闫佩毅
- 作品数：22 被引量：56H指数：4
- 供职机构：上海市普陀区人民医院更多>>
- 发文基金：上海市普陀区卫生系统自主创新科研基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠B7-H4重组腺病毒构建及鉴定
- T细胞的活化需要两个信号：第一信号是由TCR-MHC—抗原肽复合物引起T细胞交联并启动特异性抗原识别信号；T细胞活化的第二信号为共刺激信号，是由APC和T细胞表面多种粘附分子对组成。共刺激信号不仅能提供促进T细胞活化、增...
- 闫佩毅
- 关键词：B7-H4重组腺病毒免疫抑制
- 文献传递
- 乳腺癌组织及癌旁组织HER2基因CpG岛甲基化水平及其mRNA表达的研究被引量：5
- 2020年
- 目的探讨乳腺癌组织及癌旁组织人类表皮生长因子受体2(HER2)基因CpG岛甲基化率和HER2mRNA表达的差异。方法收集经病理确诊的50份乳腺癌组织和对应的癌旁组织样本,采用焦磷酸测序法、实时聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法分别检测HER2启动子CpG岛甲基化率、HER2 mRNA表达和HER2蛋白表达。结果HER2阳性乳腺癌组织HER2 mRNA相对表达量高于HER2阴性癌组织(P<0.05),但HER2启动子CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。HER2阴性乳腺癌组织HER2基因启动子CpG岛甲基化率显著高于对应的癌旁组织(P<0.05),而HER2 mRNA表达则低于对应的癌旁组织(P<0.05)。HER2阳性的乳腺癌组织与其对应的癌旁组织之间以及HER2阳性与阴性癌旁组织之间,HER2基因启动子CpG岛甲基化率和HER2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在HER2阴性的乳腺癌癌旁组织中,HER2基因启动子CpG岛的低甲基化可能是HER2 mRNA高表达的机制之一。
- 金姝朱琪朱元袁亚蔡骁垚张骥闫佩毅
- 关键词：人类表皮生长因子受体2CPG岛甲基化乳腺癌
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA提取方法的改进被引量：3
- 2016年
- 目的研究适用于PCR法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的核酸提取方法。方法 MRSA在不同孵育条件下分别经含溶菌酶、溶葡萄球菌酶或chelex100R的裂解液裂解获得DNA,用PCR法检测目的基因。结果同时使用溶菌酶、溶葡萄球菌酶、chelex100R裂解得到的DNA,在用PCR法检测mecA基因时,获得的循环阈值(Ct值)明显低于其他组分的裂解液。采用56℃一步法孵育裂解细菌的效果,与37、56℃二步法比较,差异无统计学意义(P>0.05),但简化了步骤。结论含溶菌酶、溶葡萄球菌酶、chelex100R等的裂解液同时与细菌于56℃孵育30min的方法,是获取MRSA细菌DNA既便捷又高效的方法,可以立即用于下一步PCR,为PCR法快速检测临床MRSA感染奠定了基础。
- 金姝邹玉涵闫佩毅黄德魁张骥
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌聚合酶链反应
- COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体变化的临床意义被引量：2
- 2020年
- 目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体[趋化因子C-C基序受体-1(CCR1)和Toll样受体(TLR)2、TLR4]变化的临床意义。方法建立用于检测COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体的流式细胞术方法。采用流式细胞术检测30例COPD患者(COPD组)、30例肺炎患者(肺炎组)和30名体检健康者(正常对照组)外周血及痰液(正常对照组除外)中性粒细胞氧化吞噬功能及其表面CCR1、TLR2和TLR4的表达水平。结果肺炎组和COPD组外周血中性粒细胞氧化吞噬功能均显著低于正常对照组(P<0.05),肺炎组与COPD组之间差异无统计学意义(P>0.05)。COPD组、肺炎组及正常对照组之间外周血中性粒细胞表面CCR1表达差异均有统计学意义(P<0.05),而TLR2、TLR4表达3组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著低于肺炎组(P<0.05),CCR1表达显著高于肺炎组(P<0.05),TLR2和TLR4表达2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬阳性率与CCR1表达呈负相关(r=-0.548,P<0.01),与TLR2、TLR4表达均无相关性(r值分别为-0.206、-0.219,P>0.05)。结论COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著下降,其表面CCR1表达升高。COPD患者气道中性粒细胞的氧化吞噬功能受损可能是COPD发病的机制之一。
- 闫佩毅张骥涂焕平张立仇越张锋英胡奕雯金姝
- 关键词：TOLL样受体中性粒细胞
- 流式细胞术检测抗中性粒细胞抗体方法的建立及临床初步应用被引量：2
- 2011年
- 目的建立适用于临床的流式细胞术(FCM)检测抗中性粒细胞抗体(ANA)的方法,并作临床初步应用。方法采用FCM,以前向散射和侧向散射参数区分全血标本中的淋巴细胞和粒细胞,设定粒细胞门,用CD16b-藻红蛋白(PE)和CD177-别藻蓝蛋白(APC)单克隆抗体分别检测中性粒细胞中表面表达CD16b和CD177抗原细胞的百分率。用所建方法检测健康对照32名,确定参考范围,以此作为判断受检者血液中抗CD16b或CD177抗体存在与否的依据。检测外周血白细胞(WBC)总数<4.0×109/L且中性粒细胞绝对计数(ANC)<2.8×109/L的59例患者的CD16b和CD177百分率,并对其中中性粒细胞表达CD16b和/或CD177百分率低于参考范围(即判为相应抗体阳性)的患者给予激素治疗,观察疗效。结果健康人群中性粒细胞中表达CD16b和CD177的百分率分别为98.36%±1.53%和74.95%±11.07%,据此分别确定了健康人群中性粒细胞表达CD16b和CD177的参考范围分别为CD16b>95.36%、CD177>53.25%(即>x珋-1.96s)。59例患者中有23例(39.0%)ANA阳性,其中ANC<2.0×109/L患者的ANA阳性率(50.0%)远高于ANC>2.0×109/L患者(27.6%)。ANA阳性患者经激素治疗后,WBC和ANC上升。结论 FCM检测抗中性粒细胞CD16b和CD177抗体是自身免疫性中性粒细胞减少症(AIN)实验简便、快捷的诊断方法,有助于AIN的诊断、鉴别诊断和疗效判断。
- 闫佩毅张文龙张骥朱元王旋邹玉涵金姝朱晴晖
- 关键词：抗中性粒细胞抗体流式细胞术
- B7-H4重组腺病毒的构建及其鉴定
- T 细胞的活化需要两个信号:第一信号是由 TCR-MHC 一抗原肤复合物引起 T 细胞交联并启动特异性抗原识别信号:T 细胞活化的第二信号为共刺激信号,是由 APC 和 T 细胞表面多种粘附分子对组成。B7-CD28分子...
- 闫佩毅张立煌
- 小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:利用AdEasyTMXL system构建携带小鼠B7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性。方法:以RT-PCR方法从C57小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定。经Xhol和EcoR双酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体(简称PSC),构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7-H4/Ad。将此质粒转化人胚肾细胞(AD-293)产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H4/Ad。以RT-PCR及Western blot方法检测被mB7-H4/Ad感染的AD-293细胞中B7-H4 mRNA和蛋白的表达,并观察重组腺病毒感染的小鼠成纤维细胞(L929)对T细胞增殖和细胞因子表达的影响。结果:获得序列准确的mB7-H4基因并成功构建重组腺病毒表达质粒,转化AD-293细胞获得重组腺病毒;细胞生物学实验证实,该重组腺病毒具有抑制CD3单抗诱导的T淋巴细胞的增殖和细胞因子的分泌。结论:成功构建具有免疫抑制功能的mB7-H4重组腺病毒。
- 闫佩毅姚航平钱韵古丽娟陶岚张立煌
- 关键词：转染
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及SCCmec分型被引量：11
- 2018年
- 目的了解上海市普陀区人民医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况及SCCmec型别,为预测耐药菌株的发展趋势、为临床预防和治疗MRSA感染提供理论依据。方法收集该院2012年1月至2016年12月临床分离的MRSA共380株,采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验,采用多重聚合酶链反应检测SCCmec型别。结果所有菌株对利奈唑胺、万古霉素均敏感,敏感率为100.0%;对利福平、复方磺胺甲噁唑耐药率较低,分别为5.0%和7.6%;对红霉素、左氧氟沙星、四环素高度耐药,耐药率分别是100.0%、94.2%、93.4%和90.0%;对青霉素耐药率为100.0%。380株MRSA有SCCmecⅡ型281株(73.9%),SCCmecⅢ型59株(15.5%),SCCmecⅣa型5株(1.3%),另有35株(9.2%)未能分型。结论上海市普陀区人民医院分离的MRSA标本以SCCmecⅡ型为主,具有多重耐药的特征,不同SCCmec型别的耐药谱有所差异。
- 邹玉涵刘庆中张骥周凌琴陈超闫佩毅金姝
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性
- 乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系被引量：2
- 2011年
- 目的探讨乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系。方法取经病理确诊的52例乳腺癌组织,分别用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)、免疫组织化学法(IHC)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测C-erbB-2启动子CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平和C-erbB-2 mRNA的表达。结果 C-erbB-2蛋白阴性和阳性的2组乳腺癌组织的非甲基化率分别为0%和23.5%,CpG岛低甲基化与C-erbB-2蛋白表达呈显著正相关(r=0.413,P=0.03)。C-erbB-2蛋白阴性和阳性组织中C-erbB-2 mRNA表达量分别为0.098±0.041和0.20±0.062,与C-erbB-2蛋白表达呈显著正相关(r=0.356,P=0.03)。结论 C-erbB-2启动子CpG岛的低甲基化和C-erbB-2 mRNA的表达均与C-erbB-2蛋白的高表达相关,C-erbB-2基因启动子的低甲基化可能在C-erbB-2蛋白过度表达中起一定作用。
- 金姝朱琪秦华晖闫佩毅邹玉涵朱元袁亚朱晴晖
- 关键词：CPG岛甲基化甲基化特异性聚合酶链反应乳腺癌
- 变应性鼻炎患者外周血中Tr1/Th3细胞的检测和分析被引量：2
- 2014年
- 目的:检测变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者和健康对照者外周血中IL-10+CD4+T细胞、TGF-β+CD4+T细胞(分别代表Tr1细胞和Th3细胞的特性)的比例,并探讨其在AR发病中的意义,为AR的治疗提供临床参考。方法:分离19例对粉尘螨过敏的AR患者和19例健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs),采用流式细胞术分别检测外周血中IL-10+CD4+T细胞、TGF-β+CD4+T细胞的比例。结果:同健康对照者相比,AR患者外周血中IL-10+CD4+T细胞的比例显著降低[(1.66±0.48)%vs.(3.80.92)%,t=-9.08,P<0.01)],AR患者外周血中TGF-β+CD4+T细胞的比例降低[(1.92±0.54)%vs.(4.76±1.12)%,t=-9.94,P<0.01)]。结论:外周血中IL-10+CD4+T(Tr1)细胞比例的降低可能是AR发病的一个重要因素,提高AR患者外周血中分泌IL-10的Tr1细胞的比例可能在AR的治疗中具有重要意义。外周血中TGF-β1+CD4+T(Th3)细胞的比例显著降低,可能是AR发病的一个重要因素。但TGF-β1与AR关系的研究较少,特别是外周血中TGF-β1水平与AR的关系研究较少,需进一步研究。
- 庞权白素娟闫佩毅李文秀金姝冯会杰杨杨
- 关键词：鼻炎变应性外周血
