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陈卫