阳小燕
- 作品数:13 被引量:11H指数:2
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 应用差异蛋白质组学的方法分析左氧氟沙星对肺炎链球菌D39的作用被引量:1
- 2011年
- 应用差异蛋白质组学的方法,对肺炎链球菌D39在左氧氟沙星作用下蛋白质表达水平的变化进行了研究,利用质谱技术共鉴定到23个差异蛋白质。这些蛋白质主要参与DNA的复制、转录以及蛋白质的翻译过程,为深入了解抗生素的作用机理以及细菌的耐药机制提供重要理论基础。
- 孙正华阳小燕贺翔孙雪松
- 关键词:差异蛋白质组学肺炎链球菌左氧氟沙星
- 肺炎链球菌去信号肽脂蛋白PsaA锌离子结合特性的初步表征
- 2011年
- 肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体。PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白。通过PCR扩增肺炎链球菌D39不含信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大肠杆菌Top-10后用L(+)-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达。重组蛋白经亲和镍柱纯化以后,用外切酶-重组肠激酶(REK)去除6His标签。感应偶合电浆质谱(ICP-MS)测得纯化的PsaA蛋白以1∶1比例结合金属锌离子。进而,通过圆二色谱法分析金属离子的结合对蛋白二级结构中α-螺旋和β-片层含量的影响,荧光光谱研究蛋白结合锌离子的解离常数及结合当量,为进一步研究该蛋白在体外的金属结合特性及细菌的金属运输及毒力机制提供理论基础。
- 李楠王南杰王红翠李慧詹胜阳小燕孙雪松
- 关键词:肺炎链球菌PSAAICP-MS
- 孵育时间在二氧化钛选择性富集磷酸化肽中的影响
- 2012年
- 目的:旨在探索孵育时间在二氧化钛选择性富集磷酸化肽中的影响。方法:以大肠杆菌BL21(DE3)为材料,预实验确定二氧化钛磁珠与肽段之间的最适比例,之后在此比例下继续探究不同孵育时间条件下的富集效果,以观察孵育时间在二氧化钛富集体系中的影响。结果:预实验确定磁珠与肽段之间最适比例为3∶1,在此比例下发现随着孵育时间的增加其富集效率会逐渐降低,最后确定大肠杆菌中最适孵育时间为5min。结论:孵育时间在大肠杆菌二氧化钛富集体系中对富集效果有明显的影响,并且呈负相关。推测不同样品的最佳孵育时间与样品种属有关。
- 詹胜银兴峰李慧李楠阳小燕孙雪松
- 关键词:二氧化钛磷酸化孵育时间大肠杆菌
- 利用IMAC与LC-MS/MS技术分离和鉴定化脓链球菌中的锌结合蛋白
- 2011年
- 化脓链球菌是一种革兰氏阳性致病菌,能引起一系列疾病。运用固定化金属离子亲和层析技术(IMAC)富集化脓链球菌中锌结合蛋白,进行溶液酶解,利用先进的LC-MS/MS技术对富集的锌结合蛋白进行质谱分析。鉴定到48个在化脓链球菌中与锌结合相关蛋白,这些蛋白主要涉及到蛋白翻译、糖代谢、金属转运、氧化等重要生理过程。这些结果对于深入研究化脓链球菌的致病机制,寻找新的抗菌药物作用靶点和疫苗候选物具有重要意义。
- 阳小燕银兴峰张留辉贺翔孙雪松
- 关键词:IMAC
- 金属钌配合物抑制肺炎链球菌靶标及其机制的研究
- 近年来,抗菌药物的过度使用甚至滥用导致了细菌的耐药性迅速提高和传播,细菌耐药性已经成为医药学领域的重大难题之一,研发新一代高效安全且不易产生耐药性的抗菌药物,已经是一项刻不容缓的任务。鉴于其独特的结构和理化性质,金属钌配...
- 孙斌阳小燕何庆瑜陈文华
- 关键词:抗菌药物肺炎链球菌
- 文献传递
- 铑配合物在制备抗菌药物中的应用
- 本发明公开了铑配合物在制备抗菌药物中的应用。本发明发现了铑配合物Rh<Sub>2</Sub>Ac<Sub>4</Sub>能特异性地抑制肺炎链球菌、化脓链球菌、李斯特菌和金黄色葡萄球菌的生长,但对革兰氏阴性菌大肠杆菌和鲍曼...
- 何庆瑜阳小燕刘春元孟苗
- 文献传递
- 一种化脓链球菌HtsA蛋白质疫苗以及制备方法和应用
- 本发明公开了一种化脓链球菌HtsA蛋白质疫苗及其制备方法和应用。首先将去除信号肽序列的<I>HtsA</I>基因连接至含His标签的表达载体中,再转化大肠杆菌,诱导表达后,Ni‑亲和层析纯化HtsA重组蛋白质,最后将Ht...
- 何庆瑜阳小燕张宝中黄建东
- 文献传递
- 利用蛋白质组学研究新德里金属β-内酰胺酶1对鲍曼不动杆菌的影响
- 2018年
- 【目的】比较临床分离的亲缘关系近的多药耐药鲍曼不动杆菌MDR-ZJ06(blaNDM-1–)和ABC3229(blaNDM-1+)的差异蛋白质组,以期发现新德里金属?-内酰胺酶1(New Delhimetallo-β-lactamase-1,NDM-1)对鲍曼不动杆菌生长代谢的影响。【方法】利用2-DE联合MALDI-TOF MS/MS技术鉴定差异表达蛋白,并在GO注析的基础上,对差异蛋白进行通路分析、功能分类和富集分析,并作出蛋白与蛋白相互作用网络。【结果】发现ABC3299相对于MDR-ZJ06有51个差异表达蛋白,其中11个蛋白表达上调,40个蛋白表达下调,并且这些差异蛋白主要涉及降低碳代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢和细胞壁合成,增加铁离子转运系统形成。【结论】这个结果揭示了NDM-1可能是通过减缓细菌自身的代谢,增加自身铁的摄取使细菌机体系统地抵抗抗生素从而达到耐药。
- 曾观娣徐倩刘婉婷阳小燕孙雪松
- 关键词:鲍曼不动杆菌NDM-1多药耐药差异蛋白质组学
- 肺炎链球菌抑菌药物作用的蛋白质组学研究
- 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)属于革兰氏阳性病原微生物,可引起鼻窦炎、中耳炎、肺炎、败血症、脑膜炎等严重疾病。在过去抗生素是治疗肺炎链球菌感染的主要手段,但随着抗生素的大量使用,耐药菌株在...
- 阳小燕
- 关键词:肺炎链球菌万古霉素钌配合物蛋白质组学
- 文献传递
- 化脓性链球菌脂蛋白FtsB的基因克隆、表达、纯化与功能研究被引量:1
- 2011年
- 体外克隆化脓性链球菌5005的ftsb基因,表达并纯化FtsB蛋白,并对其铁色素结合特性进行初步研究。首先通过PCR方法从基因组中扩增ftsb基因,将其连接到pGEX4T-1载体上,转入大肠杆菌DH5α中大量扩增,将测序正确的重组载体转化到表达宿主大肠杆菌BL21进行表达,优化诱导表达条件。利用亲和层析方法纯化表达产物,并对FtsB的铁色素结合特性进行研究,同时通过DEPC封闭组氨酸实验对其结合位点进行初步研究。成功构建原核表达载体pGEX-ftsb,获得分子量约33 kD的野生型FtsB蛋白,产率为30 mg/L。紫外-可见光谱研究表明FtsB和铁色素结合后在450 nm处出现紫外吸收峰,DEPC封闭组氨酸实验证明FtsB中组氨酸不参与铁色素的结合。对FtsB蛋白进行铁色素结合特性和结合位点进行研究,为进一步研究细菌中的铁色素转运机理及开发疫苗候选物和药靶奠定一定的理论基础。
- 李慧吕洁王红翠王南杰李楠詹胜阳小燕孙雪松
- 关键词:化脓性链球菌