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一种A型单端孢霉烯族毒素的LAMP检测引物组合及其LAMP检测试剂盒和LAMP方法: 本发明公开了一种检测A型单端孢霉烯族毒素的LAMP引物组合和LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP引物组合由正向外引物F3，反向外引物B3，正向内引物FIP，反向内引物BIP和反向环引物LB组成。本发明的检测方...; 张昊冯洁徐进许景升; 文献传递

福建烟草青枯菌演化型及生化变种鉴定研究被引量：21: 2010年; 本研究尝试采用国际上新兴的青枯菌演化型分类框架并结合传统的生化变种鉴定方法,旨在探究福建省烟草青枯病菌系的构成,从而揭示青枯病的流行规律,为指导烟草青枯病的抗病育种提供理论依据。2008~2009年,分别于福建省南平、三明以及龙岩地区田间烟草病株上分离获得了45个烟草青枯病菌株。经青枯菌演化型复合PCR检测,45个菌株均能够扩增得到片段大小分别为144 bp和280 bp的两条特异性扩增条带,从而表明全部分离菌株均系青枯菌演化型I型即亚洲分支菌株。继而基于45个分离菌株对3种双糖和3种己醇氧化利用能力的检测结果,鉴定出其中43个菌株属于青枯菌生化变种III,1个菌株属于生化变种IV,1个菌株属于非标准型生化变种（能利用山梨醇和甜醇,不能利用3种双糖和甘露醇）。该研究结果部分揭示了造成国外引进的烟草品种青枯病抗性水平下降或丧失的可能原因。; 徐进顾钢潘哲超吴畏许景升张昊陈顺辉冯洁; 关键词：烟草青枯菌

一种与抗黄矮病基因Bdv2连锁的同源序列及其应用: 本发明公开了一种抗黄矮病基因Bdv2连锁的抗病同源序列及其专用引物与应用。该连锁序列TirgaZ1的碱基序列如SEQIDNO：1所示。本发明还提供了一种筛选抗黄矮病候选基因的方法，以TirgaZ1为探针，筛选得到了四个抗...; 张增艳辛志勇许景升王晓萍刘耀光林志珊李连城马有志徐惠君陈孝; 文献传递

长江中下游地区亚洲镰刀菌NX-2毒素群体的检测被引量：4: 2016年; 由禾谷镰刀菌复合种(Fusarium graminearum species complex,FGSC)引起的麦类赤霉病,是农业生产上的重要病害。为明确中国长江中下游冬小麦主产区小麦赤霉病菌种的构成及其地理分布,对2008年从江苏、浙江和湖北3省采集的656株小麦赤霉病菌株进行了分类鉴定。结果显示,其中558个菌株为亚洲镰刀菌(Fusarium asiaticum),98个菌株为禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum sensu stricto),表明中国长江中下游冬小麦主产区小麦赤霉病的主要致病菌是亚洲镰刀菌。选择亚洲镰刀菌(F.asiaticum)为研究对象,通过PCR-RFLP的方法对其进行产NX-2毒素菌株的检测。结果没有检测到产NX-2毒素菌株,表明中国长江中下游冬小麦主产区并未出现NX-2毒素群体。本研究旨在了解NX-2毒素群体在中国长江中下游地区的地理分布,为进一步研究麦类赤霉病菌群体遗传多样性和演化趋势奠定基础,为麦类赤霉病的防治和毒素污染的控制提供理论依据。; 罗文张昊许景升徐进冯洁; 关键词：小麦赤霉病

PMA-qPCR定量检测青枯菌活菌方法的建立被引量：10: 2018年; 本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与荧光实时定量PCR技术相结合,建立了一种适于青枯菌不同小种菌株活细胞精准、快速检测的PMA-qPCR方法。通过单因素变化试验对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化,确立了PMA终浓度为15 ng/μL,黑暗孵育时间为10 min,曝光时间为5 min的PMA预处理体系。试验结果表明,当活菌比例大于10%,PMA-qPCR的测定结果均在理论活菌数相对应的95%置信区间内。检测灵敏度测试结果显示,该方法适用于活菌数在5.0×10~2～5.0×10~8 cfu/mL范围内菌悬液的检测。本文建立的PMA-qPCR方法可在一定范围内有效去除青枯菌死菌的干扰,定量检测出活菌数量,研究结果可为植物细菌性青枯病的流行规律研究提供新的技术支撑。; 王帅徐进许景升张昊冯洁; 关键词：青枯菌

植物青枯菌aac基因克隆及猝灭群体感应信号功能的研究被引量：7: 2008年; 【目的】研究植物青枯菌(Ralstonia solanacearum)aac基因编码的蛋白是否具有降解细菌群体感应信号分子的功能。【方法】PCR扩增获得青枯菌GMI1000菌株的aac基因,将aac基因克隆到pET-5a原核表达载体上,在大肠杆菌中表达出AAC融合蛋白,将AAC融合蛋白与胡萝卜软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovorasp.carotovora)混合后,共接种于马铃薯块茎,研究细菌致病力的变化。【结果】克隆了全长的aac基因,完成了aac基因原核表达载体的构建,研究了AAC融合蛋白对细菌致病力的影响。【结论】青枯菌aac基因编码的蛋白具有减弱胡萝卜软腐欧氏致病力的功能,为开发新的控害策略提供了依据。; 张争徐进许景升何礼远冯洁; 关键词：植物青枯菌克隆猝灭

PMA-PCR方法快速检测VBNC状态青枯菌被引量：6: 2016年; 青枯菌为应对逆境胁迫,可进入活的但非可培养状态(viable but non-culturable,VBNC)。本文利用叠氮溴化丙锭(PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分青枯菌死活细胞的分子检测方法。基于hrcS基因序列,设计了一对青枯菌种特异性检测引物hrcSf/hrcSr;利用PMA对青枯菌Po82菌株的细胞悬浮液样品进行预处理,随后进行常规PCR扩增。结果表明,当样品中PMA质量浓度为3μg/mL、曝光时间大于5min时,PMA可有效抑制死亡菌体细胞中的DNA扩增;且对可培养和VBNC状态细胞中的DNA扩增没有影响;本试验建立的PMA-PCR方法能有效对包括VBNC状态在内的青枯菌活菌进行检测,避免了假阳性与假阴性结果的产生。; 于小龙徐进张昊许景升黄雯胡晓梅冯洁王学利; 关键词：青枯菌

高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化被引量：3: 2008年; 通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施,建立并优化了PCR扩增体系,成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2 434 bp且GC含量高达70.9%的aac基因。PCR反应体系为20μL包括5%DMSO2、.5 mmol/L MgCl2、500μmol/L dNTP、10 pmol/L引物1、.25 UTaq酶、50 ng模板DNA。首先采用热启动PCR:95℃5 min,保持80℃,加入Taq酶;然后采用二步PCR:5个循环包括变性95℃1 min,65℃1 min;最后采用降落PCR:30个循环为95℃1 min,78℃1 min,每个循环降低0.5℃,72℃3 min;补充10个循环为95℃1 min,63℃1 min,72℃3 min;72℃10 min。该试验体系的建立与优化为研究高GC含量生物的基因功能提供了方法。; 张争张杨徐进许景升何礼远冯洁; 关键词：PCR 正交试验

一种同时检测三类镰刀菌毒素的快速分子检测方法与应用: 本发明专用于检测三类最常见的镰刀菌毒素，属于植物检疫技术领域，具体的说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。该方法根据镰刀菌基因组内与毒素合成密切相关的Tri11基因，自行设计一组复合引物，从中国和国外采集得到的镰刀菌中...; 张昊冯洁徐进许景升潘哲超张力勍田茜; 文献传递

用基因芯片技术分析水稻白叶枯病菌侵染过程的基因表达图谱: 水稻白叶枯病是由水稻黄单胞细菌(Xan thomonas oryzae pv．oryzae,简称Xoo)侵染引起的。对Xoo致病机理的研究已从传统生物学、生理生化学逐渐向分子生物学以及新近发展起来的基因组学方向发展。已经...; 张新建许景升何晨阳; 关键词：水稻白叶枯病菌基因芯片致病过程

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许景升

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