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谭淑萍

作品数:5 被引量:17H指数:3
供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 2篇转导
  • 2篇腺相关病毒
  • 2篇基因
  • 2篇基因治疗
  • 2篇病毒载体
  • 1篇单纯疱疹
  • 1篇单纯疱疹病毒
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇滴度
  • 1篇信号
  • 1篇信号转导
  • 1篇血友病
  • 1篇血友病B
  • 1篇制备及特性
  • 1篇中和抗体
  • 1篇生长因子Β
  • 1篇转化生长因子
  • 1篇转化生长因子...
  • 1篇疱疹

机构

  • 3篇复旦大学
  • 2篇中南大学
  • 2篇中国疾病预防...
  • 1篇中国科学院研...
  • 1篇863计划生...
  • 1篇中国科学院大...
  • 1篇基因技术股份...

作者

  • 5篇谭淑萍
  • 4篇董小岩
  • 4篇吴小兵
  • 2篇彭忞
  • 2篇彭建强
  • 2篇田文洪
  • 2篇袁振华
  • 1篇曹晖
  • 1篇袁洪
  • 1篇连忠辉
  • 1篇陈立
  • 1篇陈方平
  • 1篇薛京伦
  • 1篇吴晓东

传媒

  • 2篇病毒学报
  • 1篇世界华人消化...
  • 1篇中华血液学杂...
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2004
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
抗AAV2单克隆抗体的制备及特性研究
2009年
以纯化的重组AAV2病毒颗粒为抗原免疫小鼠,获得7株稳定分泌抗AAV2衣壳蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其中B10和G4两株单克隆抗体具有中和活性,抗体亚型分别为IgG1和IgG2a型。对这两株单克隆抗体与rAAV病毒结合的特性进行了研究。单克隆抗体B10和G4对rAAV2病毒颗粒的结合均具有良好的血清型特异性,并且这种特异结合作用不被肝素阻断。这两株抗体都不阻断AAV2病毒与敏感细胞的结合,提示它们与病毒颗粒的结合位点都不处于AAV2病毒与主要受体结合的部位内。Western blotting检测结果显示,B10与AAV2的三种衣壳蛋白VP1、VP2和VP3均能结合,而G4不能与AAV2的这三种衣壳蛋白结合。这说明B10与AAV2结合的位点位于衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的重叠部分处并且可能是线性表位,而G4则可能是针对AAV2病毒颗粒构象表位的抗体。这两种结合特性不同的单克隆抗体为研究AAV2病毒颗粒的表面特性和感染特性提供有用的工具。
谭淑萍袁振华田文洪董小岩吴小兵
关键词:单克隆抗体中和抗体
一种高效快速浓缩腺相关病毒载体的方法被引量:4
2005年
腺相关病毒载体(adeno associatedviralvector,AAVvector)是一种具有良好应用前景的基因治疗载体。研究中往往需要高滴度的重组AAV病毒(>105v g /细胞),为此利用完整的腺相关病毒颗粒具有耐受有机溶剂的特点,创造性地采用了一种用乙醇沉淀重组AAV病毒的方法,达到了高效、快速浓缩AAV载体的目的。结果表明,乙醇沉淀法可以高效浓缩AAV载体,并且对病毒的结构和活性没有明显影响。用这种方法可以方便地将低滴度的AAV病毒变成高滴度,解决动物体内实验中每点注射体积受到限制的问题。
彭建强彭忞谭淑萍曹晖连忠辉董小岩吴小兵
关键词:腺相关病毒载体滴度基因治疗载体
肝纤维化与TGF-β和以其为靶位点的治疗策略被引量:6
2006年
肝纤维化是细胞外基质(ECM)在肝脏中过量堆积的结果,是几乎各种慢性肝病的共同病理基础.转化生长因子β(TGF-β)是一类能够调节细胞生长和分化的多肽,在肝纤维化的发生、发展过程中起着重要作用,是最重要的促肝纤维化细胞因子之一.在细胞及分子水平上,肝纤维化主要以肝星状细胞(HSC)的活化和TGF-β的异常活性为特征.TGF-β-Smads信号转导通路与肝纤维化的发病机制具有密切关系,为肝纤维化的防治与治疗提供了新的有效途径.我们综述了肝纤维化与TGF-β-Smads信号转导通路的关系和以TGF-β为靶位点进行肝纤维化的治疗策略.
谭淑萍吴晓东
关键词:肝纤维化转化生长因子Β信号转导
重组AAV2/hFⅨ病毒制备及其基因治疗血友病B的实验研究被引量:4
2004年
目的 制备携带人凝血因子Ⅸ (hFⅨ )基因的重组AAV2病毒 (rAAV2 /hFⅨ ) ,并对用rAAV2 /hFⅨ肌肉注射治疗血友病B模型小鼠的疗效进行评价。方法 通过“一株载体细胞 /一株辅助病毒”的双因素包装策略制备出rAAV2 /hFⅨ ,体外转导BHK 2 1、C2C12细胞后 ,检测细胞培养上清中hFⅨ的表达量 ;肌肉直接注射血友病B模型小鼠后 ,检测其血浆中hFⅨ的抗原水平和凝血活性等指标。结果 转导 2 4h后在细胞上清中即可检测到hFⅨ ,连续检测 12 0h都有表达 ,BHK 2 1、C2C12细胞 2 4h最高表达量分别达到 (5 1.0± 6 .5 )ng/ 10 5细胞和 (6 8.0± 7.2 )ng/ 10 5细胞。rAAV2 /hFⅨ经肌肉直接注射后 ,高、中、低三个剂量组均能检测到小鼠体内高效表达hFⅨ ,在给药后第 3周达到高峰 ,小鼠血浆中hFⅨ的表达量与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ,之后缓慢下降 ,到第 10周仍可检测到低水平hFⅨ表达 ;取第 3周小鼠血浆样品检测凝血功能 ,高、中、低剂量组FⅨ活性均得到明显改善 ,小鼠的割尾实验出血时间明显缩短 ,5min失血量也相应显著减少 ,其中高剂量组hFⅨ最高表达量达到 (387.0± 12 .5 )ng/ml血浆 ,FⅨ活性达到正常水平的 (30 .0± 5 .5 ) % ;给药后第 10周 ,除在注射点外 ,其它主要脏器均未检测到AAV载体DNA。
彭建强董小岩彭忞陈立谭淑萍袁洪陈方平薛京伦吴小兵
关键词:血友病B模型小鼠基因治疗C2C12细胞转导
新型重组AAV5/5载体及包装系统被引量:3
2010年
本研究组建了一种可用于规模化生产的以重组单纯疱疹病毒为辅助病毒的AAV5/5载体包装系统。首先,将5型腺相关病毒(AAV5)的rep和cap基因插入I型单纯疱疹病毒(HSV-1)基因组非必需基因UL2中,获得重组病毒rHSV1-rep5cap5。其次,构建一种携带AAV5ITR的通用型载体质粒pAAV5neo,将报告基因EGFP插入pAAV5neo中,得到pAAV5neo-EGFP质粒。将pAAV5neo-EGFP质粒导入BHK-21细胞,用G418选择培养,挑选出表达EGFP并在重组病毒rHSV1-rep5cap5感染下能高效产生rAAV5/5-EGFP的单克隆载体细胞株C020。用rHSV1-rep5cap5感染C020细胞制备rAAV5/5-EGFP,用"氯仿处理-聚乙二醇/氯化钠-氯仿抽提"方法粗纯化rAAV5/5-EGFP。用100kDa分子量截流超滤方法进一步纯化和浓缩,获得高纯度的rAAV5-EGFP。SDS-PAGE电泳分析可见3条特征性外壳蛋白带。电镜分析显示病毒颗粒以实心颗粒为主。用rAAV5/5-EGFP病毒按1×105vg/cell感染体外培养的HEK293细胞,可见30%细胞呈现绿色荧光。本研究提出了一种高效AAV5/5载体生产系统和纯化方法,为重组AAV5载体的进一步应用提供了基础。
董小岩田文洪袁振华谭淑萍吴小兵
关键词:病毒载体
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