公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选被引量：4: 2000年; 目的　构建人丙型肝炎病毒 (HCV)特异性噬菌体抗体库 ,制备人源抗HCV单克隆抗体 (mAb)。方法　用常规RT PCR法 ,直接从 5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中 ,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因 ,与噬菌体载体pComb3连接 ,构建噬菌体抗体Fab库。对抗体库进行 5轮吸附 -洗脱 -扩增的亲和选择后 ,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体。结果　RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因 ,并以此构建成容量为 1 2× 10 7的噬菌体抗体库。经 5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集 ,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达 96 %。结论　抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备 ,为HCV感染的诊断。; 张建琼张雪萍谢维林陵单祥年王琰; 关键词：噬菌体抗体库丙型肝炎病毒人源单克隆抗体

AT基因突变与食管癌及结肠癌的关系: 2000年; 目的 :探讨共济失调毛细血管扩张症 (AT)基因突变与食管癌及结肠癌发病的关系。方法 :运用PCR SSCP及DNA同位素测序等技术 ,对 17例食管癌和 15例结肠癌患者的AT基因第 41～ 5 1外显子进行突变检测。结果 :15例结肠癌标本的SSCP带型与正常对照组织无差异 ;17例食管癌标本中有 1例SSCP带型比正常对照组织多一条带 ,测序发现 ,该例标本在AT基因第 49外显子发生单碱基缺失。结论 :AT基因突变可能与某些类型的食管癌发病有关。; 管青山单祥年谢维周晓雷; 关键词：食管癌结肠癌

应用PCR从丙型肝炎患者外周血B淋巴细胞扩增抗体基因被引量：2: 2000年; 用常规RT PCR法 ,以 1组人抗体重链和轻链简并引物 ,直接从 5名丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd基因和κ轻链基因。结果提示 ,用Trizol试剂提取细胞总RNA ,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链 ,再经PCR扩增的方法 ,是值得优先采用的方法。细胞总RNA的提取不必追求高纯度 ,少量外周血即足以满足构建抗体库所需 ,简并引物可获得良好的扩增效果。; 张建琼张雪萍林陵谢维单祥年; 关键词：抗体基因外周血淋巴细胞丙型肝炎 PCR

人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建、筛选及表达被引量：12: 2000年; 用常规RT PCR法 ,直接从 5名丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因 ,构建噬菌体抗体Fab库。对抗体库进行 5轮吸附洗脱扩增的亲和选择后 ,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体。 5轮亲和选择使特异性噬菌体抗体得到高度富集 ,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达 96 %。对一阳性克隆在大肠杆菌中表达 ,经ELISA及Westernblot分析鉴定 ,证实成功表达出人源可溶性Fab。对抗体基因VH和VκDNA序列进行测定 ,证实所获基因为抗体可变区基因。抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCV单克隆抗体Fab段的制备 ,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具。; 张建琼谢维张雪萍林陵单祥年王琰; 关键词：噬菌体抗体库抗丙型肝炎病毒

PCR扩增人外周血淋巴细胞抗体基因的探讨被引量：1: 1999年; 采用ＲＴ－ＰＣＲ法，以一组人抗体重链和轻链简并引物，直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Ｆｄ和κ轻链基因．结果提示：用Ｔｒｉｚｏｌ试剂提取细胞总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇ（ｄＴ）引导合成ｃＤＮＡ第一链，再经ＰＣＲ扩增的方法，是值得优先采用的方法．细胞总ＲＮＡ的提取不必追求高纯度，少量外周血即足以满足构建抗体库所需，简并引物可获得良好的扩增效果。; 张建琼单祥年张雪萍林陵谢维; 关键词：聚合酶链反应抗体基因外周血淋巴细胞 PCR

含有FXa切割位点的抗菌肽X在大肠杆菌中的融合表达被引量：10: 2000年; PCR method was used to introduce the code sequence of Factor Xa cleavage site to the 5′ end of cecropin CMIV mutant gene X,then the gene was cloned into the expression vector pGEX KG,and was highly expressed in E.coli BL21 by IPTG induction.The fusion protein was purified by affinity chromatography and was cleaved by Factor Xa.Cecropin X with antibacterial activity was obtained after purified by ion exchange chromatography.; 袁榴娣窦非梁玉璞谢维王芳张双全戴祝英; 关键词：抗菌活性

快速检测尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒6型和11型DNA的研究被引量：5: 1993年; 本文应用聚合酶链反应技术对30例人生殖器尖锐湿疣组织中HPV6,11 DNA的存在进行了检测研究。结果发现HPV6,HPV11 DNA的阳性率分别为60％,90％HPV6,HPV11 DNA双重检出率为53.3％,总阳性率达96.7％,本文结果证实HPV6,11的感染和尖锐湿疣的发生密切相关。本文检测方法具有快速,灵敏、特异性强的优点,为HPVDNA的检测及其分型研究提供了有效的手段。作者还对两例女阴假性湿疣进行PCR扩增,结果似乎不支持女阴假性湿疣的HPV感染的病因学。; 李明发麻晓迁谢维单祥年蒋清茅一萍刘季和常宝珠孙建方杨志坚; 关键词：生殖器尖锐湿疣女阴假性湿疣人乳头瘤病毒聚合酶链反应

抗菌肽CMIV变体的制备及对临床耐药致病菌作用的初步研究被引量：3: 1997年; 应用新的融合方法制备抗菌肽ＣＭＩＶ变体；了解重组型抗菌肽变体对几株临床耐药菌的抗性。通过基因工程的手段，将合成的抗菌肽ＣＭＩＶ的ｃＤＮＡ与根据金黄色葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）的ＩｇＧ结合结构域设计并合成的ＺＺ结构域基因融合，在大肠杆菌细胞中表达；用制备的ＣＭＩＶ变体进行抑菌圈试验和液相试验。结果表明５ｕｌ（１０ｕｍｏｌ／Ｌ）抗菌肽可在大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１平板上产生直径１５ｍｍ的抑菌圈；抑制５０％大肠杆菌生长的抗菌肽浓度约０．２ｕｍｏｌ／Ｌ。６种青霉素抗性的革蓝氏阴性菌的抑菌圈直径在６～１３ｍｍ之间；而同样的条件下，对革蓝氏阳性菌——金黄色葡萄球菌的作用很弱。用新的融合方法可通过大肠杆菌体系制备有活性的抗菌肽变体。; 谢维谢维张雪萍张建琼邱奇峰张雪萍; 关键词：抗菌肽抑菌试验致病菌生物制品

含凝血因子FXa识别位点的融合表达体系的构建被引量：1: 2000年; 目的 :研究含凝血因子FXa识别位点的基因与表达载体pGEX KG连接后在大肠杆菌中的表达。方法 :用PCR对人工合成的抗菌肽X基因的 5′端进行改造 ,引入FXa的酶切位点 ,用限制性内切酶作用后 ,连接到含Ptac启动子的表达载体pGEX KG中 ,转化大肠杆菌DH5α,用原位杂交法筛选到阳性克隆。转化大肠杆菌BL2 1,用异丙基硫代 β D半乳糖(IPTG)诱导。结果和结论 :抗菌肽X基因在大肠杆菌中获高效表达 ,表达量约占细胞总蛋白的 2 0 %。重组蛋白以可溶形式存在。融合蛋白经FXa切割后。; 袁榴娣谢维窦非梁玉璞; 关键词：抗菌肽基因克隆

全选清除导出

共1页<1>

谢维