陆士新 作品数:103 被引量:691 H指数:13 供职机构: 郑州大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 河南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 经济管理 农业科学 更多>>
人食管癌相关基因cDNA片段的克隆与初步鉴定 被引量:43 1998年 目的分离人原发性食管组织中新的相关基因,揭示食管癌的易感性与癌变原理。方法用高效、灵敏的mRNA差异显示技术,以2例正常食管上皮、1例癌旁上皮、2例高癌家族的食管癌组织互为对照,通过对其基因表达的比较,找出差异条带,进行RTPCR鉴定和DNA序列分析。结果(1)在实验中,分离、鉴定了18个差异片段,其中包括正常组织表达而肿瘤不表达的正常食管基因(normalesophagealgene,NEG)13个,肿瘤表达而正常组织不表达的突变食管基因(mutatedesophagealgene,MEG)5个。(2)4个NEG片段在GenBank数据库中没有发现同源的已知基因或片段,将其分别命名为食管癌相关基因1~4(esophagealcancerrelatedgene,ECRG1~4)。(3)其他14个cDNA片段分别与GenBank中的12个已知基因或片段同源,这些基因在食管癌中的作用还有待于进一步研究。(4)通过RTPCR鉴定,已初步证明上述4个ECRG片段在正常食管上皮组织和食管癌中的表达有差异。(5)通过对7个人正常组织的cDNA文库检测表明,这4个ECRG片段在胎脑、成人脑、肝、肾、睾丸、骨髓及骨胳肌? 苏涛 刘海玲 陆士新 赵新吉 周春晓 金顺钱关键词:食管肿瘤 CDNA MRNA 聚合酶链反应 人乳腺癌细胞雌激素受体基因的去甲基化及其表达 被引量:6 2006年 目的探讨人乳腺癌雌激素受体(ER)基因启动子的去甲基化和ER蛋白表达功能恢复的关系。方法用甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐基因组测序方法检测乳腺癌细胞ER基因启动子的甲基化状态;用RT-PCR方法从mRNA水平检测ER和孕激素受体(PR)基因的表达;用Western blot方法从蛋白水平探测ER基因的表达;MTT方法检测重新表达ER蛋白的功能。结果在ER阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,ER基因启动子甲基化的水平较高,而ER mRNA和ER蛋白均不表达。MDA-MB-231细胞用去甲基化剂5-杂氮-2’-脱氧胞嘧啶(5-AZA-2’-deoxyC)处理,可以恢复该细胞系ER mRNA和ER蛋白的表达,同时伴有ER基因启动子甲基化水平的降低以及PR基因的表达。MDA-MB-231细胞经去甲基化逆转ER表达后,应用三苯氧胺治疗,乳腺癌细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)。结论人乳腺癌ER基因的失活与其基因启动子高甲基化关系密切。去甲基化剂5-AZA-2’-deoxyC能较好地降低MDA-MB-231细胞DNA甲基化,并有效激活功能性ER基因的再表达,为ER基因阴性的乳腺癌患者接受内分泌治疗提供了新的途径和理论基础。 王瑞 李林蔚 王瑞林 樊青霞 赵培荣 王留兴 陆士新关键词:雌激素受体基因 基因表达 甲基化 乳腺肿瘤 我国食管癌高发现场的防治战略与对策研究 我国是世界食管癌高发区,为了有效降低其发病率和死亡率,在食管癌高发现场建立了防治研究基地,贯彻以人为本、预防为主、防治研相结合的战略方针,组织实施以政府为主导、领导专家群众相结合、多学科大协作攻”三关”、抓”三早”、降两... YANG Wenxian 杨文献 LU Shixin 陆士新 LIU Guitin 刘桂亭 王瑞林 黎钧耀 程同吉关键词:食管癌 高发现场 非霍奇金淋巴瘤自体外周血干细胞中肿瘤污染的临床研究 被引量:14 2002年 目的 了解非霍奇金淋巴瘤 (NHL)患者自体外周血干细胞 (APBSC)移植物中肿瘤细胞污染的情况 ,探讨移植物被肿瘤细胞污染对预后的影响。方法 以免疫球蛋白重链 (IgH)、T细胞受体γ(TCRγ)基因克隆性重排和BCL 2 /IgH融合基因为检测标志 ,应用PCR结合SSCP技术检测了 33例NHL患者APBSC标本中的微量肿瘤细胞 ,同时还检测了部分患者自体外周血干细胞移植 (APBSCT)前后骨髓中的微量肿瘤细胞。结果 8例 (2 4 .2 % )患者的 17份 (2 3.6 % )APBSC标本微量肿瘤细胞检测阳性。动员时骨髓微量肿瘤细胞检测为阳性和阴性的患者 ,其APBSC污染阳性率分别为 6 6 .7%(6 / 9)和 8.7% (2 / 2 3) ,二者差异有显著性 (P <0 .0 1)。APBSC污染阳性和阴性患者的移植后预期 3年总生存率分别为 71.4 %和 71.2 % ,预期 3年无病生存率分别为 2 5 .0 %和 6 1.5 %。结论 NHL患者采集的APBSC可受到肿瘤细胞的污染。APBSC动员时骨髓微量肿瘤细胞阳性增加APBSC污染的几率。 周爱萍 石远凯 冯奉仪 陆士新 何小慧 韩晓红关键词:自体外周血 非霍奇金淋巴瘤 干细胞移植 预后 聚合酶链反应 人原发性食管癌组织中多种抑癌基因的研究 被引量:5 1994年 应用PCR扩增与直接测序技术,分析10例食管癌和癌旁组织标本中多个抑癌基因p53、Rb、APC和MCC的突变与丢失。结果:10例中6例有p53基因突变;5例有Rb基因改变;3例有APC改变;3例有MCC基因改变;8例食管癌标本中至少有一种抑癌基因有改变;6例至少有两种或多种抑癌基因改变,1例癌旁组织中也有两个抑癌基因改变。结果表明,食管癌癌变与多个抑癌基因变化的累积有关。 李华川 陆士新关键词:食管肿瘤 基因 聚合酶链反应 三氧化二砷和肼苯哒嗪体外诱导雌激素受体α表达强弱的比较 被引量:2 2007年 目的本文拟比较三氧化二砷和肼苯哒嗪两种去甲基化药物在最佳有效浓度时,诱导MDA-MB-231细胞株雌激素受体重新表达作用的差异。方法以雌激素受体高甲基化失活的人乳腺细胞系MDA-MB-231细胞系为研究对象,经2.0μmol/LAs2O3和10μmol/L肼苯哒嗪处理后,采用免疫组织化学技术检测ER-α受体的表达。结果经2.0μmol/L As2O3与10μmol/L肼苯哒嗪处理的MDA-MB-231细胞ER-α受体的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种去甲基化药物在各自最佳去甲基化作用浓度时,对于高甲基化失活的雌激素受体ER-α基因去甲基化作用差异无统计学意义。 陈伟 王留兴 樊青霞 赵培荣 王瑞林 陆士新关键词:甲基化 雌激素受体 三氧化二砷 肼苯哒嗪 胰岛素样生长因子1受体在食管鳞癌组织中的表达及RNA干扰沉默其表达对EC9706细胞增殖能力的影响 被引量:3 2011年 目的探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)在食管鳞癌组织中的表达及其与患者临床特征之间的关系,以及RNA干扰沉默其表达对人食管癌EC-9706细胞体外增殖能力的影响。方法采用免疫组化法,检测80例食管鳞癌组织和18例正常食管上皮组织中IGF-1R的表达,通过RNA干扰技术沉默EC9706细胞中IGF-1R的表达,通过绘制生长曲线、四甲基偶氮唑蓝(MTr)实验和平板克隆形成试验,观察IGF-1R对细胞体外增殖能力的影响。结果食管鳞癌组织中IGF-1R表达的总阳性率为86.3%,强阳性率为51.3%;正常食管上皮组织中IGF-1R表达的总阳性率为61.1%,强阳性率为11.1%。食管鳞癌组织中IGF-1R表达的总阳性率和强阳性率均高于正常食管组织(P〈0.01)。有淋巴结转移患者组织中IGF-1R表达的总阳性率和强阳性率均高于无淋巴结转移患者(P〈0.01)。IGF-1R的表达随肿瘤组织分化程度的增高而降低,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。不同年龄组间IGF-1R表达差异无统计学意义(均P〉0.05)。Ⅲ-Ⅳ期患者组织中IGF-1R表达的总阳性率和强阳性率均高于I-Ⅱ期患者(P〈0.01)。稳定干扰后的EC9706细胞IGF-1R蛋白表达下降,生长缓慢,细胞倍增时间较实验对照组和空白对照组延长。培养48h后,稳定转染细胞抑制率为17.3%,高于实验对照组(2.7%,P〈0.01)。稳定转染细胞较实验对照组和空白对照组细胞克隆形成能力减弱(P〈0.05)。结论IGF-1R在食管鳞癌组织中呈高表达,与食管鳞癌的发生、转移、分化程度和临床分期相关;RNA干扰沉默IGF-1R的表达,可以使EC9706细胞的体外增殖能力降低。 马望 李雯 樊青霞 王留兴 王瑞林 陆士新关键词:鳞状细胞癌 胰岛素样生长因子1受体 RNA干扰 增殖 食管癌相关基因2对EC9706细胞恶性增殖的抑制作用 被引量:10 2005年 目的探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer related gene2,ECRG2)对EC9706食管癌细胞恶性增殖的抑制作用及其机制。方法利用DNA重组技术,构建ECRG2真核表达质粒(pcDNA3.1ECRG2),在食管癌EC9706细胞中转染并表达ECRG2蛋白,观察细胞的生长状态,比较平板集落和软琼脂克隆形成能力的改变,分析ECRG2对EC9706恶性表型的影响。进一步采用WesternBlot检测p53、p21的改变。结果转染表达ECRG2后,EC9706细胞的生长受到干扰,细胞的增殖速度受到抑制,实验组细胞平板集落形成率为18%,而对照组为55%,两者间差异显著(P<0.05);肿瘤细胞的停泊非依赖能力降低,实验组软琼脂克隆体积小且形成个数(8±1.88)明显少于对照组(14.3±3.13),差异显著(P<0.05)。WesternBlot分析表明,EC9706细胞转染表达ECRG2后伴随着p53、p21蛋白表达上升。结论转染表达ECRG2蛋白能够部分逆转食管癌EC8706细胞的恶性表型,其过程可能与p53、p21通路密切相关。 李美宁 黄革 郭黎平 陆士新关键词:ECRG2 细胞生长 P53蛋白 核黄素转运基因2(RFT2)在食管癌中的表达及作用研究 目的:探索人类核黄素转运基因2 (RFT2)在食管癌发生发展中的作用.方法:采用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测162对食管癌病人的癌和癌旁组织标本中RFT2基因的内源表达水平.采用Sanger测序法测定26对... 蒋兴然 余茜颖 范金虎 郭黎平 姜伟 陆士新食管癌及胃癌患者化疗前后血清IGF-1、IGF-2、IGFBP-3水平检测 被引量:3 2008年 采用ELISA法检测70例食管癌及胃癌患者化疗前及化疗后6周血清中人胰岛素样生长因子(IGF-1、IGF-2)及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平。发现化疗有效组及化疗无效组化疗前血清IGF-1、IGF-2、IGFBP-3水平与正常对照组比较均有统计学差异;与化疗前比较,化疗有效组化疗后IGF-1明显降低、IGFBP-3明显升高,而化疗无效组化疗后IGF-1明显升高、IGFBP-3明显降低。认为血清IGF-1水平降低、IGFBP-3水平升高与食管癌、胃癌化疗疗效呈正相关,可作为预测和评价化疗疗效的指标之一。 刘莺 樊青霞 王留兴 陆士新关键词:胰岛素样生长因子