谌资
- 作品数：27 被引量：106H指数：7
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 湖南艾滋病患者Th17和Tr细胞及IL-17在抗病毒治疗过程中的变化被引量：5
- 2011年
- 目的观察HIV感染者和AIDS患者血IL-17、CD3±CD4±IL-17±细胞（Th17细胞）和CD4±CD25±Foxp3±T细胞（Tr细胞）的平衡状态及其在1年高效抗反转录病毒治疗（HAART）中的变化。方法选取经HAART治疗的HIV／AIDS患者33例，同时选取33例健康志愿者为对照，分别于治疗0、6、12个月采集静脉血，检测血清IL-17水平、Th17细胞及Tr细胞百分比，并对比分析其相互关系。结果HIV／AIDS在HAART治疗前、治疗6个月、12个月及健康对照外周血的Thl7细胞在CD4±T细胞中的比例分别为（1．20±0．37）％、（2．50±1．03）％、（3．70±1．56）％和（4．70±1．43）％；Tr细胞在CD4’T细胞中的比例分别为（9．16±3．33）％、（7．19±2．91）％、（5．53±1．88）％和（4．43±0．97）％；血清IL—17水平分别为（5．3-±2．5）pg／ml、（7．7±2．4）vg／ml、（10．4±3．1）pg／ml和（17．7±6．6）pg／ml。Th17细胞水平与CD4±T细胞计数正相关，与病毒载量负相关；Tr细胞水平与CD4±T细胞计数负相关，与病毒载量正相关。结论HIV感染导致IL-17、Th17细胞和TT细胞的失平衡，而HAART治疗可能逐渐恢复二者的免疫平衡状态。提示三者可能在艾滋病发病机制中起作用，并有可能成为观察艾滋病进展和HAART治疗效果的有效指标。
- 李靖何艳郑煜煌周华英谌资陈霞罗艳姚运海贺梅
- 关键词：艾滋病TH17细胞IL-17高效抗反转录病毒治疗
- HAART治疗1年对HIV/AIDS患者免疫重建效果观察被引量：12
- 2012年
- 目的研究高效抗反转录病毒治疗(HAART)1年,对HIV/AIDS患者免疫重建效果的影响。方法确认人免疫缺陷病毒(HIV)感染者35例,检测CD4+T淋巴细胞<350/μL,开始HAART治疗,并于治疗0、6、12个月时分别检测其病毒载量及CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+童贞细胞、CD4+记忆细胞、CD8+激活细胞计数。结果治疗前,HIV RNA处于高复制水平,平均(4.62±1.09)×106copies/mL,HAART治疗6个月及12个月时均低于检测下限。患者的CD4+T淋巴细胞、CD4+童贞细胞和CD4+记忆细胞均明显增加,12个月时,各组细胞计数[分别为(312±109.22)/μL、(150±57.34)/μL、(212±48.06)/μL]与基线[分别为(183±83.73)/μL、(73±20.40)/μL、(119±30.42)/μL]比较,差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于健康对照组[分别为(768±146.41)/μL、(424±87.06)/μL、(442±61.40)/μL](P<0.05);CD8+T淋巴细胞计数(427±99.79)/μL较基线(597±111.43)/μL明显下降(P<0.05),但仍高于健康对照组(208±37.39)/μL(P<0.05)。结论 HAART能快速抑制HIV复制,治疗1年能部分恢复HIV/AIDS患者免疫功能。
- 罗艳何艳姚运海郑煜煌周华英曾飔谌资
- 关键词：人免疫缺陷病毒高效抗反转录病毒治疗CD4+T淋巴细胞CD8+T淋巴细胞
- 艾滋病HAART治疗免疫重建炎性综合征的免疫机制初步研究被引量：10
- 2011年
- 目的 为探讨我国艾滋病病人（AIDS）启动高效抗反转录病毒治疗（HAART）后,发生免疫重建炎性综合征（IRIS）的免疫学发病机制,在前瞻性研究队列中对启动HAART的AIDS病人部分淋巴细胞亚群、调节性T细胞和部分Th1和Th2细胞因子等进行追踪分析.方法 将接受HAART初始治疗的238例AIDS病人建立前瞻性研究队列,分为在24周内发生IRIS的47例病人（IRIS组）和未发生IRIS的191例病人（非IRIS组）.在HAART的0周、12周和24周采集两组血标本,对47例IRIS病例及随机选择的50例非IRIS病例进行免疫机制的研究分析,检测HIV病毒载量和CD4＋细胞计数;使用流式细胞术检测部分淋巴细胞亚群和调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋）.在HAART的0周、4周、12周、24周及发生IRIS时分别采集全部238例患者的血标本,使用ELISA法测定血浆细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10以及IL-7水平.结果 两组感染者的CD4＋、CD8＋纯真细胞和记忆细胞比例在0周、12周、24周及发生IRIS时比较差异均无统计学意义,但CD4＋记忆细胞和CD8＋记忆细胞比例在启动HAART后均明显上升.两组感染者CD4＋CD38＋活化细胞和CD8＋CD38＋活化细胞比例在基线时均较正常值明显升高,治疗后均有下降趋势.在0周、12周、24周及发生IRIS时CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞在IRIS组中均较非IRIS组要低.两组IL-2及IFN-γ在HAART后均呈上升趋势,且IRIS组在4周及发生IRIS时更明显高于非IRIS组;两组IL-4及IL-10在HAART后均呈下降趋势,IRIS组中IL-10在4周及发生IRIS时更明显低于非IRIS组.IL-7在两组中基线时均较正常值升高,并随HAART进程逐渐降低,其中IRIS组在各随访点IL-7均要高于非IRIS组.结论 接受HAART治疗者早期即出现记忆T细胞快速上升,在IRIS炎症反应中可能起重要作用.IL-2、IL-10和IFN-γ在发生IRIS时的水平差别,提示IRIS的发生与炎性细胞因子大量增加,炎性抑制因子相对不足有一�
- 郑煜煌刘猛周华英何艳周国强谌资陈霞贺梅加路姚运海郑力文
- 关键词：艾滋病HAART治疗免疫重建免疫机制RECONSTITUTION
- T淋巴因子变化对免疫重建炎性综合征发生的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 了解HIV/AIDS启动高效抗逆转录病毒治疗（HAART）后免疫重建炎性综合征（IRIS）发生基本情况,观测代表Th1/Th2平衡间的主要淋巴因子在HAART前及HAART启动后的基础及变化水平,探索IRIS可能的免疫病理机制.方法 采用前瞻性研究,对进行高效抗逆转录病毒治疗（HAART）的HIV/AIDS进行为期6个月跟踪随访观察,确立IRIS组及非IRIS组,并进行代表Th1/Th2平衡关系的主要T淋巴因子：IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10的检测,与健康组对照同时并对HAART前、HAART启动后1、3和6个月时变化水平进行比较.结果 一共观察HAART初始启动的病例共212例.HAART启动6个月内共诊断IRIS59例,IRIS中位发生时间在启动HAART后第21天（四分位间距时间为19 d）.发生的疾病谱主要包括结核病、疱疹病毒感染、肺胞子菌肺炎等.不论是在IRIS组还是在非IRIS组,代表Th1/Th2平衡关系的主要淋巴因子IL-2、INF-γ与IL-4、IL-10的水平,其HAART前基础值均较正常人群检测值分别有降低与增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,在HAART启动后则分别表现出逐步增高与下降而恢复平衡的趋势,两组HAART6个月后的值较HAART前基础值差异均有统计学意义（P＜0.05）.而IRIS组HAART前上述淋巴因子的基础值与正常对照变化程度较非IRIS组更加明显,在HAART启动后1个月（IRIS高发阶段）,IL-2、INF-γ的增高水平[（11.68±2.89）pg/ml vs（8.52±2.26）pg/ml;（22.19±6.22）pg/ml vs（18.34±5.35）pg/ml]与IL-10的下降水平[（19.21±4.03）pg/mlvs（23.19±5.92）pg/ml]在两组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 （1）本研究中HIV/AIDS在启动HAART 6个月内的IRIS发生率为27.8%,多发生于HAART启动后1个月内,最常见疾病谱为结核病、疱疹病毒感染等感染性疾病.（2）IRIS组及非IRIS组在HAART前均存在Th1/Th2的失衡,前者的失衡趋向更明显,在HAART开始后都有恢复平衡的趋势,其中Th1的代表因子IL-2、IN
- 周国强郑煜煌刘猛王敏肖钢何艳周华英谌资
- 并非在军队流行
- 2012年
- 1976年的美国，正值建国200周年，一片欢庆气氛。此时，美国退伍军人协会（俗称“美国军团”）恰在费城“斯特拉福美景”饭店召开年会。不料，大会期间相继有与会人员病倒，且症状类似，如高热、咳嗽、呼吸困难，伴有腹痛、腹泻等症状，少数有意识障碍、震颤等神经系统表现。共有221人得病，34人死亡。因无法查明病因，全美陷入一片惊恐之中，甚至有人怀疑是敌对国家发动了毒气战。
- 郑煜煌谌资
- 关键词：军队神经系统表现退伍军人症状类
- 不同变异位点的HIV-1 vpr重组真核表达载体对转染细胞凋亡作用的观察被引量：7
- 2009年
- 目的观察不同的人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的vpr基因变异株致宿主细胞凋亡作用的区别，及其可能的机制。方法14个带有不同变异位点的中国感染者HIV-1 vpr基因片断，其PCR产物纯化后经HindⅢ和BamHⅠ双酶切，以pcDNA3．1（＋）真核表达质粒连接转化实验，将重组质粒用脂质体瞬时转染至HeLa细胞，G418筛选后收获细胞。RT-PCR检测目的基因mRNA水平的表达，荧光染色在显微镜下观察Hoeschst凋亡细胞并计算凋亡率，DNA琼脂糖电泳观察各转染细胞凋亡条带，膜联蛋白V-FITC流式细胞检测各株细胞凋亡率，并比较各株细胞的半胱酸蛋白水解酶3活性差别。结果14个vpr基因片段转染HeLa细胞后，发现有第70、85、86或94位变异的vpr转染细胞Hoeschst染色凋亡率和半胱酸蛋白水解酶3活性检测（分别为0．1225，0．1675，0．1975，0．1575和11．356，8．021，14．6875，10．521）较无这些变异的保守序列vpr转染细胞（0．355和182．4875）为低，DNA琼脂糖电泳法和膜联蛋白细胞凋亡检测也提示同样的规律；第1～7号重组质粒（均为vpr AE亚型）的致细胞凋亡能力也明显小于第8～14号重组质粒（vpr B，AB，C和C／BC亚型）。结论首次观察到有第70、85、86或94位变异的HIV-1 vpr序列，其致HeLa细胞凋亡的能力低于无这些位点变异的保守序列，AE亚型诱导宿主细胞凋亡能力低于其他亚型，其机制之一与半胱酸蛋白水解酶3途径激活降低有关。
- 郑煜煌张春迎何艳龚国忠李慧谌资刘猛周华英李瑛刘纯李靖周国强尹伟袁宏丽
- 关键词：HIV-1凋亡
- 禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的重组牛痘病毒表达被引量：1
- 2009年
- 目的研究H5 I151F和H5 I151F＋A134V＋E186D两种氨基酸变异对血凝素蛋白（HA）亲人受体结合的影响，并获得该HA。方法构建载体pRB21’，共感染／转染vp37^-牛痘病毒vRB12和pRB21’，基因同源重组牛痘病毒表达HA，Western免疫印迹法鉴定。结果获得了克隆有H5HA全长基因片段的载体pRB21’，构建了2种重组牛痘病毒re-VV H5 I151F和re-VV H5 I151F＋A134V＋E186D，且能在被感染细胞膜表达这两种HA。结论首次通过构建重组牛痘病毒成功表达了禽流感病毒H5N1的H5HA，为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性奠定了基础。
- 谌资郑煜煌Yipu Lin
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型血凝素蛋白传染病
- 表达HIV Vpr细胞株的建立及其促细胞凋亡作用的研究被引量：5
- 2008年
- 目的建立稳定表达人免疫缺陷病毒（HIV）Vpr蛋白的细胞株，观察Vpr蛋白促进感染细胞凋亡的特性，以及Vpr变异后对其致凋亡作用的影响。方法以携带野生株HIV vpr基因和突变株HIV vpr—FS基因的质粒分别转染HeLa细胞，建立稳定表达HIV Vpr蛋白的细胞株，以流式细胞仪和细胞内DNA片段分析法检测细胞凋亡效果，观察Vpr蛋白促细胞凋亡的特性，以及两者致凋亡作用的区别。结果重组质粒pcDNA3．1-vpr和pcDNA3．1-vpr-FS经酶切后均可获得342bp产物，DNA测序结果与目的基因已知序列完全一致；上述质粒转染的HeLa细胞，RT-PCR检测到目的基因vpr或vpr-FS的表达，Western blot检测到明显Vpr或Vpr—FS蛋白的表达。流式细胞仪和细胞内DNA片段分析法分别检测细胞凋亡，显示野生株HeLa pcDNA3．1-vpr组的凋亡率明显高于对照组，而变异株HeLa pcDNA3．1-vpr-FS的凋亡率与对照组无明显差别。结论成功建立了表达HIV Vpr和HIV Vpr—FS蛋白的感染细胞株。实验显示HIV Vpr蛋白能促进感染细胞的凋亡，而Vpr蛋白的变异可能使其促进细胞凋亡作用减弱。实验结果为下一步研究提供了基础资料。
- 丁佩佩郑煜煌龚国忠谌资周华英张春迎刘猛刘纯袁宏丽李瑛李慧
- 关键词：人免疫缺陷病毒VPR基因凋亡
- 艾滋病抗病毒治疗中外周血细胞病毒库的动态变化及其意义被引量：9
- 2013年
- 目的:观察中国HIV-1感染者和AIDS病(HIV/AIDS)患者在两年高效抗反转录病毒治疗(highly activeantiretroviral therapy,HAART)过程中,外周血NK细胞、T淋巴细胞以及单核细胞3种HIV-1病毒储存库的动态变化及其与治疗效果的关系。方法:40例初次接受HAART的HIV/AIDS患者被纳入本研究并随访2年。在启动治疗0,6,12,18,24个月后,检测其外周血HIV-1 RNA病毒载量,CD4+T细胞数量,NK细胞、单核细胞和T淋巴细胞内的HIV-1 DNA水平,对数据进行统计学处理及相关性分析。结果:40例随访患者随着HAART的进行,患者的CD4+T细胞计数水平逐步上升,血清HIV-1 RNA水平逐步下降;同时3种细胞(外周血T淋巴细胞、NK细胞)中的HIV-1 DNA载量也在逐步下降,与血清RNA载量的下降一致,3种细胞中的平均HIV-1 DNA载量与外周血HIV RNA水平之间呈正相关(P<0.05)。外周血T淋巴细胞、NK细胞中HIV-1 DNA水平在治疗基线及治疗后均与外周血CD4+T细胞计数均呈负相关(P<0.05);而单核细胞内HIV-1 DNA在治疗基线与CD4+T细胞计数无相关性(P>0.05)。结论:中国HIV-1感染者外周血中NK细胞、T淋巴细胞和单核细胞均是HIV-1的病毒储存库之一。T淋巴细胞可能是HIV病毒最主要的细胞储存库。HIV-1前病毒DNA的检测对于抗病毒治疗疗效的判断以及病情进展的预测都有着重要的意义。
- 陈霞郑煜煌加路何艳周华英谌资罗艳贺波贺梅姚运海
- 关键词：人类免疫缺陷病毒高效抗反转录病毒NK细胞
- 禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的细胞膜上提纯和结晶
- 2009年
- 目的从细胞膜上提纯禽流感病毒H5N1的血凝素蛋白H51151F和H51151F＋A134V＋E186D，并使蛋白结晶。方法细胞内大量增殖重组牛痘病毒，去垢剂提取细胞膜中的HA蛋白，连续蔗糖密度梯度超速离心，Western印迹检测，菠萝蛋白酶等裂解HA，离子交换层析，SDS—PAGE电泳并染色检测蛋白纯度，坐滴气象扩散法结晶。结果从细胞膜中提取了高纯度的血凝素蛋白H51151F和H51151F＋A134V＋E186D，并得到了H51151F蛋白晶体。结论首次获得了禽流感病毒H5N1的I-IS1151F蛋白晶体，为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性打下基础。
- 谌资郑煜煌Yipu LinDavid J StevensSteve A WhartonPatrick J CollinsJunfeng LiuAlan J Hay
- 关键词：流感流感病毒A型
