郭永昌
- 作品数:11 被引量:79H指数:3
- 供职机构:山西医科大学更多>>
- 发文基金:山西省实验动物专项基金山西省卫生厅科技攻关计划项目山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 实验用小型猪 遗传质量控制
- 本文件规定了实验用小型猪的遗传分类与命名、繁殖方法、遗传质量监测、判定结论和报告。本文件适用于实验用小型猪的遗传质量控制。
- 宋国华高继萍陈朝阳王晓堂宋晓娜杨钧婷闫晓如郭永昌
- 不同时间注射PMSG和HCG对小鼠超排卵效果的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨不同时间注射孕马血清激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超排卵效果的影响。方法选用40只6周龄F1昆明小鼠,随机分成4组,分别在同一天的11:00,13:00,15:00,17:00注射PMSG 5 IU,48 h后注射HCG5 IU,然后与公鼠合笼;次日晨检查阴栓,阳性者于当日10:00处死取卵,计数受精卵的数量。结果 11:00,13:00,15:00和17:00组平均每只获取可用受精卵9.8枚、24.8枚、11.5枚、4.7枚。结论在13:00注射PMSG,48 h后注射HCG对小鼠超排效果最好。
- 陈喜英郭永昌刘田福
- 关键词:孕马血清人绒毛膜促性腺激素超排卵注射时间
- 2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证被引量:64
- 2009年
- 目的制备一种发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型。方法雄性SD成年大鼠高糖高脂饲料喂养1个月,诱发出胰岛素抵抗,给予小剂量链脲佐菌素(STZ)25 mg/kg,腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。结果试验组大鼠血糖升高,对胰岛素敏感性下降,从生化指标和形态学方面证实造模成功。结论本实验2型糖尿病大鼠模型造模成功,它具有中度高血糖、胰岛素抵抗、成功率高等特点,是人类2型糖尿病及其药物研究的理想动物模型。
- 燕娟郭巍伟梁执群李志国郭永昌
- 关键词:糖尿病动物模型
- 受精卵最佳显微注射时间的探索
- 2011年
- 目的探讨最佳显微注射受精卵的时间。方法对小鼠诱导超排卵后,在不同时间点采集受精卵,观察采集到受精卵的不同阶段中雄原核的状态,确定受精卵出现雄性原核的最佳时间。结果在注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后的23-25 h,出现雄性原核的受精卵所占的百分率达到75%以上,此时雌雄原核清晰可见,受精卵雄原核较大。结论在注射HCG后23-25 h的受精卵最适合进行显微注射。
- 郭永昌刘田福司苏晋张引红
- 关键词:输卵管受精卵
- 甘丙肽过表达转基因小鼠的制作和鉴定
- 2014年
- 目的建立甘丙肽(galanin,GAL)过表达转基因小鼠,为后续研究甘丙肽基因功能提供动物模型。方法重组质粒PDGFβ-GAL经XbaⅠ、HindⅢ双酶切后,将连接有启动子的甘丙肽基因片段回收纯化,用显微注射法将甘丙肽基因注入400枚受精卵的雄原核中,选取发育正常的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管壶腹部,待其产仔。用PCR方法鉴定子代小鼠基因型,蛋白印迹分析(Western blot)鉴定子代小鼠体内GAL蛋白表达情况。结果获得子代小鼠50只,有8只小鼠在基因组上整合有GAL基因,整合率为16%;Western blot显示转入的基因片段PDGFβ-GAL在脑组织中的表达水平比肝组织高。结论通过显微注射法成功建立了GAL过表达转基因小鼠模型。
- 陈喜英刘田福郭永昌
- 关键词:甘丙肽小鼠转基因过表达
- 小鼠显微操作针的制作技术被引量:3
- 2011年
- 目的探讨转基因小鼠制作中显微注射时所用移卵管、持卵针和注射针的最佳制作方案。方法通过酒精灯烧制和手拉以及通过P-97拉针仪设置不同的参数将薄壁硼硅玻璃管拉制成不同口径的移卵管、持卵针和注射针。结果按本方案制作的移卵针,持卵针和注射针用于小鼠受精卵的显微注射,实验过程顺利,效果非常好。结论该方法适用于小鼠受精卵显微注射的移卵管、持卵针和注射针制作。
- 郭永昌刘田福张引红
- 关键词:显微操作固定针注射针
- C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆被引量:1
- 2011年
- 目的用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对。方法在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E.coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对。结果用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致。结论改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 卫兵艳刘田福郭永昌张引红
- 关键词:RNA提取RT-PCR基因克隆
- 周脂素和ADRP在糖代谢异常大鼠肝脏组织中的表达被引量:4
- 2015年
- 目的:探讨脂滴相关蛋白周脂素(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法:分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损(IGT)和2型糖尿病大鼠模型(T2DM),采用光镜观察各组大鼠肝组织的形态学改变;用ELISA法测定血清周脂素perilipin和ADRP含量;real-time PCR技术检测肝脏组织中perilipin和ADRP mRNA的表达;用Western blotting法检测肝脏组织中ADRP蛋白的表达。结果:HE结果显示,IGT组和T2DM组大鼠均有肝细胞脂肪变性,IGT组变性更严重;各模型组的生化指标与临床相关疾病的表现一致;血清perilipin水平各组之间无差异,但IGT组和T2DM组肝组织perilipin mRNA表达明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组perilipin mRNA表达显著增加(P<0.05)。T2DM组血清ADRP含量较其对照组明显降低(P<0.01);模型组肝组织ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01);ADRP蛋白表达较其对照组也明显降低(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论:血清ADRP含量在T2DM的形成中起一定的作用,与胰岛素抵抗指数呈明显负相关;高脂喂养后能导致大鼠糖代谢异常,并伴有非酒精性脂肪肝的发生;糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与肝组织perilipin表达升高和ADRP表达降低有关。
- 樊林花刘茂林卫兵艳刘田福王春芳庞文彪郭永昌刘建新
- 关键词:脂肪分化相关蛋白糖耐量受损2型糖尿病
- 实验动物福利及保健被引量:6
- 2009年
- 长期以来,实验动物科学者一直面临着动物实验伦理学和如何避免及减少动物受伤害的途径和措施问题。实验动物福利日益被人类所重视,在符合科学目的前提下通过采用更为合理的手段,充分体现实验动物福利。文章就动物实验过程中有关实验动物福利的基本要求进行探讨,提出动物工作者应该注意的动物福利行为,同时列举我国实验动物福利相关立法,以说明实验动物福利的重要意义。
- 郭永昌刘田福陈朝阳
- 关键词:实验动物福利动物实验
- MDMA在染毒家兔体内的分布
- 2009年
- 目的:观察3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺(MDMA)染毒家兔生命体征变化,并对急死与延缓死亡动物体内药物分布进行研究。方法:家兔以10 mg·kg-1剂量灌胃(ig)给予MDMA,BL-5生物机能实验系统记录从开始给药到动物被处死前的心电、血压和呼吸等主要生命体征变化;分别于给药2 h和6 h处死动物,采用气-质联用(GC/MS)法测定组织及体液中MDMA浓度。结果:家兔给药后,四肢出现间歇性震颤,血压升高,呼吸与心率加快,1 h左右达到高峰,之后缓慢下降;给药2 h后体内器官组织中药物浓度高于体液,其中以胃内容、肺及脾含量最高,6 h后组织与血液中药物浓度明显下降,而胆汁与尿液中药物浓度基本不变,胆汁中药物浓度高于其他组织。结论:尿液为鉴定MDMA滥用的最佳检材;对滥用MDMA死亡者脏器组织与体液中药物含量测定,可对用药后急死或延缓死亡做出判断。
- 陈朝阳王玉瑾景志杰宋国华庞文彪张瑞虎郭永昌寇冰
- 关键词:3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺生命体征