钱书兵
- 作品数：27 被引量：67H指数：6
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 逆转录病毒载体感染原代大鼠肝细胞的研究被引量：1
- 1999年
- 目的研究逆转录病毒载体高效转移并表达于大鼠原代肝细胞．方法采用表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激大鼠原代肝细胞增殖，以表达β半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／βｇａｌ）感染肝细胞．采用Ｘｇａｌ原位染色方法检测肝细胞内ＬａｃＺ的表达．结果肝细胞表达β半乳糖苷酶基因，转导效率为３％～２２％．结论双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／βｇａｌ）可有效介导βｇａｌ基因表达于原代大鼠肝细胞，提示该载体可用于标记大鼠肝细胞，有利于研究肝细胞移植后在体内的生物学特性和肝病的体外基因治疗．
- 廖丹谢青周霞秋钱书兵陈诗书李定国
- 关键词：肝细胞逆转录病毒载体基因治疗肝移植肝病
- 恶性肿瘤联合基因治疗的实验研究被引量：3
- 1998年
- 基因治疗能够在比较短的时间里从理论设想变为现实，主要是对疾病分子生物学的研究已取得了重大进展，同时发展了许多新技术、新方法。时至今日，基因治疗的研究突飞猛进，并已从实验研究及基础研究过渡到临床试用阶段。目前世界上已有二百多项基因治疗临床研究项目正在进...
- 陈诗书钱书兵
- 关键词：恶性肿瘤基因治疗联合疗法
- “瘤苗”-细胞因子基因转导人肝癌和胃癌细胞的研究
- 陈诗书钱关祥张腾飞钱书兵胡亮徐荣婷程枫孙洁提孙欲晓王立群许伟榕朱敏杨红英厉兴君王克敏
- 将人源hIL-2，hINF-γ，hGM-CSF，hTNF-α等cDNA经逆转录病毒载体转导人肝癌和胃癌细胞，经分析细胞因子基因已整合至瘤细胞，能表达相应mRNA和蛋白质，并具有细胞因子的活性，而且不含复制潜能的病毒，也无...
- 关键词：
- 关键词：瘤苗IL-2
- γ-干扰素基因修饰人肝癌细胞的体外生物学行为被引量：1
- 1999年
- 目的 研究γ干扰素(IFNγ)基因修饰人肝癌细胞的某些体外生物学行为。 方法 用逆转录病毒载体建立4种γ干扰素基因修饰人肝癌细胞,分别检测外源基因表达、细胞形态结构、体外生长速率及60Co照射的影响。 结果 4种IFNγ基因修饰人肝癌细胞表达不同生物活性水平的IFNγ,体外生长速率有不同程度的下降。经60Co照射及冻存处理,复苏后仍能分泌较高水平的IFNγ。 结论 IFNγ基因修饰人肝癌细胞体外生物学行为有一定程度的变化。
- 钱书兵钱关祥陈诗书
- 关键词：Γ-干扰素人肝癌细胞生物学行为
- MHC Ⅱ类基因修饰小鼠肝癌细胞的抗肿瘤作用被引量：7
- 2001年
- 李煜钱书兵陈诗书钱关祥
- 关键词：肝癌细胞基因修饰小鼠肿瘤疫苗
- 绿色荧光蛋白与H-2K^b融合基因的构建及表达被引量：11
- 2000年
- 目的 构建GFP与H 2Kb 融合基因 ,并分析融合基因在活细胞中的表达。方法 应用基因工程技术构建H 2Kb 与绿色荧光蛋白 (GFP)的融合基因。RT PCR和Western印迹分析基因表达 ;激光共聚焦荧光显微镜观察活细胞内荧光布局。结果 RT PCR和Western印迹分析表明融合基因获得了正确表达。激光共聚焦荧光显微镜观察结果表明 ,Kb GFP融合分子象天然Kb 分子一样表达在细胞膜表面 ,且胞外区域可被Kb 分子特异性单克隆抗体所识别 ,表明Kb GFP融合分子可在细胞内正确折叠和装配。Kb GFP融合基因的瞬间和稳定表达均获得了相同结果。结论 Kb GFP融合蛋白具有GFP的自发荧光特性 ,且不影响Kb 分子在细胞内的正确表达。
- 钱书兵陈诗书
- 关键词：绿色荧光蛋白MHC
- 实验性肿瘤联合基因的治疗研究
- 陈诗书夏爱娣钱关祥魏道严王克敏唐展云钱书兵糜军赖冠华杨劲松王建华郑新民孙文长张景迎李煜厉兴君
- 采取多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。成功克隆并鉴定包括细胞因子、MHC分子、抑制血管生成有关因子等11种cDNA，并选用脑心肌炎病毒和骨髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点（IRES），构建成多基因表达载...
- 关键词：
- 关键词：基因治疗肿瘤
- 肝细胞移植对急性肝衰竭大鼠的治疗作用及移植细胞生物学特性的研究被引量：12
- 2000年
- 探讨同种异体肝细胞经腹腔、脾脏移植对D 氨基半乳糖 (D gal)诱导的急性肝衰竭大鼠的治疗作用及移植细胞的生物学特性 ;研究基因修饰肝细胞经脾脏移植后的定位及表达。方法 采用D gal诱导大鼠肝衰竭。在D gal诱导后 4 8h ,Ⅰ组 :经腹腔移植 4× 10 7同种异体肝细胞 ;Ⅱ组 :经腹腔注射生理盐水 2ml;Ⅲ组 :经脾脏移植 2× 10 7同种异体肝细胞 ,同时肌注CsA 10mg/kg ;Ⅳ组 :经脾脏注射生理盐水 1ml,同时肌注CsA 10mg/kg ,观察大鼠的存活率、肝脏功能、肝脏病理变化和移植细胞的组织学及G6P活性变化 ;Ⅴ组 :经脾脏移植双顺反子逆转录病毒修饰的大鼠原代肝细胞 ,同时肌注CsA 10mg/kg ,经PCR扩增及X gal染色方法追踪细胞的定位及基因表达。 结果 Ⅰ组大鼠存活率显著高于Ⅱ组 ( 71.4 %对 2 6.7% ,P <0 .0 5) ,肝脏功能及肝脏病理有部分改善。腹腔内移植肝细胞可短暂存活并具有G6P活性。Ⅲ组大鼠存活率与Ⅳ组无差别 ( 30 %对 30 % ,P >0 .0 5) ,肝功能、肝脏病理无明显改善。脾内移植肝细胞可短暂存活并具有G6P活性。Ⅴ组经脾移植基因修饰肝细胞后 ,可在脾内检测到 β gal基因表达并扩增出NeoR基因。 结论 经腹腔移植同种异体肝细胞可改善D gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率 ,部分改善肝功能及肝脏病理 。
- 廖丹谢青周霞秋臧国庆钱书兵陈诗书
- 关键词：肝细胞移植急性肝功能衰竭逆转录病毒载体
- 可生物素化HLA-A2-生物素化序列融合基因的构建与表达被引量：3
- 2002年
- 本文采用RT PCR技术从人外周血PBMC中克隆HLA A2基因的胞外区 ,拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列后 ,装入pET 42b (+)高效表达载体进行诱导表达。并对表达产物进行纯化与复性。结果成功地扩增出HLA A2基因并测序证实 ;构建了融合表达载体pET HLA A2 ,并获表达与纯化。为研究在原核系统中表达、纯化与复性及进一步体外构建MHC I类分子四聚体 ,探讨免疫识别机制奠定了基础。
- 钱丽钱书兵钱关祥
- 关键词：克隆HLA-A2纯化融合基因
- 基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗被引量：1
- 2004年
- 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.
- 陈诗书钱关祥夏爱娣张腾飞钱书兵魏道严徐荣婷胡亮王克敏程枫于丽莉杨红英许伟榕唐展云朱敏
- 关键词：瘤苗人肝癌实验性肿瘤联合基因基因修饰
