葛昕
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 睫状神经营养因子通过ERK1/2信号通路对成人成肌细胞体外分化的研究
- 成肌细胞是中胚层来源的组织特异性细胞，有较强的自我更新能力，在出生后骨骼肌的损伤、修复和维持中起着重要的作用。随着成肌细胞作为自身成体种子细胞所展示的良好临床应用前景，寻求成肌细胞体外增殖和分化的调控因子显得日益重要。大...
- 葛昕
- 关键词：睫状神经营养因子信号通路成人成肌细胞骨骼肌纤维外源性因素
- 文献传递
- 人胰腺干细胞建系及移植诱导胰岛治疗大鼠糖尿病被引量：7
- 2008年
- 供体不足已成为移植胰岛治疗Ⅰ型和部分Ⅱ型糖尿病的主要障碍,分离克隆胰腺干细胞作为种子细胞并诱导其分化为功能性胰岛可提供丰富的移植资源.本研究从人流产胎儿胰腺组织分离获得1例单克隆胰腺干细胞系.无菌取流产胎儿胰腺组织,0.1%Ⅳ型胶原酶消化分离为单个细胞和细胞团.低糖DMEM+10%FBS培养,单个细胞和细胞团贴壁,原代上皮样胰腺干细胞克隆性生长.0.25%胰蛋白酶+0.04%已二胺四乙酸(EDTA)消化传代,成纤维样细胞和其他细胞逐渐被消除,上皮样胰腺干细胞逐渐被纯化.克隆环筛选,获得单克隆人胰腺干细胞.在培养液中添加10ng/mL表皮生长因子(EGF),单克隆人胰腺干细胞快速生长至单层,呈铺路石样.继续传代培养,1例来源于4月龄男性流产胎儿胰腺干细胞已传50代.液氮冷冻保存细胞1×109个以上.染色体核型分析,该干细胞系为正常的二倍体细胞.免疫组织化学反应,共表达pdx1,glucagon,nestin及CK19蛋白,不表达insulin,CD34,CD44及CD45.RT-PCR检测,转录pdx1,glucagon,nestin及CK19的mRNA,不转录insulin.β-巯基乙醇诱导,分化为神经细胞,免疫组织化学反应表达NF蛋白.烟酰胺诱导,分化为DTZ染色阳性,转录表达insulin,分泌insulin和C肽的功能性类胰岛.将单克隆人胰腺干细胞体外诱导胰岛移植在STZ制备的糖尿病大鼠肾囊内,能降低糖尿病大鼠血糖水平,延长寿命.
- 效梅安立龙杨学义葛昕乔海赵婷马霄飞樊敬庄朱梦漾窦忠英
- 关键词：胰腺干细胞单克隆分化
- 外源性rhCNTF抑制成人成肌细胞体外分化作用及其信号机制
- 2010年
- 为探讨成肌细胞体外分化的机理,采用免疫组织化学和Western blot等方法,分析重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)对成人成肌细胞体外分化的作用及其信号机制。结果表明:①rhCNTF可逆性抑制成人成肌细胞体外融合(P<0.01);②rhCNTF显著增加成人成肌细胞分化期间的p130阳性"储备细胞"数量(P<0.01);③Western blot分析显示,rhCNTF可诱导ERK1/2磷酸化激活、成肌分化特异标志myogenin和p21蛋白表达的抑制以及"储备细胞"特异性标志p130蛋白水平的增加。首次发现,外源性rhCNTF可通过ERK1/2信号通路的激活增加"储备细胞"数量,可逆性抑制成人成肌细胞的体外分化。为进一步开展rhC-NTF在成人骨骼肌损伤修复中的作用研究奠定了基础。
- 葛昕李亚明窦忠英
- 关键词：成肌细胞分化
- 人胰腺干细胞建系的研究
- 窦忠英效梅安立龙华进联雷安民杨学义马宵飞葛昕朱婧乔海赵亭樊敬庄
- 经细胞形态、克隆行为、免疫组化染色、RT-PCR、体外定向诱导分化、体内自然分化、染色体核型分析、线粒体DNA分析及诱导胰岛移植抗大鼠糖尿病等方法检测，证实本实验室建立的人胎儿胰腺干细胞系具有人胰腺干细胞的特征。人胎儿胰...
- 关键词：
- 关键词：人胎儿
