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骨形态发生蛋白2在骨损伤不同时期的表达: 2008年; 目的:检测骨形态发生蛋白2(BMP2)在骨损伤不同时期的表达,了解其高峰表达时间。方法:实验组18只大鼠胫骨损伤造模,对照组6只大鼠假手术后处死,实验组平均分为3组,分别于术后第5天、第15天和第30天处死,提取大鼠骨组织总RNA,RT-PCR后扩增BMP2开放读框中编码成熟肽的基因片段,与pGEM-TEasy载体连接纯化后建立实时荧光定量PCR的标准曲线,检测BMP2的表达水平。结果:BMP2的表达在骨损伤后第5天开始升高,第15天达到高峰,第30天稍高于正常水平。结论:高峰表达时间的确定为进一步研究提供了理论上的依据。; 董茵张瑞舒剑波郭刚; 关键词：骨形态发生蛋白质类聚合酶链反应动物

实时荧光定量检测骨质疏松大鼠骨损伤相关因子: 目的：探讨骨质疏松大鼠骨损伤愈合不同时间点BMP2、BMP7、TGF-β、bFGF、IGF-I基因的表达的水平,了解其高峰表达时间,比较对照组与骨质疏松组之间表达图谱的不同,探寻几个因子之间的相互关系。方法：56...; 董茵; 关键词：骨质疏松 BMP2 BMP7; 文献传递

骨质疏松性骨损伤愈合过程中细胞生长因子的动态表达被引量：4: 2009年; 目的:从分子水平上探讨细胞生长因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨质疏松大鼠骨损伤愈合过程中的表达水平及其相互作用。方法:3月龄雌性大鼠64只,以去卵巢方法建立骨质疏松大鼠模型,分为骨质疏松组(OVX组)32只和假手术组(SX组)32只。运用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、bFGF在OVX和SX组大鼠骨组织中的表达水平。结果:(1)OVX组和SX组组内骨损伤后不同时间点TGF-β1、bFGF表达水平的差别具有统计学意义(P<0.01)。5d开始逐渐升高,15d时达到高峰,30d时回落到低水平。(2)OVX组TGF-β1、bFGFmRNA的表达水平均低于同时期SX组的水平。结论:TGF-β1、bFGF在骨损伤后存在约4周的周期性表达,并且于骨质疏松性骨损伤处表达减少,这是其愈合质量下降的重要因素。TGF-β1、bFGF的表达趋势类似,提示它们之间可能存在某种协同作用。; 李媛张瑞董茵郭刚; 关键词：骨质疏松成纤维细胞生长因子2 WISTAR

大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5: 2008年; 目的建立用荧光定量PCR方法检测大鼠bFGF基因mRNA水平。方法以Trizol一步法提取新鲜骨组织总RNA，以Oligo（dt）18为引物逆转录产生cDNA并进行扩增，以T-A克隆法将纯化的目的片断与PGEM—T Easy载体连接成重组质粒并转化E．coli DH5α。采用碱裂解法提取重组质粒，经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后，根据标准品建立标准曲线，由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量，并以靶基因和内参GAPDH mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果由PGEM-T Easy—bFGF所构建的标准曲线线性关系良好（反应体系中含1×10^2～1×10^7拷贝大鼠bFGF基因分子时，扩增反应α值与拷贝数的对数成线性关系）、灵敏度高、特异性强、准确可靠。批内和批间重复性测定的变异系数分别为1．03％～4、59％以及2．24％～6．46％。结论成功建立了用实时荧光定量PCR检测大鼠bFGF基因表达量的方法。; 舒剑波张瑞董茵郭刚; 关键词：碱性成纤维生长因子 SYBR 实时荧光定量PCR

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董茵