郭威
- 作品数：10 被引量：57H指数：5
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠关节软骨细胞的培养被引量：5
- 2008年
- 目的探讨大鼠关节软骨细胞培养方法。方法采用胶原酶NB4消化法从1周龄SD大鼠的关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,每日在倒置显微镜下观察细胞形态及其生长情况,并用HE、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行鉴定。结果软骨细胞形成单层的时间在原代培养1周左右,5d左右即可传代。第5代后部分变为梭形,第7代后绝大部分变为长梭形,增殖能力减弱。结论采用此法可在短时间内获得大量纯化的大鼠软骨细胞。
- 宋永周崔慧先吕哲李莎郭威
- 关键词：软骨细胞细胞培养技术
- 雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马CA1区神经元的影响
- 目的:应用SAMP8小鼠为研究对象,观察去卵巢及雌激素补充治疗对SAMP8小鼠学习记忆、海马神经元的影响以及对海马nNOS阳性神经元的作用。探讨雌激素改善学习记忆能力的机制,为雌激素补充治疗提供实验依据。
方...
- 郭威
- 关键词：雌激素海马NNOSSAMP8小鼠
- 文献传递
- 雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马CA1区神经元的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察雌激素对SAMP8鼠学习记忆及海马神经元的影响。方法将6月龄SAMP8鼠45只分为假手术组(sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢+雌激素组(OVX+E组)3组,并用同龄正常老化SAMR1小鼠作为同源对照组。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,苏木素-伊红染色和免疫组织化学显示海马CA1区神经元及神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的变化,流式细胞术检测其nNOS的表达量。结果 OVX组与sham组相比,逃避潜伏期明显延长(P<0.05),跨越平台次数显著减少(P<0.05)。雌激素补充治疗能改善学习记忆能力,与sham组比较差异无统计学意义(P>0.05);OVX组海马CA1区神经元病变严重,且CA1区nNOS阳性神经元的数量、吸光度和海马nNOS荧光指数(FI)值均低于sham组(P<0.05);给予雌激素后,OVX+E组各项实验结果与OVX组相比差异有统计学意义(P<0.05),与sham组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论雌激素能够改善小鼠的学习记忆能力,有效保护海马CA1区的神经元,提高海马CA1区nNOS阳性神经元的表达。
- 崔慧先郭威李莎石葛明顾平
- 关键词：雌激素MORRIS水迷宫SAMP8小鼠
- 羊膜脱细胞基质的制备及其生物相容性被引量：15
- 2008年
- 目的:羊膜是一种天然的细胞外基质,具有抗原性低、排异反应小特点。实验拟进行羊膜脱细胞基质的制备,观察其作为组织工程支架材料的生物相容性。方法:实验于2007-03/08在河北医科大学解剖教研室实验中心完成。实验材料:4～6周龄健康清洁级SD大鼠,体质量100～150g,由河北医科大学实验动物中心提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。新鲜人羊膜取自石家庄市第四医院,采取前征得产妇知情同意,实验经医院伦理委员会批准。实验方法:①取新鲜人羊膜冲洗后以1%tritonX-100溶液振荡24h,0.25%胰蛋白酶37℃振荡4h,充分漂洗,冷冻干燥,环氧乙烷消毒,并进行苏木精-伊红染色和扫描电镜检测。②体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,并复合培养于羊膜脱细胞基质上,以不含细胞的培养基作为空白对照,以普通培养基培养作为阴性对照,倒置显微镜下观察生长情况,并进行苏木精-伊红检测。四甲基偶氮唑盐法测定羊膜脱细胞基质浸提掖对骨髓间充质干细胞毒性;将羊膜脱细胞基质植入SD大鼠背部皮下,检测其组织相容性。结果:①制备的羊膜脱细胞基质为白色菲薄、半透明的膜状物,柔韧性好,经苏木精-伊红和扫描电镜检测无细胞残留。苏木精-伊红染色可见羊膜表面细胞黏附生长良好,细胞伸展,形态与正常培养细胞无差异。②实验组第2、4、6、8天的吸光度值低于对照组,相对增殖率随培养时间延长而增加,平均相对增殖率为89.5%,细胞毒性评分均为1级。③皮下埋置术后动物全部成活,伤口无红肿、渗液等炎症反应,移植物均未见坏死、纤维化等。光镜下,术后1周移植物周围可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,羊膜卷尚完整;术后2周,淋巴细胞减少,偶见新生毛细血管;术后4周,部分移植物已经降解,基本未见淋巴细胞。结论:经去污剂和酶消化法制备的羊膜脱�
- 宋永周崔慧先王振显吕哲史正亮郭威
- 关键词：组织相容性
- 抗骨增生胶囊含药血清对软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响被引量：13
- 2008年
- 背景:抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效,基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上。目的:拟观察抗骨增生胶囊含药血清对白细胞介素1β引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响。设计、时间及地点:分组对照体外细胞学实验,于2007-03/09在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成。材料:新生1周SD大鼠,用于培养软骨细胞;体质量200g左右SD大鼠10只,以中药水溶液灌胃后定时取血制备含药血清。方法:采用胶原酶NB4消化法从大鼠关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,实验分为3组:空白血清组:90%L-DMEM+10%空白血清,每日给予同等量的生理盐水;白细胞介素1β组(90%DMEM+10%空白血清+白细胞介素1β);中药血清+白细胞介素1β组(90%DMEM+10%中药血清+白细胞介素1β)。白细胞介素1β加入量为5μg/L,培养72h。将实验用细胞消化传代后制成单细胞悬液,以1×108L-1的密度接种于96孔培养板,100μL/孔,每组6孔。主要观察指标:倒置显微镜下观察中药含药血清对软骨细胞增殖的影响;四甲基偶氮唑盐比色法检测其各孔吸光度变化;流式细胞仪分析凋亡细胞百分率;基质金属蛋白酶13Elisa试剂盒检测不同组基质金属蛋白酶13分泌情况。结果:在正常培养基条件下,细胞形态均匀,死亡脱落细胞较少。空白血清组软骨细胞的增殖速度缓慢,细胞较稀疏。白细胞介素1β组细胞明显稀疏,部分细胞胞浆中空泡增多,细胞核形态不规则。在中药血清培养基作用下,软骨细胞增殖的速度较白细胞介素1β组快,胞体显著增大,细胞核形态规则。白细胞介素1β组细胞增殖数量减少,凋亡细胞百分率增加,其培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶13含量升高,抗骨增生胶囊含药血清可对抗白细胞介素1β对软骨细胞的影响。结论:体外条件下,抗骨增生胶囊含药血清能够抑制白细胞介�
- 宋永周刘会玲崔慧先郭威李莎
- 关键词：软骨细胞凋亡金属蛋白酶
- 雄激素对快速老化小鼠海马神经元凋亡及超微结构的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:探讨雄激素对快速老化小鼠海马神经元凋亡及超微结构的影响。方法:7月龄雄性快速老化小鼠(SAMP8)随机分为假手术对照组、去势组及去势+雄激素补充治疗组。十一酸睾酮(TU)剂量为37.4 mg.kg-1.15 d-1。雄激素补充治疗45 d后,通过Nissl染色观察海马神经元数量和形态的变化;TUNEL法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;透射电镜观察超微结构的改变。结果:去势组海马神经元数量明显减少,凋亡数量和凋亡率显著增加,超微结构病理变化严重。雄激素补充治疗后,观察结果与假手术对照组相比无统计学意义。结论:去势后雄激素缺乏可导致海马神经元异常凋亡增加,数目减少,结构受损。雄激素补充治疗可减轻神经元损伤,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆功能作用机制之一。
- 李莎崔慧先王保芝郭威石葛明顾平
- 关键词：去势雄激素海马神经元凋亡
- 人脱细胞羊膜与体外培养大鼠血管平滑肌细胞的生物相容性被引量：4
- 2008年
- 目的了解人脱细胞羊膜(HAM)的细胞相容性;观察以HAM为生长载体,复合大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)构筑组织工程膀胱的可能性。方法用物理和酶消化方法处理人羊膜,将大鼠VSMCs与HAM进行体外复合培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜观察。将20只大鼠随机分为两组后行半膀胱切除术,实验组10只行半膀胱切除后用复合大鼠VSMCs的HAM进行修补,另外10只以单纯的HAM修补。分别于术后2、4、8周测定膀胱容量并取膀胱进行组织学观察。结果经物理和酶处理的HAM纯度高,孔隙多,胶原纤维未受损;VSMCs在HAM上可黏附生长,并能长入材料的孔隙内。应用HAM行大鼠膀胱重建术后,实验组与对照组膀胱最大容量(Volmax)比较无显著性差异。组织学观察显示,2周时HAM即已吸收降解,膀胱移行细胞和平滑肌细胞开始形成,炎性反应明显;实验组膀胱平滑肌比对照组厚且规则。4周和8周时实验组和对照组膀胱均与正常膀胱组织无明显区别。结论HAM的细胞相容性良好,不影响VSMCs的形态,作为膀胱移植物进行膀胱修补吸收降解迅速,可用做组织工程膀胱的支架材料进一步研究。
- 王振显蔡文清瞿长宝宋永周郭威
- 关键词：平滑肌细胞脱细胞羊膜生物相容性体外培养
- 血管平滑肌细胞培养液和膀胱匀浆上清对大鼠骨髓间充质干细胞的诱导分化
- 2008年
- 我们利用已经分化成熟的血管平滑肌细胞（VSMC）培养液和膀胱组织匀浆上清对骨髓间充质干细胞（MSC）体外诱导分化进行了研究，现报告如下。
- 王振显蔡文清宋永周瞿长宝郭威
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外诱导分化细胞培养液组织匀浆上清膀胱
- 人羊膜在神经组织工程中的应用进展被引量：4
- 2007年
- 人羊膜具有很多神经生物学特性,对人体抗原性极低,其在神经系统疾病异体移植方面的研究越来越广泛,具有很大的临床应用潜能。我们参阅了国内外相关文献,就人羊膜在神经系统组织工程方面的应用进展作一综述。
- 宋永周郭威崔慧先
- 关键词：人羊膜神经营养因子
- 膀胱匀浆上清液在大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为平滑肌样细胞中的作用被引量：7
- 2008年
- 目的：环境因素对干细胞的分化起到重要的作用。实验拟观察经低浓度二甲亚枫进行预诱导后，大鼠骨髓间充质干细胞在体外经膀胱组织匀浆上清液诱导定向分化为平滑肌样细胞的可行性。方法：实验于2007-04／2007-09在河北医科大学解剖教研室下属细胞培养室完成。①实验材料：4～6周龄100～150g健康清洁级SD大鼠1只，雌雄不限，8周龄220～250gSD大鼠4只，由河北医科大学实验动物中心提供，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：采用骨髓干细胞培养基和贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞，并在体外扩增、传代。选择8周龄SD大鼠进行膀胱组织上清液的制备。取第4代骨髓间充质干细胞用1％二甲亚砜预诱导8h后，应用膀胱匀浆上清液诱导7d。以未进行诱导的骨髓间充质干细胞为阴性对照组。③实验评估：观察细胞形态学的变化，并运用免疫细胞化学检测特异性。一平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达。结果：骨髓间充质干细胞经诱导分化后，细胞呈梭形平滑肌样，融合后形成峰谷状排列，并表达平滑肌特异性蛋白标志物。一平滑肌肌动蛋白，诱导分化率为（45．6±3.5）％，与阴性对照组相比差异具有显著性意义（P〈0．05）。结论：采用此方法成功诱导骨髓间充质干细胞分化为平滑肌样细胞。
- 王振显蔡文清宋永周瞿长宝史正亮郭威
- 关键词：干细胞平滑肌分化
