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绵羊ApoER2基因克隆及其干扰质粒对睾丸共培养细胞硒蛋白表达的影响被引量：1: 2014年; 本研究旨在克隆绵羊ApoER2基因,构建ApoER2-siRNA质粒载体,研究ApoER2基因沉默对睾丸共培养细胞SelP和PHGPx表达的影响。利用RT-PCR技术,克隆ApoER2序列,在此基础上构建4种pGPU6/GFP/Neo—ApoER2-siRNA质粒表达载体,利用脂质体将其转染到体外共培养绵羊睾丸细胞中,采用Real—time PCR和Western blotting方法,检测其抑制效应,并研究ApoER2基因沉默对Sel P和PHGPx mRNA表达的影响。本研究成功获得了长度为2 490 bp的绵羊睾丸ApoER2完整编码区序列,共编码892个氨基酸,绵羊ApoER2核苷酸序列与牛的同源性最高,相似性为97.7%。ApoER2-siRNA-1565和ApoER2-siRNA-2567位点重组质粒的干扰效果较好(P<0.01),选取ApoER2-siRNA-2567重组质粒,结果显示转染组Sel P和PHGPx表达量显著降低(P<0.01)。获得了绵羊ApoER2编码区序列和有效抑制该基因表达的2个质粒载体,ApoER2沉默可能影响了睾丸硒蛋白Sel P和PHGPx的表达,为进一步研究ApoER2转运硒机理提供了理论依据。; 张春香赵辉张国林郭丽娜任有蛇; 关键词：绵羊

热修复中不同pH缓冲液对鸡睾丸组织免疫荧光结果的影响: 2014年; 探讨热修复中不同pH缓冲液与不同修复温度对鸡睾丸组织免疫荧光结果的影响。选取可被抗体标记的阳性组织,采取不修复、胰蛋白酶修复、不同条件的热修复进行比较。结果表明,抗原修复是必要的,本试验中以缓冲液pH 7.0、97℃下的热修复效果最好。; 赵辉陈建伟郭丽娜夏龙钢张春香任有蛇; 关键词：免疫组化免疫荧光抗原修复

基于高通量转录组测序的山羊睾丸和附睾头差异表达基因分析被引量：14: 2014年; 为探明山羊睾丸和附睾差异表达基因,挖掘与精子成熟和贮存密切相关的功能基因。采用Illumina HiSeqTM2000高通量转录组测序RNA-seq技术对3只成年种公羊睾丸和附睾头进行测序,将组装得到的Unigene比对到Nr、GO和KEGG数据库中注释,并进行差异表达基因聚类分析。结果显示,睾丸和附睾头Unigene总数分别为57 727个和51 395个,GO功能分类注释到生物过程、分子功能和细胞组成数据库中的分别有25 201、25 456和27 318个,其中差异表达基因数分别为9 150、9 172和10 003个;注释到KEGG通路中所有基因数23 222个,其中差异表达基因数8 219个,差异基因显著富集的信号通路:mRNA监视通路和mTOR信号通路;睾丸和附睾头中差异表达的基因共有24 592个,其中上调基因有8 420个,下调基因有16 172个。在附睾头中上调幅度最大的前3位:gDEFB124、gDEFB109和gDEFB108,下调幅度最大的前3位:GTSF1L、SRRM1和FNDC8。附睾头中表达量最高的前3位基因依次为Lcn5、gDEFB124和GPx5。睾丸中表达的基因数量大于附睾头中数量;β防御素家族、Lipocalin家族和GPx5可能在附睾头精子成熟、贮存和受精中发挥重要作用。; 张春香张国林郭丽娜赵辉任有蛇; 关键词：转录组差异表达基因睾丸公山羊

日粮中添加不同水平亚硒酸钠对公鸡睾丸组织细胞结构的影响被引量：1: 2013年; 通过在日粮中添加亚硒酸钠,研究不同水平无机硒对公鸡睾丸组织细胞结构的影响。选取80只体重接近、健康无疾病的海兰白成年公鸡,随机分成4组,每组20只鸡。对照组饲以基础日粮;硒处理组分别在基础日粮中添加0.5、1和2 mg/kg的亚硒酸钠。H-E染色的结果表明:0.5 mg/kg组公鸡睾丸发育最好,各级生精细胞数量最多;1 mg/kg组睾丸各级生精细胞较多,但细胞间存在明显间隙,成熟精子较少;而2 mg/kg组睾丸组织结构已经发生一定程度的损伤,各级精细胞数量都较少。试验说明,日粮添加适宜浓度的硒可促进公鸡睾丸的发育,而较高的硒添加量会使睾丸发育不良。; 赵辉姚晓磊石磊程彩虹汤贝贝李彦霖张春香任有蛇; 关键词：亚硒酸钠公鸡睾丸繁殖

公山羊Protamine 1 mRNA表达特性及与精液品质相关性的研究: 2016年; 旨在研究雄性山羊主要繁殖器官中PRM1mRNA表达特性,分析精子PRM1mRNA表达与精液品质参数的相关性。本研究通过荧光定量PCR技术分析PRM1mRNA表达规律,利用免疫组化技术对睾丸中PRM1蛋白进行定位,并应用GraphPad Prism 5软件分析精子PRM1mRNA表达量与精液品质指标的相关性。结果显示,PRM1mRNA在睾丸中高度表达,其次是附睾,睾丸中PRM1mRNA表达量是附睾头的247倍,附睾头显著高于附睾体和尾(P<0.05),在剩余其他组织中微量表达。在周岁之前,睾丸中PRM1mRNA表达量随着月龄增加而增加,12月龄的表达量显著高于9月龄的表达量(P<0.05),9月龄表达量显著高于其他低月龄的表达量(P<0.05)。精子PRM1mRNA的表达量与精子活力(R2=0.586 0,P=0.000 5)、精子密度(R2=0.442 2,P=0.004 9)呈显著正相关。山羊PRM1在长形精子细胞和精子细胞中表达,睾丸其他生精细胞及间质细胞中无表达。山羊PRM1mRNA表达具有时空表达特性,PRM1mRNA表达量可以作为评价公羊繁殖力的指标。; 张春香赵辉郭丽娜郑亚琳张彩霞刘文忠乔利英任有蛇; 关键词：PROTAMINE 公山羊

日粮纳米锌水平对公羊睾丸和附睾Cu-ZnSOD表达的影响被引量：7: 2014年; 旨在研究日粮纳米锌对公羊睾丸和附睾铜锌超氧化物歧化酶基因(Cu-ZnSOD)mRNA和蛋白表达的影响。将16只9月龄体重相近、健康状况良好的晋中绵羊公羊随机分成4组,分别喂给基础日粮(对照组),基础日粮+纳米锌(50、100和150mg·kg-1 DM)。预饲期10d,正试期80d。试验结束时采集绵羊睾丸和附睾组织。采用RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术检测其Cu-ZnSOD mRNA、Cu-ZnSOD蛋白表达及在睾丸中定位情况。结果显示:绵羊睾丸和附睾组织Cu-ZnSOD mRNA表达量顺序是附睾头≥睾丸>附睾体>附睾尾。日粮添加50~100mg·kg-1纳米锌可增加其睾丸和附睾组织Cu-ZnSOD mRNA和蛋白表达量。免疫组化结果显示CuZnSOD在睾丸的生精细胞中有强阳性信号,间质细胞有弱阳性信号。综上表明,绵羊睾丸和附睾不同区段CuZnSOD mRNA和蛋白表达有差异。日粮添加适量锌可提高睾丸和附睾中Cu-ZnSOD mRNA和蛋白表达量,其作用机制仍需进一步研究。; 任有蛇秦小伟郭丽娜赵辉刘文忠张建新张春香; 关键词：WESTERN BLOTTING 睾丸附睾公羊

不同水平酵母硒对黎城大青羊妊娠母羊血液抗氧化能力的影响被引量：14: 2013年; 试验以黎城大青羊妊娠母羊为研究对象,通过在日粮中添加不同水平酵母硒,分别在配种前、妊娠期第30、90和140天采集血液样品,研究酵母硒对妊娠母羊血液抗氧化能力的影响以及血液抗氧化酶活性和硒含量随妊娠的变化规律。结果发现:随着妊娠的进行,母羊血液中的GSH-Px和SOD活性呈现逐渐升高的趋势,日粮中添加硒元素可以显著(P<0.05)提高妊娠母羊血液的抗氧化能力,增强GSH-Px和SOD的活性并且减少过氧化产物MDA含量;此外,血液中的硒含量也随着日粮中硒水平的提高而增加,较高的硒含量对血液的抗氧化能力有一定的抑制作用。研究结果表明,在动物妊娠期补硒是非常必要的,妊娠母羊日粮中添加酵母硒可以提高血液抗氧化酶活性。; 石磊赵辉姚晓磊宋瑞高任有蛇张春香岳文斌雷福林; 关键词：酵母硒黎城大青羊妊娠母羊抗氧化能力

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赵辉