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枯草芽孢杆菌弹性蛋白酶的纯化及酶学性质研究被引量：5: 2010年; 对枯草芽孢杆菌BEM01菌株发酵液中的弹性蛋白酶进行了分离纯化,并研究了酶学性质。先后采用了硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和分子筛层析等方法,弹性蛋白酶的回收率为7.88%,纯化倍数为13.79,结合SDS-PAGE和分子筛层析确定该弹性蛋白酶是一单链蛋白,分子量约为31ku。对酶学性质的研究表明,该弹性蛋白酶属于含有Ca2+的金属蛋白酶类;其最适作用温度为50℃,具有良好的热稳定性;在硼砂-硼酸缓冲体系、Tris-HCl缓冲体系中酶最适反应pH分别为7.4和8.6,在pH8.0～11.0酶活力趋于稳定;10mmol/L的Ca2+有激活和稳定酶活作用,SDS和吐温-80也有激活酶活作用,而Li+、Na+、Zn+、K+、Ba2+、Mg2+、Mn2+和EDTA对酶活均有不同程度的抑制作用;其催化动力学方程为:y=0.186x+32.493;V=0.0308U/mL,K=0.0057g/mL。; 刘书亮吴琦詹莉赖文; 关键词：弹性蛋白酶枯草芽孢杆菌纯化酶学性质

降胆固醇乳酸菌鉴定及其在体外模拟胃肠环境中抗性研究被引量：11: 2011年; 一株源于四川泡菜的具有降胆固醇能力的乳酸菌p5经形态学、生理生化特征和16SrDNA序列分析，鉴定为植物乳杆菌（Lac—tobacillus plantarump5）。在体外模拟胃肠环境中的抗性研究结果表明，p5具有较强耐酸能力，PH值为2．0时，2h活菌数保持在10^6cfu／mL；pH值为2．5时，4h内活菌数仍可保持在106cfu／mL，oH值为3．0-3．5时，p56h内活菌数可保持在106cfu/mL；p5具有耐高浓度胆汁盐的能力，在n1％胆汁盐MRS中，p5表现出生长趋势，在0．2%-0．5％胆汁盐MRS中，p5活菌数下降急速，但6h后活菌数能保持在10^5cfu/mL；p5对肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌等肠道致病菌有明显抑制作用。p5可望作为食品工业用菌种的资源。; 赖文刘书亮张倩颖姜娟; 关键词：乳酸菌植物乳杆菌抗性

HPLC法检测米曲霉降解体系中氯氰菊酯前处理方法的研究被引量：9: 2011年; 针对霉菌降解体系中氯氰菊酯HPLC检测结果重复性差的问题,系统研究了HPLC法检测米曲霉降解体系中氯氰菊酯的前处理方法。结果表明,采取培养液全量取样方式可以解决降解体系中氯氰菊酯分散或分布不均的问题;超声辅助乙腈提取法可使菌体内蓄积或菌体表面吸附的氯氰菊酯得到有效释放。HPLC法对经前处理后降解体系中氯氰菊酯含量进行检测,具有精密度高、重复性和稳定性好、加标回收率高的特点。该方法的建立为微生物降解体系中拟除虫菊酯类农药的准确检测提供了方法参考。; 刘书亮姚开贾冬英赖文赵楠袁怀瑜; 关键词：氯氰菊酯米曲霉 HPLC 前处理方法

氯氰菊酯高效降解菌的筛选鉴定及其降解特性被引量：9: 2012年; 从四川省雅安市茶园土壤中分离到1株能高效降解氯氰菊酯的细菌B-1。根据其形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析(登录号HQ009796),将该菌鉴定为Bacillus licheniformis。菌株B-1以共代谢方式降解氯氰菊酯,对20mg/L氯氰菊酯72h降解率达93.93%,对100mg/L氯氰菊酯240h降解率为70.35%,能检测到其降解中间产物3-苯氧基苯甲酸(3-PBA);菌株B-1对20mg/L溴氰菊酯、氟氯氰菊酯和氰戊菊酯72h降解率分别为95.62%、79.73%和55.67%;菌株B-1对氯氰菊酯降解作用源于其所产生降解酯酶,为非诱导酶,存在于细胞内外,其主要分泌于胞外,同工酯酶电泳进一步表明其胞内外均可能有相同活性降解酯酶带;菌株B-1培养液对小白鼠的急性毒性实验证明其属于实际无毒。; 赖文刘书亮赵楠袁怀瑜; 关键词：氯氰菊酯生物降解地衣芽孢杆菌降解特性

一株氯氰菊酯降解真菌的筛选鉴定及其降解特性研究被引量：7: 2013年; 从雅安市售砖茶中分离筛选出一株对氯氰菊酯具有较高降解能力的真菌菌株YAT,根据其形态学及ITS序列分析,将该菌鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger).菌株YAT在PD培养基中168h内对50mg·L-1氯氰菊酯的降解率为54.83%,对氯氰菊酯的降解率与菌体生物量呈正相关.动力学研究表明,菌株YAT降解氯氰菊酯的过程符合一级动力学方程,在测试的底物(氯氰菊酯)浓度、温度、pH范围内,氯氰菊酯半衰期为85.750～281.958h,较高温度及偏碱性条件有利于氯氰菊酯的降解,底物浓度越高,其半衰期越长.此外,菌株YAT对50mg·L-1溴氰菊酯、氰戊菊酯、氟氯氰菊酯和氯菊酯的120h降解率分别为27.53%、58.00%、53.23%和25.34%.; 王志龙刘书亮姚开袁怀瑜赖文赵楠; 关键词：氯氰菊酯降解黑曲霉

3-苯氧基苯甲酸降解真菌的筛选及其降解特性被引量：10: 2013年; 以传统发酵食品为菌源,经不同质量浓度3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)梯度驯化,筛选出6株具有3-PBA降解能力的霉菌,其中从砖茶中分离的降解菌YAT1可在22h内完全降解PD培养基中100mg/L的3-PBA,根据其形态特征和ITS序列分析(GenBank Accession No.JQ366070),将其鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。动力学研究表明,YAT1降解3-PBA的过程符合一级动力学方程,在测试的底物(3-PBA)质量浓度、温度、pH值范围内,3-PBA半衰期为5.635～12.160h,远远低于其自然降解半衰期(180d),且该反应的速率受pH值影响不大,受底物质量浓度和温度的影响较大。; 袁怀瑜刘书亮王志龙赵楠赖文; 关键词：生物降解黑曲霉降解特性

HPLC-UV法测定微生物降解体系中3-苯氧基苯甲酸含量被引量：12: 2011年; 采用高效液相色谱-紫外(high-performance liquid chromatography with ultraviolet,HPLC-UV)法测定微生物降解体系中3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)的含量。以Gemini 100A C18柱(150mm×4.60mm,5.0μm)为色谱柱,乙腈-水(70:30,V/V)为流动相,流速0.7mL/min,用紫外检测器在210nm处检测3-PBA。结果显示:3-PBA对照品的保留时间为4.268min,线性范围为0.5～50.0mg/L,3-PBA平均回收率为98.919%,RSD为2.78%;运用该方法测得4种不同来源的混合菌株发酵液中3-PBA的残留量分别为24.467、86.266、2.633、1.921mg/L。本法简单、快速、准确、分离度好。; 赵楠刘书亮赖文袁怀瑜

地衣芽孢杆菌分批培养降解氯氰菊酯动力学研究被引量：2: 2016年; 分析10 L发酵罐中地衣芽孢杆菌降解氯氰菊酯的分批培养动力学。以装料系数0.65、体积分数6.25%的接种量、初始pH 7.5、培养温度37℃、转速300 r/min为发酵条件,探讨地衣芽孢杆菌B-1分批培养过程中菌体生长、氯氰菊酯降解酯酶合成、底物消耗及氯氰菊酯降解的规律。在Logistic方程、Luedeking-Piret方程、Luedeking-Piret-Like方程及动力学一级模型的基础上进行非线性拟合,建立了菌株B-1菌体生长、氯氰菊酯降解酯酶生成、基质——葡萄糖消耗和氯氰菊酯降解动力学模型。将实验实测值与模型理论值进行比较,结果表明模型能较好地反映菌株分批培养过程的动力学特征。; 张梦梅胡露赖文姚开刘书亮; 关键词：氯氰菊酯降解动力学模型

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赖文