袁长青
- 作品数：7 被引量：121H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学热带军队卫生学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- AIF重组质粒的构建、表达和功能的研究
- 2005年
- 目的构建人凋亡诱导因子(AIF)基因功能片段的真核表达载体pcDNA3.1(+)AIF,并初步研究AIF在细胞凋亡中的作用。方法从人细胞中提取总RNA,RTPCR扩增AIF基因片段;克隆到pMD18T载体上,通过酶切和测序进行鉴定;将AIF基因片段插入pcDNA3.1(+),构建真核表达载体;电转化淋巴母细胞Raji细胞,观察AIF的表达水平和功能。结果成熟AIF蛋白分子在真核细胞中表达,并转移到细胞核中,诱导Caspase非依赖性细胞凋亡。结论成功构建了pcDNA3.1(+)AIF真核表达载体,AIF在Caspase非依赖性细胞凋亡中发挥重要作用。
- 袁长青丁振华马树东凌朝辉刘胜军胡贵方郑莉周美娟欧程山
- 关键词：凋亡诱导因子真核表达载体AIFPCDNA3.1(+)重组质粒RT-PCR扩增
- Caspase的结构与功能被引量：36
- 2002年
- Caspase是执行细胞凋亡的主要酶类 ,绝大部分细胞凋亡依赖于 Caspase的存在。目前已鉴定的哺乳动物 Caspase有 14种 ,它们具有很多共同的特点。Caspase酶原包括 3个部分 :原域、大亚单位和小亚单位。酶原本身的活性很低 ,但可以通过不同的方式被激活。一旦原域以及大、小亚单位之间的连结被切除 ,大小亚单位之间相互作用形成一个异二聚体 ,其中包含一个活性位点 ;两个异二聚体形成一个四聚体 ,成为 Caspase的活化形式。活化的 Caspase是细胞凋亡过程中的关键酶类 ,通过特异性的裂解底物而发挥其执行细胞凋亡的功能。此外 。
- 袁长青丁振华
- 关键词：CASPASE细胞凋亡蛋白酶
- 细胞周期调控及其在肿瘤发生与治疗中的应用被引量：1
- 2002年
- 细胞周期素(cyclin)和细胞周期素依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDK)是细胞周期调控的基本分子[1-2].CDK的活性依赖于cyclin的存在,cyclin-CDK复合体周期性装配、激活和降解是驱动细胞周期有序进行的基本分子机制[3].已经发现cyclin有11种:cyclin A-K,CDK有10种:CDK 1-10.但是在细胞周期过程发挥主要作用的只有:cyclin A、B、D和E,以及CDK1、2、4和6.CDK在大部分细胞中恒定表达,而cyclin的合成与降解仅仅发生在细胞周期的某一时相.cyclin与CDK装配成不同的复合体在细胞周期的不同时相发挥作用,保证细胞周期有序进行.
- 袁长青丁振华
- 关键词：细胞周期肿瘤
- Caspase的活化及其在细胞凋亡中的作用被引量：77
- 2002年
- Caspase是执行细胞凋亡的主要酶类 ,目前已鉴定的哺乳动物Caspase有 14种。Caspase以酶原的形式合成 ,催化活性很低 ,必须激活以后才能发挥作用。活化的Caspase通过特异性的裂解一套底物而导致细胞凋亡。与Caspase有关的细胞凋亡通路至少有三种 :线粒体 /细胞色素c通路、死亡受体通路和内质网通路。Caspase总是与其抑制剂共存 。
- 袁长青丁振华
- 关键词：CASPASE活化细胞凋亡信号转导底物抑制剂
- XK469和阿霉素对H460细胞生长的影响及其机制被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨XK469和阿霉素对H460细胞的抑制作用及其机制。方法 采用MTT比色法观察不同浓度XK469、XN472和阿霉素对H460细胞生长的影响,采用流式细胞术观察药物作用下细胞周期的变化。采用Western blotting检测药物作用后H460细胞内cdc2和phos-cdc2的表达水平。结果 不同浓度XK469、阿霉素可明显抑制H460细胞的生长,导致H460细胞发生G2/M期阻滞,胞内phos-cdc2表达明显增高。20μg/ml以上浓度XN472作用24 h可抑制H460细胞生长,但是到120 h时抑制作用消失。结论 XK469和阿霉素通过使H460细胞内phos-cdc2水平增高导致其G2/M期阻滞从而抑制其增殖生长,7-氯结构对XK469的抗肿瘤效应有重要的意义。
- 凌朝辉杜华袁长青马树东郑莉丁振华
- UVA诱导的细胞凋亡通过神经酰胺和JNK信号通路被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨神经酰胺和JNK信号通路在UVA诱导的细胞凋亡中的作用。方法 分别用MTT法和DNA梯形条带检测细胞死亡率和细胞凋亡 ;Westernblot分析JNK信号通路的激活情况。结果 UVA照射后 ,正常的淋巴细胞JY出现明显的细胞凋亡 ,而MS 14 18细胞则没有。MS 14 18来自D型Niemann Pick病人 ,酸性鞘磷脂水解酶遗传性缺陷 ,导致神经酰胺产生受阻。给予外源性神经酰胺 ,两种细胞都出现明显的细胞凋亡 ,表明UVA诱导的细胞凋亡是通过神经酰胺介导的。UVA激活了JY而不是MS 14 18细胞的JNK信号通路 ;给予外源性神经酰胺 ,两种细胞的JNK信号通路都被激活 ,说明神经酰胺位于JNK信号通路的上游。结论 UVA诱导的细胞凋亡依赖神经酰胺和JNK信号通路。
- 袁长青丁振华杜华凌朝辉马树东
- 关键词：JNK信号通路细胞凋亡神经酰胺细胞死亡
- 辐射诱导细胞凋亡的信号转导通路被引量：2
- 2003年
- 袁长青丁振华
- 关键词：细胞凋亡信号转导通路线粒体通路
