钟应佳
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律更多>>
- 一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法被引量：1
- 2009年
- 目的改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA。方法健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组。传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养箱消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞。余步骤同传统组。结果传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重。而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;A260/280比值在1.8～2.0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因。结论酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法。RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达（RT-PCR）的分析,并且重复性好,可以推广。
- 郑雪莲辜俊赵献峰史洵玮何海宁孙红钟应佳
- 关键词：椎间盘组织RNA提取
- siRNA干扰Id1表达对卵巢癌化疗耐药性的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:利用siRNA技术降低细胞分化抑制因子(Id1)在卵巢癌细胞SKOV3、HO-8910中蛋白水平的表达,并探讨其对化疗耐药性的影响。方法:利用Id1-siRNA干扰Id1 RNA水平的表达,采用蛋白印迹实验检测卵巢癌细胞SKOV3、HO-8910中Id1蛋白水平的表达;转染siRNA后,实验细胞的培养液中加入顺铂,部分复孔在加入顺铂的同时各自加入细胞化学通路抑制剂BHA、Sp600125、Necrostain、z-VAD-fmk,培养48小时后分别利用MTT、LDH检测细胞的生存率、死亡率。结果:①卵巢癌细胞株SKOV3、HO-8910中均有Id1蛋白水平的表达。②Id1-siRNA组中Id1蛋白水平的表达比空白对照组、阴性对照组中的表达明显降低。③Id1-siRNA组细胞死亡率明显低于空白对照组、阴性对照组。④z-VAD-fmk组细胞死亡率明显低于顺铂组,其余各组无明显变化。结论:Id1-siRNA干扰Id1 RNA水平的表达,降低Id1蛋白水平的表达,通过调节下游的凋亡通路,能有效降低卵巢癌细胞株对顺铂的耐药性。
- 史洵玮何海林王霞郑雪莲李金科孙红钟应佳杨兰胡丽娜
- 关键词：卵巢癌化疗耐药
- 高效液相色谱法测定人血液、尿液中的2,4-D丁酯被引量：4
- 2011年
- 目的建立检测血液、尿液中2,4-D丁酯的高效液相色谱分析方法。方法采用正己烷为样品萃取溶剂,色谱柱为Zorbax SB-Aq柱,流动相为V(甲醇)∶V(水)=60∶40。结果 2,4-D丁酯在血液和尿液中的线性范围分别为0.10～10.00μg/mL(r≥0.999 8)和0.08～8.00μg/mL(r≥0.999 5),检测限分别为0.002 0μg/mL和0.001 8μg/mL,准确度为94.5%～104.5%,日内、日间精密度≤4.5%。结论本研究建立的血液、尿液中2,4-D丁酯的提取和HPLC检测方法,可应用于2,4-D丁酯中毒的快速检验和中毒死亡的法医学鉴定。
- 刘晓敏廖林川颜有仪杨林盛欣钟应佳
- 关键词：2,4-D丁酯高效液相色谱法法医毒物分析生物样品
- 热休克蛋白90抑制剂对TNFα诱导肿瘤细胞凋亡和调控NF-κB信号通路的影响被引量：7
- 2011年
- 目的探讨热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)抑制剂17-di methylamino-ethylaminogeldanamycin(17DMAG)对肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的肿瘤细胞凋亡的影响及其作用机理。方法采用乳酸脱氢酶释放实验检测不同剂量的17DMAG与TNFα共培养对子宫颈癌细胞株HeLa和卵巢癌细胞株SKOV3的细胞毒作用,吖啶橙/溴化乙锭双重染色后荧光显微镜下观察17DMAG和TNFα共同处理所导致的细胞形态学改变,并采用Western blot检测细胞凋亡相关分子半胱天冬酶-8(caspase-8)、半胱天冬酶-3(caspase-3)、多聚(ADP-核糖)聚合酶〔poly(ADP-ribose)polymerase,PARP〕和TNFα诱导的核因子-κB(NF-κB)信号通路信号分子receptor-interaction protein(RIP)、IκB kinaseβ(IKKβ)、inhibitor of IκB(IκBα)的变化。结果 17DMAG可增强TNFα对HeLa细胞和SKOV3细胞的杀伤作用,17DMAG可抑制TNFα诱导的NF-κB信号通路中关键的信号分子RIP和IKKβ,阻断NF-κB的活化,增强TNFα诱导的外源性细胞凋亡。结论 17DMAG可通过抑制NF-κB信号通路增强TNFα诱导的肿瘤细胞凋亡,提高TNFα的抗肿瘤效率。
- 钟应佳王霞郑雪莲颜有仪刘晓敏廖林川
- 关键词：热休克蛋白90TNFΑNF-ΚB信号通路细胞凋亡
